Funciones supresoras de las células T reguladoras en la migraña (SIIM-reg)

La migraña es una preocupación de salud pública importante y global que afecta al 14% de la población en todo el mundo. Es de 2 a 3 veces más frecuente en mujeres que en hombres y es la segunda causa principal de discapacidad (1,2). Muchos pacientes no responden a los tratamientos disponibles actualmente (3). Como se demuestra en diferentes estudios, incluidos los nuestros, varios trastornos autoinmunes e inflamatorios, como la esclerosis múltiple, se asocian con una mayor prevalencia de migraña y un mayor riesgo de cronificación de migraña (al menos 15 días de dolor de cabeza por mes) en comparación con la población general (4,5). Estos hallazgos sugieren que la inflamación puede desempeñar un papel importante en la cronificación de la migraña (6). Las desregulaciones de citocinas y de células inmunes se han evidenciado en la enfermedad (7), pero el papel de la inflamación en la fisiopatología de la migraña sigue sin estar claro. Entre los linfocitos T, las células T reguladoras (Treg) juegan un papel importante en el mantenimiento de la homeostasis inmune. They regulate pro-inflammatory effector T (Teff) cells and proinflammatory cytokine release (IL-6, IL-17, IFN-γ) through different suppressive mechanisms such as the hydrolysis of pro-inflammatory and nociceptive adenosine triphosphate (ATP) into anti-inflammatory and antinociceptive adenosine (ADO), by Treg surface enzymes CD39 and CD73, presente en 40% y 6-10% de las células Treg, respectivamente (8,9). ADO luego suprime las células Teff uniéndose a su receptor ADO A2A (10). El ATP está involucrado en la transducción de señales de dolor en la migraña y su hidrólisis insuficiente puede conducir a la cronificación del dolor (11). Se ha evidenciado que Tregs suprime naturalmente la producción de IFN-γ por las células TEFF. Sus subconjuntos positivos para CD39 (CD39+) también suprimen la producción de IL-17 por las células TEFF, mientras que los Tregs CD39 negativos (CD39-) parecen aumentar la secreción de IL-17 (12). Estudios recientes han mostrado proporciones alteradas de Treg en la migraña en comparación con los controles (13,14) y las desregulaciones de la subpoblación de Treg, como los niveles disminuidos de células CD39+Treg (8). Esto sugiere además que las funciones supresoras de Treg pueden alterarse en la migraña, pero no se han llevado a los ensayos funcionales a confirmar eso.

En este estudio, nuestro objetivo es determinar si las células Treg juegan un papel en la fisiopatología de la migraña, respondiendo las siguientes 3 preguntas separadas: Pregunta 1) ¿Las funciones supresoras de Treg disminuyen en los pacientes con migraña? Pregunta 2) ¿Son funcionalmente las células CD39+Treg en pacientes con migraña? Pregunta 3) ¿Se reduce la actividad hidrolítica de la enzima CD39 en pacientes con migraña?

A través del cocultivo Treg/Teff, evaluaremos la capacidad de las células Treg y CD39+Treg para inhibir la proliferación de TEFF y la secreción de citocinas proinflamatorias y medir la actividad hidrolítica de la enzima Treg CD39 en ATP en pacientes con migraña crónica versus controles sanos. El uso de células inmunes humanas (linfocitos Treg y Teff) en nuestros experimentos nos permitirá comprender mejor la fisiopatología de la migraña, con una aplicación directa a los sujetos humanos, así como evitar las pruebas y el sufrimiento en animales. A través de su entorno libre de animales, después del principio '3RS', deseamos promover la investigación sin animales y la reducción del uso de animales para la producción de reactivos mediante el uso de anticuerpos recombinantes para la citometría de flujo y los suplementos de medio sintético para el cultivo celular. Este estudio conducirá a una mejor comprensión del papel de la inflamación y las células Treg en la fisiopatología de la migraña y proporcionará nuevas perspectivas para el desarrollo de tratamientos personalizados de acuerdo con el perfil de dolor inmune de los pacientes con migraña.

Nuestro objetivo es mostrar que las funciones supresoras de Treg se alteran en la migraña y que la vía ADO es deficiente. A través del cocultivo Treg/Teff mediremos la capacidad de los Tregs para inhibir la proliferación de TEFF y la secreción de citocinas y evaluar la actividad hidrolítica relacionada con CD39 de Tregs. Esto nos permitirá estudiar las funciones supresoras de las células Treg en las células TEFF en pacientes femeninas con migraña crónica y participantes de control femenino sano.