Kliniska och molekylära korrelat av respons på första linjens behandling i Lichen Planus

VAL AV DELTAGARE OCH ANMÄLAN

IDENTIFIERA DELTAGARE Alla deltagare kommer att väljas från deltagare från Oral & Maxillofacial Unit, Women's Day Clinic och Aberdeen Dental School på Foresterhill Campus. Forskargruppen kommer att identifiera kvalificerade deltagare för studien genom att genomgå granskning av deras elektroniska register. Caldicott Guardians godkännande kommer att sökas för Sreedevi P.U för att få direkt tillgång till patientjournaler för screeningsändamål. Patienter som diagnostiserats med oral eller oral och vulvovaginal lichen planus kommer att rekryteras till studien, först efter biopsibekräftelse. Diagnosen av lichen planus kommer att göras på grundval av accepterade kliniska och histopatologiska fynd, för att uppfylla kriterierna för behörighet måste patienter genomgå topikal steroidbehandling som en del av sin hanteringsplan för lichen planus.

SCREENING FÖR BEHÖRIGHET Patienter som går på rutinkliniker kommer att screenas för behörighet genom granskning av deras elektroniska journaler. Här betonar vi att inga studiedata kommer att registreras från deltagarens medicinska/tandvårdsjournaler, förrän vi har ett skriftligt informerat samtycke från dem. Patienternas behörighet kommer att kontrolleras för fördefinierade inklusions-/exklusionskriterier genom att granska kliniska och histopatologiska register över patienter som har diagnostiserats med lichen planus av det kliniska forskarteamet.

SAMTYKANDE DELTAGARE

Potentiellt kvalificerade patienter kommer att kontaktas via ett informationspaket för forskningsstudier som skickas per post. Forskningsstudiens informationspaket kommer att innehålla: ett inbjudningsbrev, ett patientinformationsblad (PIS), en retursedel och ett förbetalt kuvert för att patienten ska meddela forskargruppen om de vill delta eller inte. Om patienten är intresserad av att delta, kommer forskargruppen att kontakta denne per telefon för att ordna ett besök vid en särskild forskningsstudiesession. Vid denna tidpunkt kommer skriftligt informerat samtycke att erhållas från potentiellt kvalificerade patienter efter att ha haft en muntlig diskussion om studiens karaktär och besvarat eventuella frågor som patienten kan ha. Informerat samtycke från patienter med oral lichen planus kommer att erhållas av Dr Sreedevi P.U och forskningssjuksköterskan som nämns i denna ansökan kommer att vara involverad i att erhålla samtycke från patienter med vulvovaginal sjukdom. Patienterna kommer att godkännas för följande aspekter:

1. Granskning av deras medicinska och tandvårdsjournaler
2. Analys av de histologiska uppgifterna i samband med diagnosen lichen planus
3. Tillhandahållande av ytterligare information om värdfaktorer som potentiellt kan leda till progression av lichen planus om den inte redan finns tillgänglig i patientjournalerna.
4. Fylla i frågeformulär relaterat till stressnivåer.
5. Intraoral undersökning
6. Provtagning (blod, saliv, pinnar)
7. Vulvovaginal undersökning och provtagning (i förekommande fall)
8. Uppföljande tid efter behandling.
9. Lagring och användning av deras prover för etiskt granskade och godkända framtida studier.
10. Att kontaktas av studieteamet för framtida etiskt godkända studier.

STUDIEBEDÖMNINGAR

Följande klinisk information kommer att registreras för alla patienter om den inte redan är tillgänglig via patientens medicinska/tandvårdsjournaler:

1. Dental/medicinsk historia inkluderar tidigare och nuvarande tand- och medicinska tillstånd.
2. Social historia inkluderar rökstatus, alkoholkonsumtion och stressnivåer. Den 10-delade Perceived Stress Scale (PSS-10) kommer att användas för att bedöma upplevd stressnivå hos patienter med lichen planus. Det är en självrapporteringsskala som mäter i vilken grad situationer under den senaste månaden i respondentens liv bedöms som oförutsägbara, okontrollerbara och överbelastade.

3. Bedömning av oral hälsa

   Patienter som rekryteras till studien kommer att genomgå en partiell bedömning av oral hälsa som syftar till att registrera följande information:

