sCD163 & CD19 kandidaattibiomarkkereina CIDP:ssä ja MMN:ssä

Kroonisille tulehduksellisille perifeerisille neuropatioille on tunnusomaista asteittainen lihasvoiman heikkeneminen, herkkyyden menetys, refleksien heikkeneminen tai puuttuminen sekä hienomotorisen hallinnan heikkeneminen. Usein syynä on hoitoon sopiva demyelinisaatio, mutta varsinkin riittämättömässä hoidossa voi esiintyä myös aksonivaurioita. Krooninen tulehduksellinen demyelinisoiva polyradikuloneuropatia (CIDP) ja multifokaalinen motorinen neuropatia (MMN) diagnosoidaan elektrofysiologisella tutkimuksella, jossa on merkkejä demyelinisaatiosta ja johtumisestosta. Lisäksi CIDP:ssä kohonnut proteiinitaso aivo-selkäydinnesteessä ja MMN:ssä anti-GM1-vasta-aineiden havaitseminen verestä tukevat diagnoosia.

Potilaat kärsivät vammauttavasta lihasheikkoudesta. Diagnoosi perustuu ensisijaisesti neurofysiologiseen tutkimukseen, mutta diagnoosin tekeminen voi kuitenkin olla vaikeaa suuren kliinisen vaihtelun ja epäherkkien tutkimusmenetelmien, mukaan lukien biomarkkerien puutteen, vuoksi.

CIDP:n ja MMN:n hoito CIDP ja MMN ovat immuunivälitteisiä neuropatioita, joissa ensimmäinen hoitovaihtoehto on suonensisäinen immunoglobuliini (IVIG), vaikka IVIG:n vaikutuksen taustalla olevia mekanismeja ei ole vielä selvitetty.

Aiempi tutkimus viittaa siihen, että luonnollisten tappajasolujen Fc-reseptorit ovat IVIG:n kohteena, koska NK-solujen sytotoksinen aktiivisuus vaimeni, mikä johtuu osittain annoksesta riippuvasta kiertävien NK-solujen määrän vähenemisestä. Lisäksi esiintyi annoksesta riippuvaa CD16:n estoa.

Immunoglobuliinien (SCIG) ihonalaista antoa on tutkittu vaihtoehtoisena reittinä IVIG:lle CIDP:ssä ja MMN:ssä. Johtopäätös oli, että SCIG on toteutettavissa, turvallinen ja tehokas. Siten SCIG paransi lihasvoimaa, kävelysuorituskykyä ja vammaisuutta verrattuna lumelääkkeeseen ja IVIG:ään. SCIG:llä on vain paikallisia sivuvaikutuksia IVIG:hen verrattuna, ja lisäksi suurin osa potilaista piti SCIG:tä IVIG:n sijaan autonomian ja lihasten suorituskyvyn vakaan tason ylläpitämisen vuoksi.

On hyvin tunnettua, että noin 30 % CIDP-potilaista vuoden aikana ei enää tarvitse hoitoa lihasvoiman ylläpitämiseksi. Immunoglobuliinihoito on kallista ja voi suonensisäisesti annettuna aiheuttaa vakavia sivuvaikutuksia (esim. tromboembolia, hemolyyttinen anemia ja eksfoliatiivinen dermatiitti). Siksi vain potilaita, jotka reagoivat selvästi, tulee hoitaa. Toisaalta on tärkeää hoitaa ajoissa sairastuvuuden ja vamman vähentämiseksi.

Nykyiset tutkimusmenetelmät CIDP- tai MMN-epäillyt potilaat diagnosoidaan sairaushistorian, kliinisten tutkimusten ja neurofysiologisten löydösten perusteella. Diagnoosi sisältää kuitenkin joukon kriteerejä, mikä osoittaa, että on vaikea kehittää tarkkoja standardeja CIDP:lle ja MMN:lle, joilla voi olla vaihtelevia kliinisiä esityksiä.

