sCD163 & CD19 als Kandidaten-Biomarker in CIDP und MMN

Chronisch entzündliche periphere Neuropathien sind gekennzeichnet durch fortschreitende Verschlechterung der Muskelkraft, Verlust der Sensibilität, verminderte oder fehlende Reflexe und beeinträchtigte Feinmotorik. Ursache ist häufig eine behandlungswürdige Demyelinisierung, aber auch Schädigungen der Axone können insbesondere bei unzureichender Behandlung auftreten. Chronisch entzündliche demyelinisierende Polyradikuloneuropathie (CIDP) und multifokale motorische Neuropathie (MMN) werden durch elektrophysiologische Untersuchung diagnostiziert, die Anzeichen einer Demyelinisierung und Leitungsblockaden zeigt. Darüber hinaus unterstützen bei CIDP ein erhöhter Proteinspiegel im Liquor cerebrospinalis und bei MMN der Nachweis von Anti-GM1-Antikörpern im Blut die Diagnose.

Die Patienten leiden an einer behindernden diffusen Muskelschwäche. Die Diagnose stützt sich in erster Linie auf die neurophysiologische Untersuchung und kann jedoch aufgrund großer klinischer Unterschiede und unempfindlicher Untersuchungsmethoden, einschließlich fehlender Biomarker, schwierig zu stellen sein.

Behandlung von CIDP und MMN CIDP und MMN sind immunvermittelte Neuropathien, bei denen die Behandlung der ersten Wahl intravenöses Immunglobulin (IVIG) ist, obwohl die Mechanismen, die der Wirkung von IVIG zugrunde liegen, noch nicht geklärt sind.

Frühere Studien deuten darauf hin, dass Fc-Rezeptoren auf natürlichen Killerzellen das Ziel von IVIG sind, da die zytotoxische Aktivität von NK-Zellen unterdrückt wurde, teilweise verursacht durch eine dosisabhängige Abnahme der Anzahl zirkulierender NK-Zellen. Weiterhin lag eine dosisabhängige Blockade von CD16 vor.

Die subkutane Verabreichung von Immunglobulinen (SCIG) wurde als alternativer Weg zu IVIG bei CIDP und MMN untersucht. Die Schlussfolgerung war, dass SCIG machbar, sicher und effektiv ist. Somit verbesserte SCIG im Vergleich zu Placebo und IVIG die Muskelkraft, die Gehleistung und den Behinderungswert. SCIG hat im Vergleich zu IVIG nur lokale Nebenwirkungen, und außerdem bevorzugte die Mehrheit der Patienten SCIG gegenüber IVIG aufgrund der Autonomie und Aufrechterhaltung stabiler Muskelleistung.

Es ist bekannt, dass etwa 30 % der CIDP-Patienten im Laufe des Jahres keine Behandlung mehr benötigen, um die Muskelkraft zu erhalten. Die Behandlung mit Immunglobulinen ist kostspielig und kann bei intravenöser Verabreichung schwere Nebenwirkungen hervorrufen (z. Thromboembolie, hämolytische Anämie und exfoliative Dermatitis). Daher sollten nur Patienten behandelt werden, die eindeutig darauf ansprechen. Andererseits ist es wichtig, rechtzeitig zu behandeln, um Morbidität und Behinderung zu reduzieren.

Aktuelle Untersuchungsmethoden Patienten mit Verdacht auf CIDP oder MMN werden anhand der Anamnese, klinischer Untersuchungen und neurophysiologischer Befunde diagnostiziert. Die Diagnose umfasst jedoch eine Fülle von Kriterien, was die Schwierigkeit veranschaulicht, genaue Standards für CIDP und MMN zu entwickeln, die unterschiedliche klinische Präsentationen haben können.

