Kliniske og molekylære korrelater af respons på førstelinjebehandling i Lichen Planus

UDVÆLGELSE AF DELTAGERE OG TILMELDING

IDENTIFIKATION AF DELTAGERE Alle deltagere vil blive udvalgt blandt deltagere fra Oral & Maxillofacial Unit, Women's Day Clinic og Aberdeen Dental School på Foresterhill Campus. Forskerholdet vil identificere kvalificerede deltagere til undersøgelsen ved at screene gennem gennemgang af deres elektroniske optegnelser. Caldicott Guardian-godkendelse vil blive søgt for Sreedevi P.U for at få direkte adgang til patientens kliniske journaler til screeningsformål. Patienter diagnosticeret med oral eller oral og vulvovaginal lichen planus vil blive rekrutteret til undersøgelsen, kun efter biopsibekræftelse. Diagnosen lichen planus vil blive stillet på grundlag af accepterede kliniske og histopatologiske fund, for at opfylde kriterierne for berettigelse, skal patienter gennemgå topisk steroidbehandling som en del af deres behandlingsplan for lichen planus.

SCREENING FOR BERETNING Patienter, der går på rutineklinikker, vil blive screenet for berettigelse gennem gennemgang af deres elektroniske journaler. Her understreger vi, at der ikke vil blive registreret undersøgelsesdata fra deltagerens læge-/tandjournaler, før vi har et skriftligt informeret samtykke fra dem. Patienternes berettigelse vil blive kontrolleret for foruddefinerede inklusions-/eksklusionskriterier ved at gennemgå kliniske og histopatologiske optegnelser over patienter, der er blevet diagnosticeret med lichen planus af det kliniske forskerhold.

SAMTYKKEDE DELTAGERE

Potentielt kvalificerede patienter vil blive kontaktet via en informationspakke til forskningsundersøgelsen sendt med posten. Forskningsundersøgelsens informationspakke vil omfatte: et invitationsbrev, et patientinformationsark (PIS), en returseddel og forudbetalt kuvert, som patienten kan meddele forskerholdet om, hvorvidt de ønsker at deltage eller ej. Hvis patienten er interesseret i at deltage, vil de blive kontaktet telefonisk af forskerholdet for at arrangere et besøg ved en dedikeret forskningsundersøgelsessession. På dette tidspunkt vil der blive indhentet skriftligt informeret samtykke fra potentielt kvalificerede patienter efter at have haft en mundtlig diskussion om undersøgelsens art og besvaret eventuelle spørgsmål, patienten måtte have. Informeret samtykke fra patienter med oral lichen planus vil blive indhentet af Dr. Sreedevi P.U, og forskningssygeplejersken, der er nævnt i denne ansøgning, vil være involveret i at opnå samtykke fra patienter med vulvovaginal sygdom. Patienterne vil få samtykke til følgende aspekter:

1. Gennemgang af deres læge- og tandjournaler
2. Analyse af de histologiske optegnelser forbundet med lichen planus-diagnosen
3. Tilvejebringelse af yderligere information vedrørende værtsfaktorer, der potentielt kan forårsage progression af lichen planus, hvis de ikke allerede er tilgængelige i patientjournalerne.
4. Udfylde spørgeskema relateret til stressniveauer.
5. Intraoral undersøgelse
6. Prøveindsamling (blod, spyt, podninger)
7. Vulvovaginal undersøgelse og prøveudtagning (hvor relevant)
8. Opfølgende aftale efter behandling.
9. Opbevaring og brug af deres prøver til etisk reviderede og godkendte fremtidige undersøgelser.
10. Kontaktes af undersøgelsesteamet for fremtidige etisk godkendte undersøgelser.

STUDIE VURDERINGER

Følgende kliniske oplysninger vil blive registreret for alle patienter, hvis de ikke allerede er tilgængelige via patientens læge-/tandjournaler:

1. Tand-/medicinsk historie omfatter tidligere og nuværende tand- og medicinske tilstande.
2. Social historie omfatter rygestatus, alkoholforbrug og stressniveauer. 10-elements Perceived Stress Scale (PSS-10) vil blive brugt til at vurdere opfattet stressniveau hos patienter med lichen planus. Det er en selvrapporteringsskala, som måler i hvilken grad situationer den sidste måned i respondentens liv vurderes som uforudsigelige, ukontrollerbare og overbelastende.

3. Vurdering af oral sundhed

   Patienter, der rekrutteres til undersøgelsen, vil gennemgå en delvis vurdering af oral sundhed med henblik på at registrere følgende information:

