Keliakiadiagnoosi potilailla, joilla on heikosti positiivinen seerumin anti-transglutaminaasi: Pohjukaissuolen endomysium-testi.

Keliakia (CD) on krooninen immuunivälitteinen sairaus, jota esiintyy geneettisesti alttiissa populaatioissa. Sairaudesta kärsivillä potilailla voi olla oireettomia tai klassisia imeytymishäiriön oireita, kuten ripulia, steatorreaa, vatsakipua ja painonpudotusta gluteenin nauttimisen jälkeen (ja muista jyvistä löytyviä vastaavia johdannaisia). Viisaan lääkärin on oltava tietoinen hienovaraisemmasta GI-kuvasta sekä muista kuin GI-merkeistä ja -oireista (esim. raudanpuuteanemia, epänormaalit maksan toimintakokeet ja tyypin 1 diabetes mellitus). Diagnoosi ja seulonta aloitetaan käyttämällä serologisia testejä eli immunoglobuliini A (IgA) anti-kudostransglutaminaasi (tTG) ja IgA anti-endomysiaalisia vasta-aineita (EmA). EmA-testi suoritetaan epäsuoralla immunofluoresenssilla reagenssiapinan ruokatorvea tai ihmisen napanuoraa vastaan. EmA sitoutuu sileän lihaksen antigeeniin tTG, ja testitulos raportoidaan tiittereinä. EmA:t ovat sekä kohtalaisen herkkiä että erittäin spesifisiä (herkkyys 85%-98%, spesifisyys 97%-100%) CD:lle, mutta muuttuvat nopeasti negatiivisiksi, kun potilas aloittaa gluteenittoman ruokavalion. Anti-tTG on erittäin herkkä ja spesifinen CD-testi, ja se on laajalti saatavilla automaattisena entsyymi-immunosorbenttimäärityksessä useilta valmistajilta. Vaikka tämän testin herkkyys ja spesifisyys on korkea, tTG:tä voi esiintyä jopa 5 %:lla kontrollipotilaista. Lisäksi Crohnin tautia sairastavilla potilailla on raportoitu vääriä positiivisia tTG:tä. Pohjukaissuolen biopsia, jota monet pitävät edelleen diagnoosin edellyttämänä kriteerinä, osoittaa patologiset löydökset ohutsuolen villosatrofiasta, kryptahyperplasiasta ja intraepiteliaalisesta lymfosytoosista, joita esiintyy altistuessaan ravinnon gluteenille. Nämä muutokset osoittavat paranemista gluteenin poistamisen jälkeen ruokavaliosta. Geneettiset testit, jotka paljastavat sallivia haplotyyppejä, voivat olla hyödyllisiä herkkien yksilöiden tunnistamisessa.

CD-diagnoosi on edelleen ankkuroitu European Society of Pediatric Gastroenterology Hepatology and Nutritionin vuonna 1990 asettamiin kriteereihin. Nämä edellyttävät pakollista (a) villosatrofiaa, johon liittyy kryptahyperplasia ja lisääntynyt intraepiteliaalisten lymfosyyttien (IEL) määrä, kun potilas syö gluteenia, ja (b) täyden kliinisen remission gluteenin poistamisen jälkeen ruokavaliosta. Kuitenkin 20 vuotta näiden diagnostisten kriteerien vahvistamisen jälkeen on nyt yhä enemmän todisteita siitä, että ainakin kaksi muuta tekijää on otettava huomioon. Ensinnäkin oireinen gluteeniherkkyys ja imeytymishäiriö voivat esiintyä rinnakkain normaalin näköisen limakalvon kanssa. Toiseksi, verenkierrossa olevien IgA-vasta-aineiden löytäminen kudoksen transglutaminaasille (anti-tTG) tai endomysiumille (EmA) diagnoosin yhteydessä on erittäin tarkka diagnostinen instrumentti. Tämän seurauksena CD-diagnoosia tehdään nykyään myös oireellisille potilaille, joilla on normaalin näköinen limakalvo, mutta korkea seerumin EMA- ja/tai anti-tTG-vasta-aineiden tiitteri. Kuitenkin potilaat, joilla on minimaalisia tai ei lainkaan suoliston histologisia vaurioita, muodostavat huomattavan ongelman, koska seerumin anti-tTG:n ja EmA:n tiedetään olevan usein negatiivisia tai heikosti positiivisia potilailla, joilla on CD, jolla on lievä suolistovaurio.

Picarelli et ai., vuonna 1996, yrittivät selvittää, onko CD-potilaiden ohutsuolessa EmA:n tuotantopaikka ja voisiko gliadiinialtistus saada ne vapautumaan. Kirjoittajat arvioivat ohutsuolen biopsianäytteitä hoidetuilta ja hoitamattomilta CD-potilailta ja kontrolleilta, joita viljeltiin in vitro 24-48 tuntia gliadiinin läsnä ollessa. EmA havaittiin näiden elinviljelmien biopsianäytteiden supernatanteista immunofluoresenssitekniikalla ja vastaavasti entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä (ELISA). EmA:ta ei löydetty kontrollien biopsianäytteiden viljelmän supernatanteista, kun taas niitä havaittiin kaikkien hoitamattomien CD-potilaiden viljelmän supernatanteissa gliadiinialtistuksesta riippumatta. Sitä vastoin EmA:ta ei havaittu vain hoidettujen CD-potilaiden alustassa viljeltyjen koepalanäytteiden supernatanteissa, mutta se havaittiin suurimmassa osassa gliadiinilla altistetuista biopsianäytteistä.

Tutkijat mittasivat vuonna 2002 anti-tTG-vasta-ainetta sellaisten potilaiden suolistobiopsianäytteiden viljelyväliaineesta, joilla epäillään CD:tä ja arvioivat vasta-ainetuotannon ja suoliston limakalvovaurion vakavuuden välistä suhdetta ja osoittivat, että viljelyalustan anti-tTG-määritys biopsianäytteet voivat parantaa CD-diagnoosin tarkkuutta potilailla, jotka ovat negatiivisia seerumin vasta-aineille.

Samat tutkijat arvioivat vuonna 2011 EmA-määrityksen diagnostisen tarkkuuden suoliston biopsioiden viljelyväliaineessa CD-diagnoosia varten ja osoittivat, että viljelyväliaineessa tehdyllä EmA-määrityksellä oli suurempi herkkyys ja spesifisyys kuin seerumin EmA- ja anti-tTG-määritys. Kaikilla CD-potilailla, jotka testattiin väärinä negatiivisina seerumin EmA:n ja/tai anti-tTG:n suhteen, oli CD:hen liittyviä ihmisen leukosyyttiantigeenialleeleja. Lisäksi seurannan aikana alaryhmälle potilaita, joilla oli negatiivinen seerumin EmA/anti-tTG, normaali villirakenne ja positiivinen EmA elatusaineessa, kehittyi villosatrofiaa ja he joutuivat gluteenittomaan ruokavalioon, minkä seurauksena sairaus parani. oireet ja täydellinen suoliston histologinen toipuminen. Tutkijat päättelivät, että viljelyalustassa oleva EmA-määritys tulisi sisällyttää CD-diagnoosin diagnostisiin kriteereihin "seronegatiivisilla" potilailla.

Tämä tutkimus suoritetaan EmA:n in vitro -tuotannon kliinisen hyödyllisyyden tutkimiseksi CD-diagnoosissa suurella määrällä peräkkäisiä aikuisia potilaita, joilla epäillään CD:tä ja heikosti positiivisia [esim. normaaliarvo kerrottuna 2-3 kertaa, 2-3xN] seerumin anti-tTG.