Evaluación de Biomarcadores Autofágicos Séricos en la Respuesta Aguda a Caminar y Andar en Bicicleta en Individuos Masculinos Sanos

Objetivo del estudio El objetivo de este estudio es evaluar los efectos agudos de caminar y montar en bicicleta sobre los biomarcadores fisiológicos séricos asociados con la autofagia (Beclin-1, LC3 y ATG3).

Los estudios previos han investigado principalmente los cambios en los niveles de biomarcadores después de un solo tipo de ejercicio. Por lo tanto, los efectos de los regímenes de ejercicio con diferentes características de carga mecánica sobre los biomarcadores circulantes relacionados con la autofagia no se comprenden suficientemente.

Este estudio tiene como objetivo examinar comparativamente los efectos agudos de dos regímenes de ejercicio diferentes (caminar y montar en bicicleta) sobre los biomarcadores séricos asociados con la autofagia.

Hipótesis H0: No hay cambios en los niveles séricos de Beclin-1, LC3 y ATG3 después de caminar y montar en bicicleta.

H1: Hay cambios en los niveles séricos de Beclin-1, LC3 y ATG3 después de caminar y montar en bicicleta.

Criterios de inclusión Voluntarios varones sanos de 18 a 35 años Personas que realizan actividad física al menos 30 minutos al día, 2-3 días a la semana Personas sin problemas de salud conocidos

Criterios de exclusión Personas con lesiones agudas o crónicas en las extremidades inferiores unilaterales/bilaterales Personas con trastornos musculoesqueléticos en las extremidades inferiores unilaterales/bilaterales Personas que han sido sometidas a intervención quirúrgica que involucra las articulaciones de la cadera y/o la rodilla Personas con afecciones cardiopulmonares que les impedirían realizar ejercicio

Método de investigación El estudio comenzará después de obtener la aprobación ética. Se incluirá un total de 20 voluntarios varones sanos de entre 18 y 35 años, que sean físicamente activos (al menos 30 minutos, 2-3 veces por semana) y no tengan problemas de salud conocidos.

Para evitar los efectos de condiciones médicas previas, se excluirán las personas con lesiones agudas o crónicas en las extremidades inferiores, trastornos musculoesqueléticos o antecedentes de cirugía de cadera y/o rodilla.

Se instruirá a los participantes para que minimicen todas las actividades deportivas 48 horas antes de las sesiones de evaluación; sin embargo, se permitirán las actividades diarias normales, como caminar y subir escaleras. También se les aconsejará mantener sus rutinas diarias habituales y consumir los mismos tipos de alimentos en los días de evaluación.

Se registrarán el peso corporal, el índice de masa corporal (IMC), la edad y la frecuencia cardíaca antes y después de las sesiones de ejercicio. La intensidad del ejercicio se determinará en función de la frecuencia cardíaca (FC), calculada como:

Límite inferior: FC = (220 - edad) × 50% Límite superior: FC = (220 - edad) × 85% [8]

La frecuencia cardíaca se medirá colocando los dedos índice y medio en la arteria carótida durante 15 segundos, y el valor se multiplicará por cuatro. El protocolo de ejercicio de 30 minutos consistirá en:

Primeros 5 minutos: límite inferior de FC Siguientes 20 minutos: límite superior de FC Últimos 5 minutos: límite inferior de FC Mediciones antropométricas El peso corporal se medirá utilizando una báscula digital con sensibilidad de 0,1 kg, y la altura se medirá utilizando un estadiómetro digital. Los participantes estarán descalzos, usando solo pantalones cortos, con las rodillas completamente extendidas, los talones juntos y de pie erguidos.

Protocolo de ejercicio

La recolección de datos se realizará en dos sesiones de ejercicio separadas de 30 minutos, con una semana de diferencia:

Sesión 1: Los participantes caminarán en una cinta de correr a la frecuencia cardíaca objetivo durante 30 minutos.

Sesión 2: Una semana después, los participantes realizarán 30 minutos de ciclismo en un ergómetro de bicicleta a una frecuencia cardíaca similar.

Todos los procedimientos, excepto el tipo de ejercicio, serán idénticos entre las sesiones. Los participantes asistirán al laboratorio a la misma hora del día para evitar variaciones diurnas. Se proporcionará un período de descanso mínimo de una semana entre sesiones para minimizar los efectos residuales.

Procedimiento de muestreo de sangre Se insertará un catéter venoso permanente en la fosa cubital de cualquiera de los brazos. Para minimizar los efectos de la actividad física previa, los participantes descansarán en posición supina durante 30 minutos a su llegada.

Las muestras de sangre se recolectarán en los siguientes momentos:

Después del período de descanso de 30 minutos (línea base) Inmediatamente después de la sesión de ejercicio de 30 minutos 30 minutos después del ejercicio 60 minutos después del ejercicio El mismo procedimiento se repetirá en la segunda sesión (ciclismo). Recolección y análisis de muestras de sangre Las muestras de sangre periférica se recolectarán en tubos de bioquímica que contienen gel. Cada vez se recolectarán aproximadamente 2-2,5 mL de sangre (aproximadamente la mitad de un tubo estándar).

Después de la coagulación a temperatura ambiente (20-30 minutos), las muestras se centrifugarán a 3500 rpm durante 10 minutos a +4°C para obtener suero. Las muestras de suero se almacenarán a -80°C hasta su análisis.

Medición de proteínas Los niveles de proteínas séricas se medirán utilizando kits ELISA según las instrucciones del fabricante. Se utilizará un espectrofotómetro Multiskan Go (Thermo Fisher Scientific, Finlandia). Las mediciones se analizarán utilizando el software Thermo Scientific SkanIt, y las concentraciones de proteínas se determinarán mediante comparación con curvas estándar.

Proteínas analizadas Beclin-1 LC3 ATG3