Lisäksi, kuten aiemmin on kuvattu, elektrofysiologista tutkimusta suositellaan kaikille potilaille, joilla epäillään olevan CIDP tai MMN. Sähköfysiologiset kriteerit koostuvat osittaisesta johtumisestosta, johtamisnopeuden hidastumisesta, dispersiosta ja etäisyydestä riippuvaisesta yhdistemoottorin toimintapotentiaalin amplitudin pienenemisestä. Mitä tulee sairaushistoriaan ja kliinisiin tutkimuksiin, elektrofysiologinen tutkimus ei aina ole ratkaisevaa. Koski-kriteerit ja EFNS/PNS-kriteerit ovat kaksi erilaista kriteeriryhmää, joita käytetään usein. Silti on tärkeää muistaa, että Koski-kriteerien herkkyys ja spesifisyys ovat 63 ja 99 prosenttia, kun taas EFNS:n herkkyys ja spesifisyys olivat 81 ja 97 prosenttia. Tämän lisäksi CIDP:n varhainen hoito on tehnyt etenemisestä vaikeampaa luonnehtia, koska ajallinen komponentti on muuttunut.

On edelleen kiistanalaista, ovatko CIDP ja MMN spesifisiä sairauskokonaisuuksia vai pikemminkin oireyhtymiä. MMN on monella tapaa samanlainen kuin CIDP, mutta toisin kuin CIDP, MMN:lle on tunnusomaista, että se ei häiritse sensoria, etenee hitaammin ja esiintyy epäsymmetrisesti.

Sairauksien erityisiä syitä ei vielä tunneta, mutta yleisesti hyväksytään, että CIDP:n ja MMN:n patologiat perustuvat immunologisesti useisiin laukaisimiin. Tämän teorian mukaan immuunijärjestelmän solu- ja humoraalinen osa on mukana.

Useita tulehduksellisia biomarkkereita on tutkittu liittyen CIDP:hen, mukaan lukien sytokiinit CSF:ssä. Tutkimuksessa mitattiin interleukiini (IL)-12 ja IL-15 (tärkeimmät kasvu- ja erilaistumistekijät Th-1-soluille) ja IL-17 (Th-17-solujen laajenemisen ja aktivoitumisen merkki). Erityisesti IL-12:n havaittiin olevan mukana mahdollisena immuuniaktivaation markkerina CIDP:ssä.

Hermobiopsiaa on käytetty myös in situ -biomarkkereiden etsimiseen. Johtopäätös oli, että vaikka tulehdussolujen kokonaismäärät eivät erotelleet hyvin CIDP:n ja ei-inflammatoristen neuropatioiden välillä, endoneuriaalisten verisuonten ympärillä olevien makrofagiklustereiden kuvio voisi olla yksinkertainen tulehduksen merkkiaine, jolla on hyvä herkkyys ja spesifisyys.

Lisäksi toisessa tutkimuksessa on havaittu, että CIDP liittyy korkeaan haptoglobiinitasoon CSF:ssä. Tämän taustalla olevia mekanismeja ei ole vielä selvitetty. Siitä huolimatta tämä avaa haptoglobiinin mahdollisena hyödyllisenä biomarkkerina.

