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Proteomisches Muster bei weiblicher Stressharninkontinenz: eine Pilotstudie

13. März 2024 aktualisiert von: Marianne Koch, Medical University of Vienna

Ziel: Das Hauptziel der Studie ist der Vergleich der Proteinkonzentrationen zwischen Patienten mit Stressharninkontinenz (SUI) und gesunden Kontrollpersonen.

Ziel: Diese Pilotstudie zielt darauf ab, ein möglicherweise verändertes Proteinprofil bei Frauen mit SUI im Vergleich zu gesunden Frauen zu ermitteln und somit einen potenziellen Proteinbiomarker für SUI zu identifizieren.

Hauptergebnismaß: massenspektrometrische Messung des proteomischen Urinsekretoms bei erkrankten und gesunden Probanden (Sequenzabdeckung und Anzahl der identifizierten Proteine)

Studiendesign: Prospektive Fall-Kontroll-Studie

Rahmen: Universitätsklinik für Gynäkologie und Geburtshilfe der Medizinischen Universität Wien in Kooperation mit den Core Facilities Proteomics der Medizinischen Universität Wien

Population: Zwanzig weibliche Patienten mit SUI und zwanzig gesunde Patienten, die die Ambulanz der Abteilung für Geburtshilfe und Gynäkologie der Medizinischen Universität Wien aufsuchen (Stichprobengrößenberechnung FDR 0,05, Potenz von 80 %, angenommener Anteil an echtem H0 0,95, angenommener standardisierter Effekt Größe von 1)

Methoden: Durchzuführende Untersuchungen: Anamnese, provokativer Stresstest, ICIQ-Kurzfragebogen, Restharnvolumen (Ultraschall) und Urinanalyse (Messstabtest). Dem Patienten wird nach spontaner Miktion eine Urinprobe entnommen, der sofort Proteasehemmer zugesetzt wird. Für routinemäßige Laboruntersuchungen und weitere Untersuchungen werden zwei Fläschchen mit Serumblut (jeweils 9 ml) aus einer peripheren Vene des Patienten entnommen.

Die Proteomikanalyse wird mittels chromatographischer Trennung (LC) mit massenspektrometrischer Detektion (MS) durchgeführt.

Studienübersicht

Status

Abgeschlossen

Bedingungen

Intervention / Behandlung

Detaillierte Beschreibung

Methoden:

Die Probenvorbereitung und -analyse umfasst:

  1. Probenentnahme und sofortige Zugabe eines Protease-Inhibitor-Cocktails (Roche, Complete Protease Inhibitor Cocktail).
  2. Urinzentrifugation und -filtration zur Entfernung von Zelltrümmern.
  3. Proteinfällung durch Methanol/Chloroform-Trennung zur Entfernung aller möglichen nicht-proteinischen Substanzen.
  4. Proteinverdauung unter Verwendung von Trypsin, Pepsin und Glu-C in Lösung.
  5. Peptidtrennung mittels Nano-HPLC und verschiedenen chromatographischen Ansätzen.

    1. Umkehrphasentrennung (RP) von Peptiden und MS-Detektion
    2. Trennung von Peptiden mittels HILIC (hydrophile Interaktionsflüssigkeitschromatographie) zur Unterscheidung polarer Peptide.
    3. Zusätzlich zu RP und HILIC, die direkt an MS gekoppelt sind, werden verdaute Peptide mithilfe multidimensionaler Ansätze getrennt. Schwache Anionenaustauschersäulen, die unter HILIC-Bedingungen betrieben werden, werden zur Trennung von Peptiden verwendet, die posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung oder Acetylierung tragen, wodurch der dynamische Detektionsbereich erhöht wird. Während dieser Trennung werden Fraktionen gesammelt und mit MS-Detektion erneut auf RP und HILIC injiziert.
    4. Alle Nano-HPLC-Trennungen werden mit einem biokompatiblen Trennsystem durchgeführt.

Die massenspektrometrische Analyse verdauter Peptide wird mit zwei verschiedenen Nachweismethoden durchgeführt: Ionenfalle und Flugzeit-MS (qToF). Die massenspektrometrische Detektion und Analyse mit qToF wird auch für die markierungsfreie Quantifizierung von in Proben nachgewiesenen Peptiden und Proteinen verwendet. Alle Messungen werden in dreifacher Ausfertigung durchgeführt, um Korrekturen für die technische Variabilität der Trennung und Ionisierung bereitzustellen.