Darüber hinaus wird, wie zuvor beschrieben, eine elektrophysiologische Untersuchung für alle Patienten mit Verdacht auf CIDP oder MMN empfohlen. Die elektrophysiologischen Kriterien bestehen aus partiellem Leitungsblock, Verlangsamung der Leitungsgeschwindigkeit, Streuung und abstandsabhängiger Verringerung der Amplitude des zusammengesetzten motorischen Aktionspotentials. Wie bei der Anamnese und den klinischen Untersuchungen ist die elektrophysiologische Untersuchung nicht immer aussagekräftig. Die Koski-Kriterien und die Kriterien von EFNS /PNS sind zwei unterschiedliche Kriteriensets, die häufig verwendet werden. Dennoch ist es wichtig zu bedenken, dass die Koski-Kriterien eine Sensitivität und Spezifität von 63 und 99 Prozent haben, während die EFNS eine Sensitivität und Spezifität von 81 und 97 Prozent hatte. Darüber hinaus hat die frühzeitige Behandlung von CIDP die Charakterisierung des Fortschreitens erschwert, da eine zeitliche Komponente verändert wurde.

Ob es sich bei CIDP und MMN um spezifische Krankheitsbilder oder eher um Syndrome handelt, ist nach wie vor umstritten. MMN ist CIDP in vielerlei Hinsicht ähnlich, aber im Gegensatz zu CIDP ist MMN durch keine sensorische Störung, langsamere Progression und asymmetrische Präsentation gekennzeichnet.

Die spezifischen Ursachen der Erkrankungen sind noch unbekannt, aber es ist allgemein anerkannt, dass die Pathologien von CIDP und MMN immunologisch auf mehreren Auslösern beruhen. Nach dieser Theorie ist sowohl der zelluläre als auch der humorale Teil des Immunsystems beteiligt.

Mehrere entzündliche Biomarker wurden in Bezug auf CIDP untersucht, einschließlich Zytokine im Liquor. In der Studie wurden Interleukin (IL)-12 und IL-15 (die wichtigsten Wachstums- und Differenzierungsfaktoren für Th-1-Zellen) und IL-17 (ein Marker für die Expansion und Aktivierung von Th-17-Zellen) gemessen. Insbesondere IL-12 wurde als potentieller Marker der Immunaktivierung bei CIDP involviert gefunden.

Die Nervenbiopsie wurde auch zur Suche nach In-situ-Biomarkern verwendet. Die Schlussfolgerung war, dass, obwohl die Gesamtzahl der Entzündungszellen nicht gut zwischen CIDP und nicht-entzündlichen Neuropathien unterschied, das Muster von Makrophagen-Clustern um endoneurale Gefäße ein einfacher Entzündungsmarker mit guter Sensitivität und Spezifität sein könnte.

Darüber hinaus hat eine andere Studie herausgefunden, dass CIDP mit einem hohen Haptoglobinspiegel im Liquor verbunden ist. Die zugrunde liegenden Mechanismen dahinter sind noch nicht geklärt. Nichtsdestotrotz eröffnet dies Haptoglobin als möglichen nützlichen Biomarker.

Cluster of Differentiation 19 (CD-19) – ein vielversprechendes B-Zell-Target! Eine Studie zur spontanen autoimmunen Polyneuropathie (SAP) bei Mäusen mit B7-2-Knockout-Diabetes ohne Fettleibigkeit, die ein Tiermodell ist und die chronisch progressive Form des menschlichen CIDP nachahmt, hat gezeigt, dass die Behandlung mit monoklonalen Anti-CD19-Antikörpern (mAb) führt zu einer Depletion von B-Zellen und Plasmablasten, begleitet von verringerten Serum-IgG- und IgM-Spiegeln und einer Depletion von P0-spezifischen Plasmablasten und B-Zellen. CD-19 ist ein Protein, das auf der Oberfläche normaler und neoplastischer B-Zellen vom frühen Prä-B-Zell-Stadium der Entwicklung bis zu den frühen Stadien der Plasmazell-Differenzierung vorkommt. Die Mehrzahl der bösartigen Tumoren der B-Zell-Linie exprimiert CD19 in hohen Konzentrationen. Daher ist CD19 ein breiter Marker der B-Zell-Linie und stellt ein potenziell wichtiges Ziel für die Immuntherapie mit unkonjugierten mAb dar. In einer anderen Studie wurde durch Stimulierung der aus Blutproben von CIDP-Patienten isolierten CD19-B-Zellen die B-Zell-Immunreaktivität erhöht, aber innerhalb von 3 Tagen nach IVIG-Infusionen wurde der B-Zell-Spiegel in CIDP herunterreguliert.