Erilaistumisklusteri 19 (CD-19) - lupaava B-solukohde! Tutkimus spontaanista autoimmuunipolyneuropatiasta (SAP) B7-2-poistoperäisistä ei-lihavia diabeteshiiristä, joka on eläinmalli ja jäljittelee ihmisen CIDP:n kroonista etenevää muotoa, on osoittanut, että hoito monoklonaalisella anti-CD19-vasta-aineella (mAb) johtaa B-solujen ja plasmablastien ehtymiseen, johon liittyy alentuneita seerumin IgG- ja IgM-tasoja ja PO-spesifisten plasmablastien ja B-solujen ehtymistä. CD-19 on proteiini, joka löytyy normaaleiden ja neoplastisten B-solujen pinnasta varhaisesta pre-B-solukehitysvaiheesta plasmasolujen erilaistumisen varhaisiin vaiheisiin. Suurin osa B-solulinjan pahanlaatuisista kasvaimista ekspressoi CD19:ää korkeilla tasoilla. Siksi CD19 on laaja B-solulinjan markkeri ja edustaa potentiaalisesti tärkeää kohdetta konjugoimattoman mAb-immunoterapian kannalta. Toisessa tutkimuksessa stimuloimalla CIDP-potilaiden verinäytteistä eristettyä CD19 B-solua B-solujen immunoreaktiivisuus parani, mutta 3 päivän sisällä IVIG-infuusioista B-solutaso CIDP:ssä aleni.

Erilaistumisklusteri 163 (CD-163) – uusi tapa mitata CIDP:tä ja MMN:ää? CD-163 on scavenger-reseptori (tunnistaa ja ottaa vastaan ​​makromolekyylejä), joka merkitsee monosyytti-makrofagiaktivaatiota. CD163 toimii makrofageissa hemoglobiini-haptoglobiinikompleksien reseptorina. Reseptorin liukoista muotoa kutsutaan sCD163:ksi, ja sitä löytyy plasmasta, jossa sen todetaan säädeltävän paljon useissa tulehdussairauksissa.

Voimakkaasti kohonneet arvot (>20 mg/l) havaitaan sairauksissa, kuten makrofagien aktivointioireyhtymä, hemofagosyyttinen oireyhtymä ja akuutti maksan vajaatoiminta. Lisäksi sCD163:n taso heijastaa taudin aktiivisuutta. Potilailla, joilla on nousevat ja korkeat arvot, todetaan olevan epäsuotuisa ennuste. Suurempia arvoja (5-20 mg/l) havaitaan maksasairauksissa, sepsiksessä ja Gaucherin taudissa. Septisilla potilailla, joiden arvot ovat yli 10 mg/l, on 10 kertaa suurempi kuolemaan johtavan lopputuloksen riski. Hieman kohonneita arvoja (3-5 mg/l) havaitaan usein tulehduksellisissa infektiosairauksissa ja syövässä.

Hypoteesi Potilailla, joita hoidetaan SCIG:llä CIDP:n ja MMN:n vuoksi, on korkeammat sCD163- ja CD19-pitoisuudet aivo-selkäydinnesteessä ja seerumissa terveisiin kontrollihenkilöihin verrattuna, ja se liittyy sairauden vakavuuteen.

Potilailla, joilla on äskettäin diagnosoitu CIDP tai MMN, on korkeammat sCD163- ja CD19-tasot kuin potilailla, joita hoidettiin säännöllisesti SCIG:llä.

Tarkoitus Määrittää sCD163:n ja CD19:n pitoisuudet aivo-selkäydinnesteessä ja seerumissa potilailla, joilla on CIDP tai MMN, verrattuna kontrolleihin (potilaat, joilla on määrittelemättömiä neurologisia oireita tai sairautta).

Menetelmätietolähteet Tässä tutkimuksessa käytetyt tiedot ovat peräisin useista lähteistä, kuten Tanskan väestörekisterirekisteristä, Tanskan kansallisesta potilasrekisteristä ja Tanskan kansallisesta reseptirekisteristä.

Tähän projektiin sisällytetään ja käytetään potilaskertomusta koskevia tietoja, mukaan lukien aiempi sairaushistoria, lääkkeiden todellinen käyttö, biokemiallisten analyysien ja aivojen kuvantamisen tulokset, poikkeavuudet kliinisissä tutkimuksissa ja lääkäreiden diagnostisen työn johtopäätökset.

Tutkimuspopulaatio

Tutkimuspopulaatio koostuu neljästä alaryhmästä:

Rekrytointi Kaikki osallistujat saavat tietoa hankkeesta ja heitä pyydetään antamaan sisältönsä osallistumiseen.