Die allgemeine Datenbanksuche wird unter Verwendung der Human SwissProt-Datenbank in der zum Zeitpunkt der Analyse aktuellen Version durchgeführt. Die Datensuche wird mit Mascot (http://www.matrixscience.com/) durchgeführt. und X!Tandem (http://www.thegpm.org/tandem/) Suchmaschinen und die endgültige Datenzuordnung und -filterung mithilfe von Scaffold (www.proteomsoftware.com).

Statistische Analyse:

Die Datenanalyse wird mit dem Bioleiterpaket Limma durchgeführt. Vor der Datenanalyse werden die Daten gefiltert, indem Proteine ​​mit Messungen mit geringem Interquartilbereich ausgeschlossen werden. Die Gruppen werden anhand moderierter gepaarter T-Statistiken unter Berücksichtigung des Alters verglichen. Die Anpassung für mehrere Tests erfolgt durch die Benjamini-Hochberg-Korrektur, die den FDR auf 0,05 steuert.

Studientyp

Beobachtungs

Einschreibung (Tatsächlich)

40

Kontakte und Standorte

Dieser Abschnitt enthält die Kontaktdaten derjenigen, die die Studie durchführen, und Informationen darüber, wo diese Studie durchgeführt wird.

Studienorte

      • Vienna, Österreich, 1090
        • Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology

Teilnahmekriterien

Forscher suchen nach Personen, die einer bestimmten Beschreibung entsprechen, die als Auswahlkriterien bezeichnet werden. Einige Beispiele für diese Kriterien sind der allgemeine Gesundheitszustand einer Person oder frühere Behandlungen.

Zulassungskriterien

Studienberechtigtes Alter

18 Jahre und älter (Erwachsene, Älterer Erwachsener)

Akzeptiert gesunde Freiwillige

Ja

Probenahmeverfahren

Nicht-Wahrscheinlichkeitsprobe

Studienpopulation

Die Teilnehmer werden aus der Ambulanz für Urogynäkologie und Allgemeine Gynäkologie der Universitätsklinik für Geburtshilfe und Gynäkologie der Medizinischen Universität Wien rekrutiert

Beschreibung

Einschlusskriterien:

  • Patienten mit Belastungsinkontinenz: Symptome einer Belastungsinkontinenz in der Anamnese seit mindestens 3 Monaten (einschließlich anamnestischer Beschwerden über unwillkürlichen Harnverlust bei Anstrengung oder Anstrengung oder beim Niesen oder Husten) und ein positiver provokativer Belastungstest (definiert als beobachteter transurethraler Verlust von Urin, der gleichzeitig mit einem Husten oder einem Valsalva-Manöver bei einem Blasenvolumen von 300 ml oder weniger erfolgte)
  • Patienten, die zu selbständigem Arbeiten fähig sind
  • Patienten, die in der Lage sind, alle Studienabläufe vollständig zu verstehen und eine schriftliche Einverständniserklärung zur Studienteilnahme abzugeben
  • Alter ≥ 18
  • Patienten nach vaginaler Entbindung

Ausschlusskriterien:

  • Patienten, die zuvor wegen SUI behandelt wurden (sowohl chirurgische als auch pharmakologische Behandlung)
  • Patienten, bei denen in der Krankengeschichte eine unkontrollierte überaktive Blase (OAB) oder andere Harninkontinenz als SUI aufgetreten ist (einschließlich anamnestischer Beschwerden über unfreiwilligen Harnverlust, begleitet von oder unmittelbar vorangegangenem Harndrang, nicht stressbedingt)
  • Patienten mit gut etablierter neurologischer Störung (z. B. Multiple Sklerose, Parkinson-Krankheit, Alzheimer-Krankheit)
  • Patienten mit Beckenorganprolaps Stadium ≥ II (ICS-Klassifikation)
  • Patienten mit einer klinisch signifikanten Obstruktion des Blasenauslasses und/oder Patienten mit einem Restvolumen nach der Blasenentleerung (PVR) > 100 ml
  • Patienten mit einer Vorgeschichte von akutem Harnverhalt oder wiederholten Katheterisierungen aufgrund eines akuten Harnverhalts in der Vorgeschichte innerhalb der letzten 3 Monate vor dem Tag der Einwilligung nach Aufklärung
  • Patienten mit einem Dauerkatheter und Patienten, die eine intermittierende Selbstkatheterisierung durchführen
  • Patienten, die sich weniger als 30 Tage vor dem Tag der Einwilligung nach Aufklärung einer Blasenbiopsie oder einem anderen geringfügigen chirurgischen Eingriff im Becken unterzogen haben
  • Patienten mit Blasenkrebs in der Vorgeschichte
  • Patienten mit akuter oder wiederkehrender Harnwegsinfektion und/oder ungeklärter Hämaturie
  • Patienten mit Steinen in der Blase oder Harnröhre und einer Steinerkrankung im oberen Harntrakt, die Symptome verursacht
  • Patienten mit Anzeichen einer Niereninsuffizienz (Kreatinin > 1,5-fache Obergrenze des Normalwerts)
  • Patienten mit Anzeichen einer Lebererkrankung (Gesamtbilirubin >1,5x Obergrenze des Normalwerts oder AST oder ALT oder alkalische Phosphatase >2x Obergrenze des Normalwertes)
  • Patienten mit Alkohol- und/oder anderem Drogenmissbrauch in der Vorgeschichte
  • Patienten, die nicht in der Lage und/oder unwahrscheinlich sind, die Studienabläufe und -anweisungen zu verstehen und zu befolgen
  • Patienten, die schwanger sind oder stillen
  • Patienten mit schwerwiegenden Erkrankungen, die nach Meinung der Forscher nicht an dieser Studie teilnehmen sollten

