Evaluering af serumautofagiske biomarkører i den akutte respons på gang og cykling hos raske mandlige individer

Formålet med undersøgelsen Formålet med denne undersøgelse er at evaluere de akutte effekter af gang og cykling på serum fysiologiske biomarkører forbundet med autofagi (Beclin-1, LC3 og ATG3).

Tidligere undersøgelser har hovedsageligt undersøgt ændringer i biomarkørniveauer efter en enkelt type motion. Derfor er effekterne af motionsprogrammer med forskellige mekaniske belastningskarakteristika på cirkulerende autofagi-relaterede biomarkører ikke tilstrækkeligt forstået.

Denne undersøgelse har til formål at sammenlignende undersøge de akutte effekter af to forskellige motionsprogrammer – gang og cykling – på serum biomarkører forbundet med autofagi.

Hypoteser H0: Der er ingen ændring i serum Beclin-1, LC3 og ATG3 niveauer efter gang og cykling.

H1: Der er en ændring i serum Beclin-1, LC3 og ATG3 niveauer efter gang og cykling.

Inklusionskriterier Raske mandlige frivillige i alderen 18-35 år Personer, der dyrker fysisk aktivitet mindst 30 minutter om dagen, 2-3 dage om ugen Personer uden kendte helbredsproblemer

Eksklusionskriterier Personer med akutte eller kroniske skader i den ene/begge nedre ekstremiteter Personer med muskuloskeletale lidelser i den ene/begge nedre ekstremiteter Personer, der har gennemgået kirurgisk indgreb vedrørende hofte- og/eller knæled Personer med kardiopulmonale tilstande, der ville forhindre dem i at udføre motion

Forskningsmetode Undersøgelsen vil påbegyndes efter at have opnået etisk godkendelse. I alt 20 raske mandlige frivillige i alderen mellem 18-35 år, som er fysisk aktive (mindst 30 minutter, 2-3 gange om ugen) og ikke har kendte helbredsproblemer, vil blive inkluderet.

For at undgå effekter af tidligere medicinske tilstande vil personer med akutte eller kroniske skader i nedre ekstremiteter, muskuloskeletale lidelser eller en historie med hofte- og/eller knæoperation blive ekskluderet.

Deltagere vil blive instrueret i at minimere alle sportsaktiviteter 48 timer før vurderingssessionerne; dog vil normale daglige aktiviteter som gang og trappegang være tilladt. De vil også blive rådet til at opretholde deres sædvanlige daglige rutiner og indtage samme typer mad på evalueringsdage.

Kropsvægt, kropsmasseindeks (BMI), alder og puls vil blive registreret før og efter motionssessionerne. Motionstyrke vil blive bestemt baseret på puls (HR), beregnet som:

Nedre grænse: HR = (220 - alder) × 50% Øvre grænse: HR = (220 - alder) × 85% [8]

Puls vil blive målt ved at placere pegefingeren og langfingeren på arteria carotis i 15 sekunder, og værdien vil blive ganget med fire. Det 30-minutters motionsprotokol vil bestå af:

Første 5 minutter: nedre HR-grænse Næste 20 minutter: øvre HR-grænse Sidste 5 minutter: nedre HR-grænse Antropometriske målinger Kropsvægt vil blive målt ved hjælp af en digital vægt med 0,1 kg følsomhed, og højde vil blive målt ved hjælp af en digital stadiometer. Deltagere vil være barfodede, kun iført shorts, med knæ fuldt strakte, hæle sammen og stående oprejst.

Motionsprotokol

Dataindsamling vil blive udført i to separate 30-minutters motionssessioner, med en uges mellemrum:

Session 1: Deltagere vil gå på et løbebånd ved den målrettede puls i 30 minutter.

Session 2: En uge senere vil deltagerne udføre 30 minutters cykling på en cykelergometer ved en tilsvarende puls.

Alle procedurer, bortset fra motionstypen, vil være identiske mellem sessionerne. Deltagere vil møde op i laboratoriet på samme tidspunkt på dagen for at undgå døgnvariationer. En minimum en ugers hvileperiode vil blive givet mellem sessionerne for at minimere bæreover-effekter.

Blodprøveudtagningsprocedure En permanent venekateter vil blive indsat i cubitalfossa i enten arm. For at minimere effekterne af tidligere fysisk aktivitet vil deltagerne hvile i ryglægende stilling i 30 minutter ved ankomst.

Blodprøver vil blive indsamlet på følgende tidspunkter:

Efter den 30-minutters hvileperiode (baseline) Umiddelbart efter den 30-minutters motionssession 30 minutter efter motion 60 minutter efter motion Den samme procedure vil blive gentaget i den anden session (cykling). Indsamling og analyse af blodprøver Perifere blodprøver vil blive indsamlet i gel-indeholdende biokemirør. Cirka 2-2,5 mL blod (omkring et halvt standardrør) vil blive indsamlet hver gang.

Efter koagulering ved stuetemperatur (20-30 minutter) vil prøverne blive centrifugeret ved 3500 rpm i 10 minutter ved +4°C for at opnå serum. Serumprøver vil blive opbevaret ved -80°C indtil analyse.

Proteinmåling Serumproteinniveauer vil blive målt ved hjælp af ELISA-kits i henhold til producentens instruktioner. En Multiskan Go spektrofotometer (Thermo Fisher Scientific, Finland) vil blive brugt. Målinger vil blive analyseret ved hjælp af Thermo Scientific SkanIt software, og proteinkoncentrationer vil blive bestemt ved sammenligning med standardkurver.

Analyserede proteiner Beclin-1 LC3 ATG3