Differenzierungscluster 163 (CD-163) – eine neue Methode zur Messung von CIDP und MMN? CD-163 ist ein Scavenger-Rezeptor (der Makromoleküle erkennt und aufnimmt), der die Monozyten-Makrophagen-Aktivierung markiert. CD163 wirkt für Makrophagen als Rezeptor für Hämoglobin-Haptoglobin-Komplexe. Die lösliche Form des Rezeptors heißt sCD163 und kommt im Plasma vor, wo sie bei einer Vielzahl von Entzündungskrankheiten hochreguliert wird.

Stark erhöhte Werte (>20 mg/l) werden bei Krankheiten wie dem Makrophagen-aktivierenden Syndrom, dem hämophagozytischen Syndrom und akutem Leberversagen beobachtet. Darüber hinaus spiegelt der sCD163-Spiegel die Aktivität der Krankheit wider. Patienten mit steigenden und hohen Werten haben eine ungünstige Prognose. Erhöhte Werte (5-20 mg/l) werden bei Lebererkrankungen, Sepsis und Morbus Gaucher beobachtet. Septische Patienten mit Werten über 10 mg/l haben ein 10-mal höheres Risiko für einen tödlichen Ausgang. Leicht erhöhte Werte (3-5 mg/l) werden häufig bei entzündlichen oder infektiösen Zuständen und bei Krebs beobachtet.

Hypothese Patienten, die wegen CIDP und MMN mit SCIG behandelt wurden, haben im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen höhere Konzentrationen von sCD163 und CD19 in ihrer Zerebrospinalflüssigkeit und ihrem Serum und hängen mit der Schwere der Erkrankung zusammen.

Patienten mit neu diagnostizierter CIDP oder MMN haben höhere sCD163- und CD19-Spiegel als Patienten, die regelmäßig mit SCIG behandelt werden.

Zweck Bestimmung der Konzentration von sCD163 und CD19 in der Zerebrospinalflüssigkeit und im Serum bei Patienten mit CIDP oder MMN im Vergleich zu Kontrollen (Patienten mit unspezifischen neurologischen Symptomen oder Erkrankungen).

Methode Datenquellen Die in dieser Studie verwendeten Daten stammen aus verschiedenen Quellen, wie z. B. dem dänischen Personenstandsregister, dem dänischen nationalen Patientenregister und dem dänischen nationalen Rezeptregister.

Informationen aus der Krankenakte werden in dieses Projekt einbezogen und verwendet, einschließlich früherer Krankengeschichte, tatsächlicher Einnahme von Medikamenten, Ergebnissen biochemischer Analysen und Bildgebung des Gehirns, Anomalien bei den klinischen Untersuchungen und den Schlussfolgerungen aus der diagnostischen Aufarbeitung durch den Arzt.

Studienpopulation

Die Studienpopulation besteht aus vier Untergruppen:

Rekrutierung Alle Teilnehmer erhalten Informationen über das Projekt und werden gebeten, ihre Inhalte für die Teilnahme anzugeben.

Die Teilnehmer erhalten schriftliche und mündliche Informationen über die Studie. Die mündliche Information findet in der Abteilung für Neurologie des Universitätskrankenhauses Aarhus statt. Außerdem wird die Broschüre „Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg“ (über die Teilnahme an einer klinischen Studie) verteilt.

