Klinische und molekulare Korrelate des Ansprechens auf die First-Line-Behandlung bei Lichen planus

TEILNEHMERAUSWAHL UND EINSCHREIBUNG

IDENTIFIZIERUNG DER TEILNEHMER Alle Teilnehmer werden aus den Mitarbeitern der Oral & Maxillofacial Unit, der Women's Day Clinic und der Aberdeen Dental School auf dem Foresterhill Campus ausgewählt. Das Forschungsteam wird geeignete Teilnehmer für die Studie durch Screening durch Überprüfung ihrer elektronischen Aufzeichnungen identifizieren. Die Genehmigung von Caldicott Guardian wird beantragt, damit Sreedevi P.U direkten Zugang zu klinischen Patientenakten zu Screening-Zwecken erhält. Patienten, bei denen ein oraler oder oraler und vulvovaginaler Lichen planus diagnostiziert wurde, werden nur nach Bestätigung durch eine Biopsie in die Studie aufgenommen. Die Diagnose von Lichen planus wird auf der Grundlage akzeptierter klinischer und histopathologischer Befunde gestellt. Um die Eignungskriterien zu erfüllen, müssen sich die Patienten einer topischen Steroidtherapie als Teil ihres Behandlungsplans für Lichen planus unterziehen.

ÜBERPRÜFUNG AUF TEILNAHMEBERECHTIGUNG Patienten, die routinemäßige Kliniken besuchen, werden anhand ihrer elektronischen Aufzeichnungen auf ihre Eignung geprüft. An dieser Stelle betonen wir, dass keine Studiendaten aus den medizinischen/zahnärztlichen Aufzeichnungen der Teilnehmer aufgezeichnet werden, bis wir eine schriftliche Einverständniserklärung von ihnen haben. Die Eignung von Patienten wird auf vordefinierte Einschluss-/Ausschlusskriterien überprüft, indem klinische und histopathologische Aufzeichnungen von Patienten überprüft werden, bei denen vom klinischen Forschungsteam Lichen planus diagnostiziert wurde.

ZUSTIMMENDE TEILNEHMER

Potenziell in Frage kommende Patienten werden über ein per Post zugesandtes Informationspaket zu Forschungsstudien kontaktiert. Das Informationspaket zur Forschungsstudie enthält: ein Einladungsschreiben, ein Patienteninformationsblatt (PIS), einen Rücksendeschein und einen vorfrankierten Umschlag für den Patienten, um dem Forschungsteam mitzuteilen, ob er teilnehmen möchte oder nicht. Wenn der Patient an einer Teilnahme interessiert ist, wird er vom Forschungsteam telefonisch kontaktiert, um einen Besuch bei einer speziellen Forschungsstudiensitzung zu vereinbaren. Zu diesem Zeitpunkt wird von potenziell in Frage kommenden Patienten eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt, nachdem eine mündliche Diskussion über die Art der Studie geführt und alle Fragen des Patienten beantwortet wurden. Die Einwilligung nach Aufklärung von Patienten mit oralem Lichen planus wird von Dr. Sreedevi P.U eingeholt, und die in diesem Antrag genannte Forschungskrankenschwester wird an der Einholung der Einwilligung von Patienten mit Vulvovaginalerkrankung beteiligt sein. Patienten werden für die folgenden Aspekte eingewilligt:

1. Überprüfung ihrer medizinischen und zahnärztlichen Aufzeichnungen
2. Analyse der histologischen Aufzeichnungen im Zusammenhang mit der Lichen planus-Diagnose
3. Bereitstellung zusätzlicher Informationen in Bezug auf Wirtsfaktoren, die möglicherweise eine Lichen planus-Progression betreffen, falls nicht bereits in den Patientenakten vorhanden.
4. Fragebogen zum Stresslevel ausfüllen.
5. Intraorale Untersuchung
6. Probenentnahme (Blut, Speichel, Abstriche)
7. Vulvovaginale Untersuchung und Probenahme (falls relevant)
8. Folgetermin nach der Behandlung.
9. Lagerung und Verwendung ihrer Proben für ethisch geprüfte und genehmigte zukünftige Studien.
10. Kontaktaufnahme durch das Studienteam für zukünftige ethisch anerkannte Studien.

