Undertrykkende funktioner af regulatoriske T -celler i migræne (SIIM-reg)

Migræne er et stort og globalt folkesundhedsmæssigt bekymring, der påvirker 14% af befolkningen over hele verden. Det er 2 til 3 gange mere udbredt hos kvinder end mænd og er den anden førende årsag til handicap (1,2). Mange patienter forbliver ikke reagerende på aktuelt tilgængelige behandlinger (3). Som det fremgår af forskellige undersøgelser, herunder vores egne, er adskillige autoimmune og inflammatoriske lidelser, såsom multipel sklerose, forbundet med en højere forekomst af migræne og en højere risiko for migræne kronifikation (mindst 15 hovedpine dage pr. Måned) sammenlignet med den generelle befolkning (4,5). Disse fund antyder, at betændelse kan spille en vigtig rolle i migræne kronifikation (6). Cytokin- og immuncelle -dysreguleringer er blevet beviset i sygdommen (7), men inflammationens rolle i migrænepatofysiologi forbliver uklar. Blandt T -lymfocytter spiller regulatoriske T (Treg) -celler en vigtig rolle i opretholdelsen af immunhomeostase. De regulerer pro-inflammatoriske effektor T (TEFF) celler og proinflammatorisk cytokinfrigivelse (IL-6, IL-17, IFN-y) gennem forskellige undertrykkende mekanismer, såsom hydrolyse af pro-inflammatorisk og nociceptiv adenosin triphosphat (ATP) til anti-inflammatorisk og antinociceptiv og nocicesin (ado), ved tregoverfladepil (ATP) i antiinflammatorisk og antinocictive adenosin (Ado), ved tregoverfladepil og CD73, til stede på henholdsvis 40% og 6-10% af Treg-cellerne (8,9). ADO undertrykker derefter teff -celler ved at binde til deres ADO -receptor A2A (10). ATP er involveret i transduktion af smertesignaler i migræne, og dens utilstrækkelige hydrolyse kan føre til smertekronifikation (11). Det er blevet beviset, at Tregs naturligt undertrykker IFN-y-produktion af TEFF-celler. Deres CD39-positive (CD39+) undergrupper undertrykker også IL-17-produktion af TEFF-celler, hvorimod CD39-negativ (CD39-) Tregs ser ud til at øge IL-17-sekretion (12). Nylige undersøgelser har vist ændrede Treg -proportioner i migræne sammenlignet med kontroller (13,14) og Treg -underpopulation -dysreguleringer, såsom nedsatte CD39+Treg -celleniveauer (8). Dette antyder endvidere, at Treg -undertrykkende funktioner kan ændres i migræne, men ingen funktionelle assays er blevet ført til at bekræfte det.

I denne undersøgelse har vi til formål at afgøre, om Treg -celler spiller en rolle i migrænepatofysiologi ved at besvare følgende 3 separate spørgsmål: Spørgsmål 1) er Treg -undertrykkende funktioner faldet hos migrænepatienter? Spørgsmål 2) Er CD39+Treg -celler funktionelt mangelfulde i migrænepatienter? Spørgsmål 3) Er den hydrolytiske aktivitet af enzym CD39 reduceret hos migrænepatienter?

Gennem Treg/TEFF-kokultur vurderer vi evnen hos total TREG og CD39+TREG-celler til at hæmme Teff-proliferation og pro-inflammatorisk cytokinudskillelse og måle den hydrolytiske aktivitet af Treg-enzym CD39 på ATP hos kroniske migrænepatienter mod raske kontroller. Brug af humane immunceller (Treg og Teff -lymfocytter) i vores eksperimenter giver os mulighed for bedre at forstå migrænepatofysiologi med en direkte anvendelse til menneskelige emner samt undgå dyreprøvning og lidelse. Gennem sin dyrefri indstilling efter '3RS' -princippet ønsker vi at fremme dyrefri forskning og reduktion af dyrebrug til reagensproduktion ved anvendelse af rekombinante antistoffer til flowcytometri og syntetiske mediumtilskud til cellekultur. Denne undersøgelse vil føre til en bedre forståelse af rollen som betændelse og Treg -celler i migrænepatofysiologi og vil give nye perspektiver til udvikling af personaliserede behandlinger i henhold til immunsmerterprofilen for migrænepatienter.

Vi sigter mod at vise, at Treg -undertrykkende funktioner ændres i migræne, og at ADO -stien er mangelfuld. Gennem Treg/TEFF-kokultur vil vi måle Tregs evne til at hæmme Teff-proliferation og cytokinsekretion og vurdere den CD39-relaterede hydrolytiske aktivitet af Tregs. Dette giver os mulighed for at studere Treg -celler undertrykkende funktioner på TEFF -celler hos kvindelige patienter med kronisk migræne og sunde kvindelige kontroldeltagere.