Die Informationen werden von Berater Henning Andersen, MD Lars Makrvardsen oder Gestüt gegeben. mit Malalai Musleh . Die Teilnehmer können eine Begleitperson mitbringen und erhalten eine Woche Bedenkzeit für die Teilnahme.

Es wird Einsicht in Patientenakten verlangt, die im schriftlichen Informationsmaterial zur Verfügung gestellt werden.

Ergeben sich neue Erkenntnisse über Nachteile der Studienteilnahme, werden die Teilnehmer umgehend informiert. Darüber hinaus wird der Teilnehmer informiert, wenn Auswertungen während der Studie Erkenntnisse über den allgemeinen Gesundheitszustand des Patienten bringen, es sei denn, der Patient hat dies eindeutig abgelehnt.

Am Ende der Studie können sich die Teilnehmer an den Studienkoordinator wenden, um Informationen zu den Studienergebnissen zu erhalten.

Die Teilnehmer erhalten keinerlei Bezahlung, können aber eine Entschädigung für den Transport erhalten. Die Teilnahme beinhaltet die Entnahme von 3-5 ml Rückenmarksflüssigkeit und eine Blutprobe von etwa 10 ml, die zur Analyse bestimmter Biomarker wie sCD163, CD19 und verwendet werden Myelinproteine.

Andere Prüfung

Patienten mit CIDP und Behandlung mit SCIG oder IVIG sowie arzneimittelnaive CIDP-Patienten werden einer klinischen Untersuchung mit Folgendem unterzogen:

• Neuropathie-Beeinträchtigungs-Score (NIS)
• Gesamtwert der Behinderungssumme (ODSS)
• Neuropathie-Symptom-Score (NSS) Erkrankungen oder Behandlungen, die eine Lumbalpunktion kontraindizieren. Falls sich herausstellt, dass ein eingeschlossener Patient die Ausschlusskriterien nach Analysen der Rückenmarksflüssigkeit erfüllt, wird der Patient durch einen neuen Patienten ersetzt.

Während der diagnostischen Abklärung und damit auch im Forschungsprojekt werden die Untersucher dies stets mit Rücksicht auf die geistige und körperliche Verfassung des Patienten tun. Das Forschungsprojekt wird gemäß dem Gesetz über die Verarbeitung personenbezogener Daten durchgeführt und darüber hinaus wird das Projekt beim gemeinsamen regionalen Informationssystem für die Region Midtjylland eingereicht.

Analysen Die Rückenmarksflüssigkeit und das Serum werden in der Abteilung für klinische Medizin des Universitätskrankenhauses Aarhus analysiert. Die Rückenmarksflüssigkeit und die Blutproben werden in einer Forschungsbiobank am Universitätskrankenhaus Aarhus hinterlegt. Es ist geplant, alle biochemischen Analysen gleichzeitig mit der Entnahme aller Proben durchzuführen. Am Ende des Projekts werden die Proben pseudoanonymisiert. Überschüssiges biologisches Material wird für zukünftige Forschungszwecke in eine Biobank überführt.

Die Konzentrationen von sCD163 in Rückenmarksflüssigkeit und Serum werden mit bereits etablierten Techniken an der Abteilung für klinische Medizin des Universitätskrankenhauses Aarhus analysiert.

Die Konzentrationen von CD19 in Rückenmarksflüssigkeit und Serum werden mit etablierten Techniken in der Abteilung für Immunologie des Universitätskrankenhauses Aarhus analysiert.

Power- und statistische Analysen Aufgrund der Seltenheit von CIDP und MMN und der geringen Anzahl von Patienten ist es nicht relevant, Power-Berechnungen durchzuführen.

Für statistische Auswertungen wird das Programm STATA verwendet. Abhängig von der Normalverteilung der Daten werden parametrische oder nichtparametrische Tests verwendet. Bei allen statistischen Analysen wird ein Signifikanzniveau von 5 % verwendet.