STUDIENAUSWERTUNGEN

Die folgenden klinischen Informationen werden für alle Patienten aufgezeichnet, sofern sie nicht bereits in den medizinischen/zahnärztlichen Unterlagen des Patienten verfügbar sind:

1. Die Zahn-/Krankengeschichte umfasst vergangene und aktuelle zahnärztliche und medizinische Bedingungen.
2. Die Sozialgeschichte umfasst den Raucherstatus, den Alkoholkonsum und das Stressniveau. Die 10-Punkte-Skala für wahrgenommenen Stress (PSS-10) wird verwendet, um das wahrgenommene Stressniveau bei Patienten mit Lichen planus zu bewerten. Es handelt sich um eine Selbsteinschätzungsskala, die misst, inwieweit Situationen im letzten Lebensmonat des Befragten als unvorhersehbar, unkontrollierbar und überfordernd eingeschätzt wurden.

3. Beurteilung der Mundgesundheit

   Patienten, die für die Studie rekrutiert werden, werden einer teilweisen Beurteilung der Mundgesundheit unterzogen, um die folgenden Informationen zu erfassen:

   • Mundhygienestatus Zu beurteilen durch Durchführung des vereinfachten Mundhygieneindex (OHI-S), der aus zwei Komponenten besteht, dem Debris Index-Simplified (DI-S) und dem Calculus Index-Simplified (CI-S).
   • Parodontale Basisuntersuchung Eine parodontale Basisuntersuchung ist eine routinemäßige Vorsorgeuntersuchung zur Beurteilung der parodontalen Gesundheit. Es beinhaltet die Sondierung des parodontalen Gewebes, um das Vorhandensein von Blutungen bei der Sondierung, Plaque- und Zahnsteinablagerungen und die Tiefe eventuell vorhandener parodontaler Taschen zu beurteilen. Die grundlegende parodontale Untersuchung wird gemäß den Richtlinien der British Society of Periodontology durchgeführt.
   • Bewertung des Schweregrads der Erkrankung von Lichen ruber Es wird basierend auf dem Ort der Beteiligung, der Krankheitsaktivität und den Schmerzen bewertet, wobei das beste Bewertungssystem verwendet wird, das durch die Durchführung einer systematischen Überprüfung identifiziert wurde.
   • Detail des vorgeschriebenen topischen Steroidregimes für Lichen planus: Art des Kortikosteroids, Formulierung, Anwendungshäufigkeit, Behandlungsdauer.
4. Vulvovaginale Untersuchung Patienten, bei denen ein vulvovaginaler Lichen planus diagnostiziert wurde, werden einer Vulvauntersuchung unterzogen, um den Schweregrad der Erkrankung offiziell zu bewerten. Eine Spekulumuntersuchung wird durchgeführt, um den Schweregrad der Erkrankung bei Frauen mit Vaginalerkrankungen zu beurteilen und einen Abstrich von Vaginalsekreten zu entnehmen.
5. ENTNAHME VON PROBEN Proben (Speichel, Blut, Mundabstriche und Vaginalproben (falls zutreffend) werden von Patienten entnommen, die mit ihrer topischen Steroidbehandlung begonnen haben, um Mikrobiom- und Immunmarkeranalysen durchzuführen. Die Teilnehmer müssen sich nach Abschluss der topischen Steroidbehandlung etwa zwei Monate nach ihrem ersten Besuch einer zweiten Probenahme unterziehen.

