Granulosyyttipesäkkeitä stimuloivan tekijän vaikutus kliiniseen raskausasteeseen endometrioosia sairastavilla potilailla

• Tutkimustyyppi: Satunnaistettu kaksoissokkoutettu kontrolloitu tutkimus.
• Opiskelupaikka: IVF-yksikkö Ain Shams Universityn äitiyssairaalassa.

• Tutkimuspopulaatio: Yhteensä 88 naista, joilla on endometrioosi, otetaan mukaan tutkimukseen jaettuna kahteen ryhmään:

  • Ryhmä A (N=44): naiset saavat kohdunsisäistä G-CSF-infuusiota munasolun poimimispäivänä IVF-syklin aikana.
  • Ryhmä B (N = 44): naiset saavat lumelääkettä kohdunsisäisen suolaliuoksen infuusiona munasolun poimimispäivänä IVF-syklin aikana.
• Jakaminen ja piilottaminen: Kahdeksankymmentäkahdeksan kirjekuorta numeroidaan sarjanumerolla ja jokaiseen kirjekuoreen asetetaan vastaava kirjain, joka osoittaa allokoitua ryhmää satunnaistustaulukon mukaisesti. Kun ensimmäinen potilas saapuu, ensimmäinen kirjekuori avataan ja potilas jaetaan sisällä olevan kirjeen mukaan
• Satunnaistustaulukko:

SN ryhmä SN ryhmä SN ryhmä SN ryhmä SN ryhmä SN ryhmä SN ryhmä SN ryhmä

1. A 12 A 23 B 34 B 45 A 56 A 67 B 78 B
2. B 13 A 24 A 35 B 46 A 57 A 68 B 79 A
3. B 14 A 25 B 36 A 47 B 58 B 69 B 80 A
4. B 15 A 26 A 37 A 48 B 59 B 70 A 81 B
5. A 16 A 27 B 38 B 49 B 60 B 71 B 82 A
6. A 17 A 28 A 39 B 50 B 61 A 72 B 83 B
7. A 18 B 29 B 40 B 51 A 62 B 73 A 84 B
8. B 19 B 30 A 41 A 52 A 63 A 74 B 85 B
9. A 20 A 31 A 42 B 53 A 64 B 75 A 86 B
10. A 21 B 32 A 43 A 54 B 65 B 76 B 87 A

11. A 22 B 33 B 44 A 55 A 66 B 77 A 88 A

    • Näytteen koko: 88 potilasta, 44 ryhmässä A (tapaukset) ja 44 ryhmässä B (kontrollit).
    • Esimerkki perusteluista:

Tarvittava otoskoko laskettiin G*Power Software -ohjelmistolla (Universitӓt Düsseldorf, Saksa).

Ensisijainen tulosmittari on kliininen raskausaste. Tällä hetkellä ei ole riittävää tietoa granulosyyttipesäkkeitä stimuloivan tekijän vaikutuksesta kliiniseen raskauden määrään potilailla, joilla on endometrioosi ja joille tehdään in vitro -hedelmöitystä; siksi tämä esiselvittävä tutkimus kohdistuisi vaikutuksen kokoon, joka voisi olla kliinisesti merkityksellinen.

Joten on arvioitu, että 44 potilaan sisällyttäminen kuhunkin kahdesta tutkimusryhmästä (yhteensä 88 potilasta) saavuttaisi 80 %:n tehon (tyypin II virhe, 0,2) tilastollisesti merkitsevän eron havaitsemiseksi näiden kahden ryhmän välillä. kliininen raskausaste keskikokoiselle vaikutukselle, joka vastaa w-kerrointa 0,3 käyttämällä kaksipuolista khin-neliötestiä, jossa on 1 vapausaste ja tavoitetestin luotettavuus asetettu tasolle 95 % (tyypin I virhe. 0,05). Vaikutuksen koko (w) lasketaan seuraavasti:

w = , missä on khin-neliötilasto ja N on kokonaisotoskoko (Chow et al., 2003).