   • Munhygienstatus Ska bedömas genom att utföra förenklat munhygienindex (OHI-S) som har två komponenter, Debris Index-Simplified (DI-S) och Calculus Index-Simplified (CI-S).
   • Grundläggande parodontal undersökning En grundläggande parodontit undersökning är en rutinundersökning som görs för att bedöma parodontit hälsa. Det involverar sondering av parodontala vävnader för att bedöma förekomsten av blödning på sondering, plack och tandstensavlagringar och djupet av eventuella parodontala fickor som kan finnas. Grundläggande periodontal undersökning kommer att genomföras i enlighet med riktlinjerna från British Society of Parodontology.
   • Sjukdomspoäng för Lichen Planus Det kommer att bedömas baserat på platsen för involvering, sjukdomsaktivitet och smärta med hjälp av det bästa poängsystemet som identifierats genom att genomföra en systematisk översyn.
   • Detalj av föreskriven topikal steroidregim för lichen planus: typ av kortikosteroid, formulering, appliceringsfrekvens, behandlingslängd.
4. Vulvovaginal undersökning Patienter som diagnostiserats med vulvovaginal lichen planus kommer att genomgå en vulvalundersökning för att formellt fastställa sjukdomens svårighetsgrad. En spekulumundersökning kommer att utföras för att bedöma sjukdomens svårighetsgrad för de kvinnor med vaginal sjukdom och för att samla in svabb av vaginalt sekret.
5. PROVTAGNING Prover (saliv, blod, munprover och vaginalprovtagning (i tillämpliga fall) kommer att samlas in från patienten som har påbörjat sin topikala steroidbehandling, som syftar till analyser av mikrobiom och immunmarkörer. Deltagarna kommer att behöva genomgå en andra provtagning efter avslutad topikal steroidbehandling cirka två månader efter deras första besök.

Saliv: För denna studie kommer vi att samla in två ostimulerade hel saliv fastande prover, ett prov för studien av inflammatoriska/immuna faktorer, ett annat prov för mikrobiome studier. För att minska antalet variabler som kan störa sammansättningen av de mikrobiella populationerna som koloniserar de orala vävnaderna, kommer kvalificerade patienter att uppmanas att inte använda antibakteriella munvatten under 48 timmar före besöket. Patienterna kommer också att uppmanas att helst gå på morgonmottagningar så att prover kan tas innan deltagarna äter frukosten.

Orala pinnar: Två orala pinnar (en från angripen vävnad, en från intilliggande frisk vävnad). Patienter kommer att uppmanas att inte använda antibakteriella munvatten under 48 timmar före munprovningen. De kommer också att uppmanas att gå på morgonklinikerna för att minska kostens påverkan på provtagningsresultaten.

Vulvovaginal provtagning: För alla patienter med vaginal och/eller vulval sjukdom kommer vi att samla in 1 cervico-vaginalt sköljprov och upp till 3 pinnar som är representativa för friska och sjuka områden. Deltagarna kommer att uppmanas att avstå från sex i 24 timmar innan deras möte.

Blod: Ett blodprov (upp till 40 ml) kommer också att tas från patienter från vilka hematologiska och biokemiska baslinjeparametrar (fullständigt blodvärde, hematinik, slumpmässigt blodsocker, leverfunktionstest och urea och elektrolyter) inte är tillgängliga. Ytterligare ett prov kommer också att samlas in för analys av inflammatoriska markörer.

Alla prover kommer att överföras till Institute of Medical Sciences (University of Aberdeen) för analys av mikrobiom och immunmarkörer.

Histologiska sektioner av biopsier som utförs som en del av rutinmässig klinisk vård kommer att hämtas från Grampian Biorepository för digitala patologistudier.

DATAANALYS Sjukdomssvar efter avslutad topikal steroidbehandling kommer att modelleras med hjälp av en linjär regressionsmodell. Modellen kommer att justera för sjukdomsnivåerna vid baslinjen (mätt med lichen planus svårighetspoäng) tillsammans med kliniska och molekylära egenskaper och bedöma sambandet mellan dessa prediktorer och lichen planus svårighetsgrad efter behandling. I händelse av att antaganden för den linjära regressionsmodellen på de observerade data inte uppfylls, kommer alternativa modelleringsalternativ såsom ordinär regression eller logistisk regressionsmodell att undersökas.

Mikrobiell mångfald kommer att bedömas genom molekylära och mikrobiella tillvägagångssätt inklusive men inte uteslutande nästa generations sekvensering och multi-locus sekvenstypning. Analys av data som genereras av nästa generations sekvensering kommer att utföras vid University of Aberdeen med hänvisning till Human Oral Microbiome Database eller CORE-databasen.

Analys av värdsvar (inklusive CD4+-hjälpare och CD8+ cytotoxiska T-celler, deras utsöndrade pro-inflammatoriska och antiinflammatoriska cytokinprofiler och eventuella specifika autoantikroppar) kommer att utföras huvudsakligen genom RT-PCR, immunoblotting och flow-cytometri.

Analys av histopatologiska bilder kommer att syfta till att registrera följande information:

• Kvantifiering av morfologiska parametrar på vävnads- och cellnivå
• Kvantifiering av immunmarkörer såsom CD4+T-celler, Foxp3, CD8+T-celler, PD-1, PDL-1 och TLR.

Bildbehandlingen och analysen kommer att utföras med hjälp av mjukvarupaketen ImageJ och QuPath med öppen access.