Corrélats cliniques et moléculaires de la réponse au traitement de première intention du lichen plan

SÉLECTION ET INSCRIPTION DES PARTICIPANTS

IDENTIFICATION DES PARTICIPANTS Tous les participants seront sélectionnés parmi les préposés de l'unité buccale et maxillo-faciale, de la clinique de jour pour femmes et de l'école dentaire d'Aberdeen sur le campus de Foresterhill. L'équipe de recherche identifiera les participants éligibles à l'étude en procédant à une sélection par examen de leurs dossiers électroniques. L'approbation de Caldicott Guardian sera demandée pour que Sreedevi P.U ait un accès direct aux dossiers cliniques des patients à des fins de dépistage. Les patients diagnostiqués avec un lichen plan oral ou oral et vulvo-vaginal seront recrutés dans l'étude, uniquement après confirmation par biopsie. Le diagnostic de lichen plan sera établi sur la base de résultats cliniques et histopathologiques acceptés. Pour répondre aux critères d'éligibilité, les patients doivent suivre une corticothérapie topique dans le cadre de leur plan de gestion du lichen plan.

DÉPISTAGE DE L'ÉLIGIBILITÉ Les patients fréquentant les cliniques de routine seront sélectionnés pour leur admissibilité par l'examen de leurs dossiers électroniques. Ici, nous soulignons qu'aucune donnée d'étude ne sera enregistrée à partir des dossiers médicaux/dentaires des participants, jusqu'à ce que nous ayons un consentement éclairé écrit de leur part. L'éligibilité des patients sera vérifiée pour les critères d'inclusion/exclusion prédéfinis en examinant les dossiers cliniques et histopathologiques des patients chez qui l'équipe de recherche clinique a diagnostiqué un lichen plan.

PARTICIPANTS CONSENTANTS

Les patients potentiellement éligibles seront contactés par le biais d'un dossier d'information sur l'étude de recherche envoyé par la poste. Le dossier d'information sur l'étude de recherche comprendra : une lettre d'invitation, une fiche d'information du patient (PIS), un bordereau de retour et une enveloppe prépayée permettant au patient d'informer l'équipe de recherche de son souhait ou non de participer. Si le patient est intéressé à participer, il sera contacté par téléphone par l'équipe de recherche pour organiser une visite lors d'une session d'étude de recherche dédiée. À ce stade, un consentement éclairé écrit sera obtenu des patients potentiellement éligibles après avoir eu une discussion verbale sur la nature de l'étude et répondu à toutes les questions que le patient pourrait avoir. Le consentement éclairé des patients atteints de lichen plan oral sera obtenu par le Dr Sreedevi P.U et l'infirmière de recherche nommée dans cette demande sera impliquée dans l'obtention du consentement des patients atteints de maladie vulvo-vaginale. Les patients seront consentis pour les aspects suivants :

1. Examen de leurs dossiers médicaux et dentaires
2. Analyse des dossiers histologiques associés au diagnostic de lichen plan
3. Fourniture d'informations supplémentaires relatives aux facteurs de l'hôte potentiellement responsables de la progression du lichen plan si elles ne sont pas déjà disponibles dans les dossiers des patients.
4. Remplir un questionnaire lié au niveau de stress.
5. Examen intra-oral
6. Prélèvement d'échantillons (sang, salive, écouvillons)
7. Examen vulvo-vaginal et prélèvement (le cas échéant)
8. Rendez-vous de suivi post-traitement.
9. Stockage et utilisation de leurs échantillons pour de futures études éthiquement examinées et approuvées.
10. Être contacté par l'équipe de l'étude pour de futures études approuvées sur le plan éthique.

ÉVALUATIONS DES ÉTUDES

Les informations cliniques suivantes seront enregistrées pour tous les patients si elles ne sont pas déjà disponibles dans les dossiers médicaux/dentaires du patient :

1. Les antécédents dentaires/médicaux comprennent les affections dentaires et médicales passées et actuelles.
2. Les antécédents sociaux comprennent le statut tabagique, la consommation d'alcool et les niveaux de stress. L'échelle de stress perçu en 10 points (PSS-10) sera utilisée pour évaluer le niveau de stress perçu chez les patients atteints de lichen plan. Il s'agit d'une échelle d'auto-évaluation qui mesure le degré auquel les situations du dernier mois de la vie du répondant sont évaluées comme imprévisibles, incontrôlables et surchargeantes.

