Auswirkungen der saisonalen Malaria-Chemoprävention auf die Immunität gegen Malaria bei Kindern im Norden Benins (ISAMIMA)

Studienstandort und Bevölkerung Die Studie wird parallel an zwei verschiedenen Standorten durchgeführt, den Gesundheitsbezirken Cobly und Tchaourou im Norden Benins. Diese beiden Bezirke wurden basierend auf der Programmierung des Gesundheitsministeriums für die Umsetzung von SMC ausgewählt. Die beiden Standorte sind in Bezug auf Malaria-Übertragungsmerkmale und Epidemiologie sehr ähnlich, mit dem Unterschied, dass SMC in Cobly implementiert ist, aber noch nicht in Tchaourou. Proben, die von Kindern im Gesundheitsbezirk Cobly gesammelt wurden, werden als Interventionsgruppe aufgenommen, während Proben, die von Kindern in Tchaourou gesammelt wurden, somit als Kontrollen dienen, insbesondere im Hinblick auf die Entwicklung von Antikörperreaktionen. Die Teilnehmer werden umfassend über die Bedeutung von SMC beraten und die schriftliche Einverständniserklärung der Eltern oder Erziehungsberechtigten jedes Kindes wird eingeholt. Die Teilnahme wird vollkommen freiwillig sein.

Studiendesign und -verfahren Diese Studie konzentriert sich auf die Nachbeobachtung über 12 Monate bei Kindern im Alter von 6 bis 59 Monaten, die SMC erhalten, zusammen mit einer Kontrollgruppe, die keine SMC erhält. Die Studie wird in Zusammenarbeit mit dem National Malaria Control Program (NMCP) von Benin durchgeführt. Demografische Daten, die vom NMCP bereitgestellt werden, ermöglichen eine zufällige Auswahl von Kindern aus zufälligen Haushalten. Sowohl an den Interventions- als auch an den Kontrollstandorten wird die gleiche Anzahl von Kindern eingeschlossen. Das Studienteam wird jeden ausgewählten Haushalt besuchen, um die Haushaltsmitglieder über die Studie zu informieren, und wird monatliche Treffen mit den Gesundheitshelfern der Gemeinde abhalten. Kinder von einwilligenden Eltern oder Erziehungsberechtigten werden rekrutiert und Eltern/Erziehungsberechtigte werden durch einen Fragebogen geführt, der vom Forscher oder einem Assistenten (Kliniker) durchgeführt wird. 1 ml peripheres venöses Blut wird in Entnahmeröhrchen gesammelt und an das Centre for Expertise and Enhancing Research in Epidemiology and Public Health (CEEREPH) an der Universität Parakou überführt, wo von jeder Probe ein Blutausstrich angefertigt wird. Fünfzig Mikroliter Blut werden auf Whatman 3MM-Filterpapier übertragen und für die DNA-Extraktion bei Raumtemperatur gelagert. Das verbleibende Vollblut wird dann zentrifugiert, das Plasma und die roten Blutkörperchen werden aliquotiert. Proben werden 4 Mal von jedem Kind in beiden Gruppen (Kinder im Alter von 6 bis 59 Monaten, die SMC erhalten oder/nicht) während des 12-monatigen Nachbeobachtungszeitraums entnommen. Die erste Probe wird zu Beginn der SMC entnommen (bevor Kinder die SMC erhalten), die zweite am Tag der dritten SMC-Dosis, die dritte drei Monate nach der letzten SMC-Dosis und die vierte sechs Monate nach der letzten Dosis von SMC).

Malariaprävalenz Von allen Proben werden ständig dicke und dünne Blutausstriche angefertigt. Dünne Ausstriche werden in Methanol fixiert. Alle Objektträger werden luftgetrocknet und mit Giemsa-Färbemittel 3 % für 45-60 min gefärbt. Nach dem Trocknen werden die gefärbten dicken und dünnen Blutausstriche routinemäßig mikroskopisch untersucht. Die Parasitendichte wird als Anzahl der Parasiten/μl Blut aufgezeichnet, wobei eine durchschnittliche Leukozytenzahl von 8.000/μl Blut angenommen wird. Getrocknete Blutflecken auf Filterpapierproben werden luftgetrocknet und einzeln in kleinen Ziploc-Beutel mit Trockenmittel gelagert. Der Plasmodium spp-Nachweis wird unter Verwendung einer Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) im Routineeinsatz mit einem Quantstudio-Instrument durchgeführt.

Anti-PfEMP1-Antikörperantwort Von Plasmodium falciparum kodierte Varianten von Oberflächenantigenen (VSA) werden auf der Oberfläche infizierter Erythrozyten (IE) exprimiert und vermitteln die Bindung an eine Reihe von Endothelzellrezeptoren. Die am besten charakterisierten VSA sind die var-Gen-kodierte P. falciparum Erythrozyten-Membranprotein 1 (PfEMP1)-Familie in zwei Exon-Einheiten. Exon I kodiert für den extrazellulären und variablen Teil des Proteins sowie eine Transmembranregion und Exon II kodiert für das intrazelluläre und relativ konservierte saure terminale Segment (ATS). Der variabelste Teil des Proteins enthält ein N-terminales Segment, gefolgt von Segmenten, die aus drei Domänentypen bestehen; Duffy-Bindungsähnliche Domänen (DBL-Domänen): Cysteinreiche Interdomänenregionen (CIDRs) und C2. In dieser Studie wird ein Panel von Plasma-IgG unter Verwendung der Mikrokügelchen-Kügelchen-gekoppelten Proteine, die 28 aus P. falciparum stammende Antigene und Tetanustoxoid umfassen, unter Verwendung der Luminex-Plattform quantifiziert. Das Panel umfasst VAR2CSA (das mit Plazenta-Malaria assoziierte VSA) und 25 HIS-markierte CIDR-Proteine, die alle drei Hauptgruppen von PfEMP1 repräsentieren. Darüber hinaus umfasst das Protein-Array das Merozoiten-Oberflächenprotein 1 (MSP1) und das apikale Membranantigen 1 (AMA1).