Die Kontrollgruppe besteht aus Patienten mit denselben Einschluss- und Ausschlusskriterien wie die Fallgruppe, mit Ausnahme der Belastungsharninkontinenz.

Studienplan

Dieser Abschnitt enthält Einzelheiten zum Studienplan, einschließlich des Studiendesigns und der Messung der Studieninhalte.

Wie ist die Studie aufgebaut?

Designdetails

Kohorten und Interventionen

Gruppe / Kohorte
Intervention / Behandlung
Belastungsinkontinenz
Patienten mit Belastungsharninkontinenz gemäß den Einschluss- und Ausschlusskriterien
gesunde Kontrollen
gesunde Frauen mit den gleichen Einschluss- und Ausschlusskriterien wie die Fallgruppe, mit Ausnahme von Belastungsharninkontinenz

Was misst die Studie?

Primäre Ergebnismessungen

Ergebnis Maßnahme
Maßnahmenbeschreibung
Zeitfenster
Massenspektrometrische Messung des proteomischen Urinsekretoms bei erkrankten und gesunden Probanden (Sequenzabdeckung und Anzahl der identifizierten Proteine)
Zeitfenster: Das primäre Ergebnismaß wird für jeden Teilnehmer innerhalb eines Zeitraums von 4 bis 7 Tagen nach der Rekrutierung bewertet
Vergleich der Proteinkonzentrationen basierend auf der Anzahl der identifizierten Proteine ​​und der massenspektrometrischen Spektralzählung für Patienten mit Stressharninkontinenz und gesunde Kontrollpersonen.
Das primäre Ergebnismaß wird für jeden Teilnehmer innerhalb eines Zeitraums von 4 bis 7 Tagen nach der Rekrutierung bewertet

Mitarbeiter und Ermittler

Hier finden Sie Personen und Organisationen, die an dieser Studie beteiligt sind.

Sponsor

Ermittler

  • Hauptermittler: Heinz Kölbl, Univ.-Prof.Dr.Dr.h.c., Medical University of Vienna, Department of Obstetrics and Gynaecology

Publikationen und hilfreiche Links

Die Bereitstellung dieser Publikationen erfolgt freiwillig durch die für die Eingabe von Informationen über die Studie verantwortliche Person. Diese können sich auf alles beziehen, was mit dem Studium zu tun hat.

Allgemeine Veröffentlichungen

Studienaufzeichnungsdaten

Diese Daten verfolgen den Fortschritt der Übermittlung von Studienaufzeichnungen und zusammenfassenden Ergebnissen an ClinicalTrials.gov. Studienaufzeichnungen und gemeldete Ergebnisse werden von der National Library of Medicine (NLM) überprüft, um sicherzustellen, dass sie bestimmten Qualitätskontrollstandards entsprechen, bevor sie auf der öffentlichen Website veröffentlicht werden.

Haupttermine studieren

Studienbeginn

1. November 2013

Primärer Abschluss (Tatsächlich)

1. April 2015

Studienabschluss (Tatsächlich)

1. September 2015

Studienanmeldedaten

Zuerst eingereicht

18. November 2013

Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat

23. Dezember 2013

Zuerst gepostet (Geschätzt)

30. Dezember 2013

Studienaufzeichnungsaktualisierungen

Letztes Update gepostet (Tatsächlich)

15. März 2024

Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt

13. März 2024

Zuletzt verifiziert

1. März 2024

Mehr Informationen

Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie

Andere Studien-ID-Nummern

  • EK 1788/2013

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