   • Mundhygiejnestatus Skal vurderes ved at udføre Simplified Oral Hygiene Index (OHI-S), som har to komponenter, Debris Index-Simplified (DI-S) og Calculus Index-Simplified (CI-S).
   • Grundlæggende parodontal undersøgelse En grundlæggende parodontal undersøgelse er en rutinemæssig screeningsundersøgelse, der udføres for at vurdere parodontal sundhed. Det involverer sondering af parodontale væv for at vurdere tilstedeværelsen af ​​blødning på sondering, plak- og tandstensaflejringer og dybden af ​​eventuelle parodontale lommer, der måtte være til stede. Grundlæggende parodontal undersøgelse vil blive udført i overensstemmelse med retningslinjerne fra British Society of Periodontology.
   • Score for sygdomssværhedsgrad af Lichen Planus Det vil blive bedømt baseret på involvering, sygdomsaktivitet og smerte ved at bruge det bedste scoresystem identificeret ved at udføre en systematisk gennemgang.
   • Detalje af ordineret topisk steroidregime for lichen planus: type kortikosteroid, formulering, applikationshyppighed, behandlingsvarighed.
4. Vulvovaginal undersøgelse Patienter diagnosticeret med vulvo-vaginal lichen planus vil gennemgå en vulval undersøgelse for formelt at vurdere sygdommens sværhedsgrad. En spekulumundersøgelse vil blive udført for at vurdere sværhedsgraden af ​​sygdommen for de kvinder med vaginal sygdom og for at indsamle en vatpind af skedesekret.
5. UDTAGNING AF PRØVER Prøver (spyt, blod, mundprøver og vaginal prøveudtagning (hvis relevant) vil blive indsamlet fra patienten, der har startet deres topiske steroidbehandling, rettet mod mikrobiom- og immunmarkøranalyser. Deltagerne skal gennemgå en anden prøvetagning efter afslutningen af ​​topisk steroidbehandling cirka to måneder efter deres første besøg.

Spyt: Til denne undersøgelse vil vi indsamle to ustimulerede fasteprøver af hel spyt, en prøve til undersøgelse af inflammatoriske/immune faktorer, en anden prøve til mikrobiomundersøgelserne. For at reducere antallet af variabler, der kan interferere med sammensætningen af ​​de mikrobielle populationer, der koloniserer det orale væv, vil kvalificerede patienter blive bedt om ikke at bruge antibakterielle mundskyllevand i 48 timer før besøget. Patienterne vil også blive bedt om helst at deltage i morgenklinikker, så prøver kan indsamles, før deltagerne spiser morgenmaden.

Orale podninger: To orale podninger (en fra angrebet væv, en fra tilstødende sundt væv). Patienter vil blive rådgivet om ikke at bruge antibakterielle mundskyllevand i 48 timer før de orale podninger. De vil også blive bedt om at deltage i morgenklinikkerne for at reducere kostens indflydelse på prøveudtagningsresultaterne.

Vulvovaginal prøvetagning: For alle patienter med vaginal og/eller vulval sygdom vil vi indsamle 1 cervico-vaginal lavageprøve og op til 3 podninger, der er repræsentative for sunde og syge områder. Deltagerne vil blive bedt om at afholde sig fra sex i 24 timer før deres aftale.

Blod: En blodprøve (op til 40 ml) vil også blive indsamlet fra patienter, fra hvilke baseline hæmatologiske og biokemiske parametre (fuldt blodtal, hæmatinik, tilfældig blodsukker, leverfunktionstest og Urea & Elektrolytter) ikke er tilgængelige. En yderligere prøve vil også blive indsamlet til analyse af inflammatoriske markører.

Alle prøver vil blive overført til Institute of Medical Sciences (University of Aberdeen) til mikrobiom- og immunmarkøranalyse.

Histologiske sektioner af biopsier udført som en del af rutinemæssig klinisk pleje vil blive hentet fra Grampian Biorepository til digitale patologiundersøgelser.

DATAANALYSE Sygdomsrespons efter afslutning af topisk steroidbehandling vil blive modelleret ved hjælp af en lineær regressionsmodel. Modellen vil justere for baseline sygdomsniveauer (målt ved hjælp af lichen planus sværhedsgradsscore) sammen med kliniske og molekylære karakteristika og vurdere forholdet mellem disse prædiktorer og lichen planus sværhedsgrad efter behandling. I tilfælde af at antagelser for den lineære regressionsmodel på de observerede data ikke er opfyldt, vil alternative modelleringsmuligheder såsom ordinær regression eller logistisk regressionsmodel blive udforsket.

Mikrobiel diversitet vil blive vurderet ved molekylære og mikrobielle tilgange, herunder, men ikke udelukkende, næste generations sekventering og multi-locus sekvenstypebestemmelse. Analyse af data genereret af næste generations sekventering vil blive udført på University of Aberdeen med henvisning til Human Oral Microbiome Database eller CORE-databasen.

Analyse af værtsresponser (herunder CD4+-hjælper- og CD8+-cytotoksiske T-celler, deres udskilte pro-inflammatoriske og anti-inflammatoriske cytokinprofiler og eventuelle specifikke autoantistoffer) vil hovedsageligt blive udført ved RT-PCR, immunblotting og flow-cytometri.

Analyse af histopatologiske billeder vil være rettet mod at registrere følgende information:

• Kvantificering af morfologiske parametre på vævs- og celleniveau
• Kvantificering af immunmarkører såsom CD4+T-celler, Foxp3, CD8+T-celler, PD-1, PDL-1 og TLR'er.

Billedbehandlingen og analysen vil blive udført ved hjælp af billedanalysesoftwarepakkerne ImageJ og QuPath med åben adgang.