Speichel: Für diese Studie werden wir zwei unstimulierte Vollspeichel-Nüchternproben sammeln, eine Probe für die Untersuchung von Entzündungs-/Immunfaktoren, eine andere Probe für die Mikrobiomstudien. Um die Anzahl der Variablen zu reduzieren, die die Zusammensetzung der mikrobiellen Populationen beeinträchtigen können, die das Mundgewebe besiedeln, werden geeignete Patienten gebeten, 48 Stunden vor dem Besuch keine antibakteriellen Mundspülungen zu verwenden. Die Patienten werden auch gebeten, vorzugsweise morgendliche Kliniken zu besuchen, damit Proben gesammelt werden können, bevor die Teilnehmer das Frühstück einnehmen.

Mundabstriche: Zwei Mundabstriche (einer von betroffenem Gewebe, einer von benachbartem gesundem Gewebe). Den Patienten wird geraten, 48 Stunden vor den oralen Abstrichen keine antibakteriellen Mundspülungen zu verwenden. Sie werden auch gebeten, an den morgendlichen Kliniken teilzunehmen, um den diätetischen Einfluss auf die Probenahmeergebnisse zu verringern.

Vulvovaginale Probenentnahme: Bei allen Patientinnen mit Vaginal- und/oder Vulvaerkrankung werden wir 1 Zerviko-Vaginal-Lavage-Probe und bis zu 3 Abstriche entnehmen, die für gesunde und erkrankte Bereiche repräsentativ sind. Die Teilnehmer werden gebeten, 24 Stunden vor ihrem Termin auf Sex zu verzichten.

Blut: Eine Blutprobe (bis zu 40 ml) wird auch von Patienten entnommen, von denen keine hämatologischen und biochemischen Ausgangsparameter (großes Blutbild, Hämatinwerte, Zufallsblutzucker, Leberfunktionstest und Harnstoff und Elektrolyte) verfügbar sind. Außerdem wird eine zusätzliche Probe zur Analyse von Entzündungsmarkern entnommen.

Alle Proben werden zur Mikrobiom- und Immunmarkeranalyse an das Institute of Medical Sciences (University of Aberdeen) überführt.

Histologische Schnitte von Biopsien, die im Rahmen der routinemäßigen klinischen Versorgung durchgeführt werden, werden aus dem Grampian Biorepository für digitale Pathologiestudien bezogen.

DATENANALYSE Die Krankheitsantwort nach Abschluss der topischen Steroidbehandlung wird unter Verwendung eines linearen Regressionsmodells modelliert. Das Modell passt die Ausgangswerte der Erkrankung (gemessen anhand des Schweregrads des Lichen ruber) zusammen mit den klinischen und molekularen Merkmalen an und bewertet die Beziehung dieser Prädiktoren zum Schweregrad des Lichen planus nach der Behandlung. Für den Fall, dass Annahmen für das lineare Regressionsmodell auf den beobachteten Daten nicht erfüllt sind, werden alternative Modellierungsoptionen wie ordinale Regression oder logistische Regressionsmodelle untersucht.

Die mikrobielle Diversität wird durch molekulare und mikrobielle Ansätze bewertet, einschließlich, aber nicht ausschließlich, Next-Generation-Sequenzierung und Multi-Locus-Sequenztypisierung. Die Analyse der durch Next-Generation-Sequencing generierten Daten wird an der University of Aberdeen unter Bezugnahme auf die Human Oral Microbiome Database oder die CORE-Datenbank durchgeführt.

Die Analyse der Wirtsreaktionen (einschließlich zytotoxischer CD4+-Helfer- und CD8+-T-Zellen, ihrer sezernierten entzündungsfördernden und entzündungshemmenden Zytokinprofile und etwaiger spezifischer Autoantikörper) wird hauptsächlich durch RT-PCR, Immunoblotting und Durchflusszytometrie durchgeführt.

Die Analyse histopathologischer Bilder zielt darauf ab, die folgenden Informationen zu erfassen:

• Quantifizierung morphologischer Parameter auf Gewebe- und Zellebene
• Quantifizierung von Immunmarkern wie CD4+T-Zellen, Foxp3, CD8+T-Zellen, PD-1, PDL-1 und TLRs.

Die Bildverarbeitung und -analyse wird mit den frei zugänglichen Bildanalyse-Softwarepaketen ImageJ und QuPath durchgeführt.