Perspektiven Aufgrund der vielen klinischen Varianten entzündlicher Polyneuropathien und des Fehlens von Biomarkern bleibt die CIDP schwierig zu diagnostizieren. Es ist sehr wichtig, neue Methoden zur Diagnose und Überwachung von Patienten mit CIDP zu identifizieren. Dies kann auch eine bessere Vorhersage der Prognose und des erforderlichen Behandlungsniveaus ermöglichen.

Die Pathologie von CIDP ist noch unbekannt, aber es ist bekannt, dass es immunvermittelt ist. In mehreren Studien wurde gezeigt, dass sCD163 bei einem größeren Spektrum von entzündlichen Erkrankungen hochreguliert wird, was darauf hindeutet, dass sCD163 ein relevanter Biomarker für CIDP ist.

Es wurde auch bewiesen, dass CD19 ein vielversprechendes B-Zell-Target für die Entwicklung von krankheitsmodifizierenden Wirkstoffen bei Autoimmunneuropathien ist.

Diese Befunde können als diagnostische Marker bei Patienten mit CIDP und MMN verwendet werden. Ethische Erwägungen Alle Teilnehmenden werden mündlich und schriftlich über die Studie informiert und im Hinblick auf eine Teilnahme abgewogen. Eine unterschriebene Zustimmung wird erteilt.

Die Tests, die an den an diesem Forschungsprojekt beteiligten Patienten durchgeführt werden, sind Lumbalpunktion, Blutentnahme und klinische Untersuchung.

Eine Lumbalpunktion ist ein Verfahren zur Entnahme von Liquor (CSF) zur Analyse. Liquor ist eine vielversprechende Quelle für Biomarker bei CIDP, da die proximalen Nervenwurzeln, die früh in der Krankheit betroffen sind, in engem anatomischem Kontakt mit dem Liquorraum stehen. Dabei wird mit einer Hohlnadel der Wirbelkanal auf Höhe des dritten bis vierten bzw. vierten bis fünften Lendenwirbels im unteren Rückenbereich durchstochen. CSF tropft dann durch die Nadel heraus und wird gesammelt. Die Durchführung einer Lumbalpunktion birgt ein gewisses Risiko, zu dem Kopfschmerzen nach der Lumbalpunktion mit einer Inzidenz von 12 % gehören, die am häufigsten bei jüngeren Patienten auftreten. Am häufigsten sind die Kopfschmerzen von kurzer Dauer und können durch Aufbringen eines Blutpflasters geheilt werden. Darüber hinaus kann eine Lumbalpunktion vorübergehende Lumbalschmerzen und eine Blutansammlung unter der Haut verursachen. Es besteht ein sehr geringes Risiko für Blutungen im Epiduralraum mit Kompression von Spinalnerven und ein noch geringeres Risiko für Infektionen (Meningitis oder Meningoenzephalitis).

Es ist jedoch wichtig hervorzuheben, dass die Lumbalpunktion Teil des routinemäßigen diagnostischen Trainings für Neuropathie ist. Bei CIDP-Patienten, die mit SCIG oder IVIG behandelt werden, wird jedoch nur zu Forschungszwecken eine Lumbalpunktion durchgeführt. Mit der Entnahme einer zusätzlichen Probe von Rückenmarksflüssigkeit oder Blut sind keine weiteren Risiken verbunden. In Anbetracht des geringen Risikos, das mit diesem Projekt verbunden ist, der Schwere und Kosten der Krankheit und des Potenzials, einen relevanten Biomarker in CIDP zu identifizieren, halten wir dieses Projekt für ethisch vertretbar.

Veröffentlichung Positive, negative sowie nicht schlüssige Ergebnisse dieser Studie werden veröffentlicht. Die Ergebnisse werden in einem Artikel zur Veröffentlichung in einer englischsprachigen Peer-Review-Zeitschrift niedergeschrieben.