Osallistujat saavat kirjallista ja suullista tietoa tutkimuksesta. Suullinen tiedotus tapahtuu Aarhus Universitetshospitalin neurologian laitoksella. Lisäksi jaetaan pamfletti "Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg" (kliiniseen tutkimukseen osallistumisesta).

Tiedot antavat konsultti Henning Andersen, MD Lars Makrvardsen tai stud. med Malalai Musleh . Osallistujat voivat tuoda mukanaan seuralaisen ja heille tarjotaan viikko aikaa harkita osallistumista.

Pääsyä potilastietoihin pyydetään, jotka ilmoitetaan kirjallisessa tiedotusmateriaalissa.

Jos uutta tietoa tutkimukseen osallistumisen haitoista ilmenee, osallistujille ilmoitetaan asiasta välittömästi. Lisäksi osallistujalle ilmoitetaan, jos tutkimuksen aikana tehdyt arvioinnit tuovat tietoa potilaan yleisestä terveydentilasta, ellei potilas ole sitä selvästi kiistänyt.

Tutkimuksen päätyttyä osallistujat voivat ottaa yhteyttä tutkimuskoordinaattoriin saadakseen tietoa opintojen tuloksista.

Osallistujat eivät saa minkäänlaista maksua, mutta voivat saada korvauksen kuljetuksesta Osallistuminen edellyttää 3-5 ml:n selkäydinnestettä ja noin 10 ml:n verinäytteen poistamista, jota käytetään tiettyjen biomarkkerien, kuten sCD163, CD19 ja myeliiniproteiinit.

Muu tutkimus

Potilaille, joilla on CIDP ja hoidetaan SCIG:llä tai IVIG:llä sekä CIDP-potilailla, jotka eivät ole aiemmin saaneet lääkettä, tehdään kliininen tutkimus, jossa on seuraavat seikat:

• Neuropatiahäiriöpisteet (NIS)
• Kokonaistyökyvyttömyyden summa (ODSS)
• Neuropatian oirepisteet (NSS) Häiriöt tai hoidot, jotka estävät lannepunktion. Jos mukaan otettu potilas osoittautuu selkäydinnesteanalyysien jälkeen täyttävän poissulkemiskriteerit, potilas korvataan uudella potilaalla.

Diagnostisen työn ja siten myös tutkimusprojektin aikana tutkijat tekevät tämän aina potilaan henkistä ja fyysistä tilaa kunnioittaen. Tutkimushanke toteutetaan henkilötietojen käsittelystä annetun lain mukaisesti ja lisäksi hanke toimitetaan Keski-Jyllannin seudun yhteiseen aluetietojärjestelmään.

Analyysit Selkäydinneste ja seerumi analysoidaan Aarhusin yliopistollisen sairaalan kliinisen lääketieteen osastolla. Selkäydinneste ja verinäytteet talletetaan Århusin yliopistolliseen sairaalaan tutkimusbiopankkiin. Suunnitelmana on tehdä kaikki biokemialliset analyysit samaan aikaan, kun kaikki näytteet on kerätty. Projektin päätteeksi näytteet tehdään pseudo-anonymisoidaan. Ylimääräinen biologinen materiaali siirretään biopankkiin tulevaa tutkimusta varten.

sCD163:n pitoisuudet selkäydinnesteessä ja seerumissa analysoidaan jo vakiintuneilla tekniikoilla Aarhusin yliopistollisen sairaalan kliinisen lääketieteen laitoksella.

CD19-pitoisuudet selkäydinnesteessä ja seerumissa analysoidaan vakiintuneilla tekniikoilla Aarhusin yliopistollisen sairaalan immunologian osastolla.

Teho- ja tilastoanalyysit Sekä CIDP:n että MMN:n harvinaisuuden ja muutaman potilasmäärän vuoksi teholaskelmien tekeminen ei ole relevanttia.