3. Évaluation de la santé bucco-dentaire

   Les patients recrutés pour l'étude subiront une évaluation partielle de la santé bucco-dentaire visant à enregistrer les informations suivantes :

   • État d'hygiène bucco-dentaire À évaluer en effectuant un indice d'hygiène buccale simplifié (OHI-S) qui comporte deux composants, l'indice de débris simplifié (DI-S) et l'indice de tartre simplifié (CI-S).
   • Examen parodontal de base Un examen parodontal de base est une enquête de dépistage de routine effectuée pour évaluer la santé parodontale. Cela implique de sonder les tissus parodontaux pour évaluer la présence de saignements au sondage, de dépôts de plaque et de tartre et la profondeur de toutes les poches parodontales qui peuvent être présentes. L'examen parodontal de base sera effectué conformément aux directives de la British Society of Periodontology.
   • Score de gravité de la maladie du lichen plan Il sera noté en fonction du site d'atteinte, de l'activité de la maladie et de la douleur à l'aide du meilleur système de notation identifié lors d'une revue systématique.
   • Détail du régime stéroïdien topique prescrit pour le lichen plan : type de corticoïde, formulation, fréquence d'application, durée du traitement.
4. Examen vulvo-vaginal Les patientes diagnostiquées avec un lichen plan vulvo-vaginal subiront un examen vulvaire pour évaluer formellement la gravité de la maladie. Un examen au spéculum sera effectué pour évaluer la gravité de la maladie chez les femmes atteintes d'une maladie vaginale et pour prélever un prélèvement de sécrétions vaginales.
5. PRÉLÈVEMENT DES ÉCHANTILLONS Des échantillons (salive, sang, écouvillons oraux et prélèvements vaginaux (le cas échéant) seront prélevés chez les patientes qui ont commencé leur traitement topique aux stéroïdes, en vue d'analyses du microbiome et des marqueurs immunitaires. Les participants devront subir un deuxième prélèvement après la fin du traitement aux stéroïdes topiques environ deux mois après leur première visite.

Salive : Pour cette étude, nous collecterons deux échantillons de salive entière non stimulée à jeun, un échantillon pour l'étude des facteurs inflammatoires/immunitaires, un autre échantillon pour les études sur le microbiome. Afin de réduire le nombre de variables susceptibles d'interférer avec la composition des populations microbiennes colonisant les tissus buccaux, il sera demandé aux patients éligibles de ne pas utiliser de bains de bouche antibactériens pendant 48 heures avant la visite. Les patients seront également invités à assister de préférence aux cliniques du matin afin que des échantillons puissent être collectés avant que les participants ne prennent le petit-déjeuner.

Écouvillons oraux : deux écouvillons oraux (un provenant du tissu affecté, un provenant du tissu sain adjacent). Les patients seront avisés de ne pas utiliser de rince-bouche antibactérien pendant 48 heures avant les prélèvements oraux. Ils seront également invités à assister aux cliniques du matin afin de réduire l'influence de l'alimentation sur les résultats d'échantillonnage.

Prélèvement vulvo-vaginal : pour toutes les patientes présentant une maladie vaginale et/ou vulvaire, nous prélèverons 1 échantillon de lavage cervico-vaginal et jusqu'à 3 écouvillons représentatifs des zones saines et malades. Les participants seront invités à s'abstenir de relations sexuelles pendant 24 heures avant leur rendez-vous.

Sang : un échantillon de sang (jusqu'à 40 ml) sera également prélevé chez des patients dont les paramètres hématologiques et biochimiques de base (numération sanguine complète, hématinique, glycémie aléatoire, test de la fonction hépatique et urée et électrolytes) ne sont pas disponibles. Un échantillon supplémentaire sera également prélevé pour l'analyse des marqueurs inflammatoires.

Tous les échantillons seront transférés à l'Institut des sciences médicales (Université d'Aberdeen) pour analyse du microbiome et des marqueurs immunitaires.

Les coupes histologiques des biopsies réalisées dans le cadre des soins cliniques de routine proviendront du Grampian Biorepository pour les études de pathologie numérique.

ANALYSE DES DONNÉES La réponse de la maladie après la fin du traitement aux stéroïdes topiques sera modélisée à l'aide d'un modèle de régression linéaire. Le modèle ajustera les niveaux de base de la maladie (mesurés à l'aide du score de gravité du lichen plan) ainsi que les caractéristiques cliniques et moléculaires et évaluera la relation de ces prédicteurs avec la gravité du lichen plan après le traitement. Dans le cas où les hypothèses du modèle de régression linéaire sur les données observées ne sont pas remplies, d'autres options de modélisation telles que la régression ordinale ou le modèle de régression logistique seront explorées.

La diversité microbienne sera évaluée par des approches moléculaires et microbiennes, y compris, mais pas exclusivement, le séquençage de nouvelle génération et le typage de séquences multi-locus. L'analyse des données générées par le séquençage de nouvelle génération sera effectuée à l'Université d'Aberdeen en référence à la base de données du microbiome oral humain ou à la base de données CORE.

L'analyse des réponses de l'hôte (y compris les lymphocytes T auxiliaires CD4+ et CD8+ cytotoxiques, leurs profils de cytokines pro-inflammatoires et anti-inflammatoires sécrétées et tout auto-anticorps spécifique) sera effectuée principalement par RT-PCR, immunotransfert et cytométrie en flux.

L'analyse des images histopathologiques visera à enregistrer les informations suivantes :

• Quantification des paramètres morphologiques aux niveaux tissulaire et cellulaire
• Quantification de marqueurs immunitaires tels que les lymphocytes T CD4+, Foxp3, les lymphocytes T CD8+, PD-1, PDL-1 et les TLR.

Le traitement et l'analyse des images seront effectués à l'aide des progiciels d'analyse d'images en libre accès ImageJ et QuPath.