Cöliákia diagnosztizálása gyengén pozitív szérum anti-transzglutamináz tartalmú betegeknél: Duodenális Endomysium-ellenes vizsgálat.

A cöliákia (CD) egy krónikus immunmediált betegség, amely genetikailag hajlamos populációkban fordul elő. A betegségben szenvedő betegek tünetmentesek vagy klasszikus felszívódási zavar tünetei lehetnek: hasmenés, steatorrhoea, hasi fájdalom és súlycsökkenés a glutén (és más gabonákban található kapcsolódó származékok) bevétele után. Az ügyes klinikusnak tisztában kell lennie a GI-kép finomabbá tételével, valamint a nem GI-jelekkel és tünetekkel (például vashiányos vérszegénység, kóros májfunkciós tesztek és 1-es típusú diabetes mellitus). A diagnózis és a szűrés a szerológiai tesztek, azaz az immunglobulin A (IgA) anti-szöveti transzglutamináz (tTG) és az IgA anti-endomysiális antitestek (EmA) alkalmazásával kezdődik. Az EmA tesztet közvetett immunfluoreszcenciával végezzük majom nyelőcső vagy emberi köldökzsinór ellen. Az EmA kötődik a simaizom antigénhez, a tTG-hez, és a teszt eredményét titerként jelentik. Az EmA mérsékelten érzékeny és erősen specifikus (érzékenység 85%-98%, specificitás 97%-100%) a CD-re, de gyorsan negatívvá válik, amikor a beteg gluténmentes diétát kezd. Az Anti-tTG egy nagyon érzékeny és specifikus teszt a CD-re, és széles körben elérhető automatizált enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati eljárásként több gyártótól. Bár ennek a tesztnek a szenzitivitása és specificitása magas, a tTG a kontroll betegek akár 5%-ában is jelen lehet. Ezenkívül Crohn-betegségben szenvedő betegeknél álpozitív tTG-t jelentettek. A nyombélbiopszia, amelyet sokan még mindig a diagnózishoz szükséges kritériumnak tekintenek, bemutatja a vékonybélbolyhos atrófia, a kripta hiperplázia és az intraepiteliális limfocitózis kóros leleteit, amelyek étkezési gluténnek való kitettség esetén fordulnak elő. Ezek a változások javulást mutatnak a glutén étrendből való kivonása után. A megengedő haplotípusokat feltáró genetikai tesztek hasznosak lehetnek a fogékony egyének azonosításában.

A CD diagnózisa még mindig az Európai Gyermekgasztroenterológiai Hepatológiai és Táplálkozási Társaság által 1990-ben megállapított kritériumokhoz kötődik. Ezek megkövetelik (a) a kripta hiperpláziával és az intraepiteliális limfociták (IEL) számának növekedésével járó boholyatrophia kötelező jelenlétét, amikor a beteg glutént eszik, és (b) a teljes klinikai remissziót a glutén étrendből való eltávolítása után. Azonban 20 évvel a diagnosztikai kritériumok megállapítása után egyre több bizonyíték áll rendelkezésre arra vonatkozóan, hogy legalább két másik tényezőt is figyelembe kell venni. Először is, a tünetekkel járó gluténérzékenység és a felszívódási zavar együtt létezhet egy normális megjelenésű nyálkahártyával. Másodszor, a szöveti transzglutamináz (anti-tTG) vagy endomysium (EmA) elleni keringő IgA antitestek kimutatása a diagnózis során rendkívül pontos diagnosztikai eszköz. Következésképpen manapság a CD-diagnosztikát olyan tünetekkel járó betegeknél is végzik, akiknek normális megjelenésű nyálkahártyája van, de magas szérum EMA-titerrel és/vagy anti-tTG antitestekkel. Mindazonáltal a minimális bélszöveti elváltozásokkal rendelkező betegek jelentős problémát jelentenek, mivel a szérum anti-tTG és EmA gyakran negatív vagy gyengén pozitív enyhe bélkárosodásban szenvedő betegeknél.

Picarelli és munkatársai 1996-ban megpróbálták megállapítani, hogy a CD-betegek vékonybélje az EmA termelődésének helye, és hogy a gliadin-terhelés indukálhatja-e felszabadulását. A szerzők vékonybél biopsziás mintákat értékeltek kezelt és nem kezelt CD-s betegektől és kontrolloktól, amelyeket in vitro tenyésztettek 24-48 órán keresztül gliadin jelenlétében. Ezen szervtenyészet biopsziás minták felülúszójában immunfluoreszcens technikával, illetve enzim-linked immunosorbent assay-vel (ELISA) detektáltuk az EmA-t. A kontrollok biopsziás mintáinak tenyészet felülúszójában nem találtunk EmA-t, míg minden kezeletlen CD-beteg tenyészet felülúszójában kimutatták, függetlenül a gliadin-fertőzéstől. Ezzel szemben az EmA nem volt kimutatható a csak kezelt CD-s betegek tápközegében tenyésztett biopsziás minták felülúszójában, de a gliadinnal fertőzött biopsziás minták többségében kimutatták.

A kutatók 2002-ben anti-tTG antitestet mértek CD-gyanús betegek bélbiopsziás mintáinak tápközegében, és értékelték az ellenanyag-termelés és a bélnyálkahártya-károsodás súlyossága közötti összefüggést, és kimutatták, hogy a táptalaj anti-tTG vizsgálata. A biopsziás minták javíthatják a CD diagnózisának pontosságát a szérum antitestekre negatív betegeknél.

Ugyanezek a kutatók 2011-ben értékelték az EmA vizsgálat diagnosztikai pontosságát a bélbiopsziák tápközegében a CD diagnosztizálására, és kimutatták, hogy a táptalajban végzett EmA vizsgálat érzékenyebb és specifikusabb, mint a szérum EmA és anti-tTG vizsgálat. Minden CD-s beteg, akit álnegatívnak bizonyult a szérum EmA-ra és/vagy anti-tTG-re, hordozta a CD-hez kapcsolódó humán leukocita antigén allélokat. Ezenkívül a követés során a negatív szérum EmA/anti-tTG-vel, normális bolyhos szerkezettel és pozitív EmA-val rendelkező betegek alcsoportjában a táptalajban boholysorvadás alakult ki, és gluténmentes diétán esett át, aminek következtében a betegség megszűnt. tünetek és a teljes bélszövettani gyógyulás. A kutatók arra a következtetésre jutottak, hogy a táptalajban végzett EmA-vizsgálatot a „szeronegatív” betegek CD-diagnózisának diagnosztikai kritériumai közé kell sorolni.

A jelen vizsgálat célja az EmA in vitro termelésének klinikai hasznosságának vizsgálata CD-diagnosztikában nagyszámú egymást követő felnőtt betegnél, akiknél CD-gyanús és gyengén pozitív [pl. normál érték 2-3-szorosára szorozva, 2-3xN] szérum anti-tTG.