Tilastollisiin analyyseihin käytetään ohjelmaa STATA. Parametrisia tai ei-parametrisia testejä käytetään riippuen tietojen normaalijakaumasta. Kaikessa tilastollisessa analyysissä käytetään 5 %:n merkitsevyystasoa.

Näkökulmat Tulehduksellisten polyneuropatioiden monista kliinisistä muunnelmista ja biomarkkereiden puutteesta johtuen CIDP:n diagnosointi on edelleen vaikeaa. On erittäin tärkeää tunnistaa uusia menetelmiä CIDP-potilaiden diagnosointiin ja seurantaan. Tämä voi myös mahdollistaa paremman ennusteen ja tarvittavan hoidon tason ennustamisen.

CIDP:n patologiaa ei vielä tunneta, mutta sen tiedetään olevan immuunivälitteinen. Useissa tutkimuksissa sCD163:n on osoitettu säädeltävän enemmän useissa tulehdussairauksissa, mikä viittaa siihen, että sCD163 on olennainen biomarkkeri CIDP:lle.

On myös osoitettu, että CD19 on lupaava B-solukohde sairautta modifioivien aineiden kehittämisessä autoimmuuni neuropatioissa.

Näitä löydöksiä voidaan käyttää diagnostisina markkereina potilailla, joilla on CIDP ja MMN. Eettiset näkökohdat Kaikille osallistujille tiedotetaan suullisesti ja kirjallisesti tutkimuksesta, ja he saavat harkinnan siitä, haluavatko he osallistua. Allekirjoitettu suostumus annetaan.

Tutkimusprojektiin osallistuville potilaille tehdään lannepunktio, verinäyte ja kliininen tutkimus.

Lannepunktio on toimenpide, jota käytetään aivo-selkäydinnesteen (CSF) keräämiseen analysointia varten. CSF on lupaava biomarkkerien lähde CIDP:ssä, koska proksimaaliset hermojuuret, joihin sairauden alkuvaiheessa vaikuttaa, ovat läheisessä anatomisessa kosketuksessa CSF-tilaan. Toimenpiteen aikana käytetään onttoa neulaa tunkeutumaan selkäydinkanavaan alaselän kolmannen-neljännen tai neljännen-viidennen lannenikaman tasolla. CSF tippuu sitten ulos neulan läpi ja kerätään. Lannepunktion tekemiseen liittyy riski, joka sisältää lannepunktion jälkeisen päänsäryn, jonka ilmaantuvuus on 12 %, yleisin nuoremmilla potilailla. Useimmiten päänsärky on lyhytkestoista ja se voidaan parantaa käyttämällä verilappua. Lisäksi lannepiste voi aiheuttaa tilapäistä lannerangan kipua ja veren kerääntymistä ihon alle. Epiduraalitilassa on erittäin alhainen verenvuodon riski selkäydinhermojen puristuessa ja vielä pienempi infektioriski (aivokalvontulehdus tai meningoenkefaliitti).

On kuitenkin tärkeää korostaa, että lannepunktio on osa rutiininomaista neuropatian diagnostista harjoittelua. Kuitenkin CIDP-potilaille, joita hoidetaan SCIG:llä tai IVIG:llä, tehdään lannepunktio vain tutkimustarkoituksiin. Ylimääräisen selkäydinneste- tai verinäytteen keräämiseen ei liity muita riskejä. Kun otetaan huomioon tähän hankkeeseen liittyvä pieni riski, taudin vakavuus ja kustannukset sekä mahdollisuus tunnistaa relevantti biomarkkeri CIDP:ssä, pidämme tätä projektia eettisesti hyväksyttävänä.

Julkaisu Tämän tutkimuksen positiiviset, negatiiviset ja epäselvät tulokset julkaistaan. Tulokset kirjoitetaan artikkelissa julkaistavaksi englanninkielisessä vertaisarvioidussa lehdessä.