Tavoitteena oleva vaikutuskoko w = 0,3 on valittu, koska sitä voidaan pitää kliinisesti merkittävänä erona, joka on etsittävä tässä tutkivassa tutkimuksessa.

• Eettiset näkökohdat: Kaikilta osallistujilta hankitaan kirjallinen tietoinen suostumus ennen seulontaa ja ilmoittautumista. Osallistujat osallistuvat tutkimukseen vapaaehtoisesti ja heidän luottamuksellisuuttaan kunnioitetaan. Kaikille osallistujille selitetään tutkimukseen osallistumisen edut. Tutkimukseen osallistumisesta ei aiheudu haittaa osallistujille tutkimuseettisen toimikunnan hyväksynnän jälkeen.
• Opiskelumenettelyt:

Kaikille osallistujille tehdään seuraavat vaatimukset:

A) Yksityiskohtainen sairaushistoria, mukaan lukien:

• Henkilökohtainen historia
• Kuukautisten historia
• Menneisyys ja synnytyshistoria

B) Fyysinen tarkastus:

Anamneesin ottamisen ja sekä sisällyttämis- että poissulkemiskriteerien täyttymisen jälkeen tehdään kliininen tutkimus, johon kuuluu: yleinen vatsan ja lantion alueen tutkimus.

C) Laboratoriotutkimukset:

Rutiinitutkimukset, mukaan lukien: paasto- ja aterianjälkeinen verensokeri ja täydellinen verenkuva.

D) Ovulaation induktio:

• Spontaanien syklien kolmantena päivänä kaikilla potilailla on perushormoniprofiili (FSH, LH, E2, TSH ja prolaktiini).
• Transvaginaalinen (TV) ultraääni (U/S) stimuloimattomien syklien 3. päivänä tehdään 5–9 MHz:n transvaginaalisella koettimella. Kaikki potilaat, joilla on kohdun poikkeavuuksia, suljetaan pois.
• Munasarjojen hyperstimulaatioprotokollaa ylläpidetään pitkän GnRH-agonistiprotokollan mukaisesti alkaen keskiluteaalivaiheesta antamalla päivittäin ihon alle triptoreliiniasetaattia (Decapeptyl 0,05 mg, Ferring Pharmaceutical, Kid, Saksa). Sitten seuraavan syklin päivänä 3 munasarjojen hyperstimulaatio aloitetaan päivittäisellä HMG-injektiolla (Menogon 75 lU/amp "Ferring Pharmceutical, Kid, Saksa "tai Merional 75 IU/amp" IBSA, Sveitsi"). Gonadotropiinien aloitusannos määrätään koehenkilöiden iän ja ruumiinpainon mukaan, minkä jälkeen annosta säädetään munasarjavasteen mukaan, joka arvioidaan transvaginaalisella follikulometrialla, joka tehdään syklin kuudentena päivänä.
• Munasarjavasteen mukaan TV U/S suoritetaan joka toinen päivä ja sillä hetkellä, kun johtava follikkeli saavuttaa 16 mm, suoritetaan päivittäin TV U/S, kunnes suurimman follikkelin halkaisija on >18 mm. HMG:n enimmäiskesto ei saa ylittää päivää 16.
• HCG (Choriomon 10 000 lU/amp. "IBSA, Sveitsi") annetaan ovulaation käynnistämiseksi.

E) Sonografia:

Transvaginaalinen ultraäänitutkimus tehdään HCG-antopäivänä kohdun limakalvon paksuuden ja kuvion mittaamiseksi.

Endometriumin kuvio luokitellaan seuraavasti:

• Proliferatiivinen, kun kaikukyky on hypoechoic suhteessa myometriumiin.
• Peri-ovulaatio, kun se on kolmikerroksinen.
• Sekretiivinen, kun se on hyperechoic.

F) Munasolun poiminta:

• 36 tuntia HCG-injektion jälkeen anturi liitetään ultraäänijärjestelmään. Ohjauspalkin suunta tarkistetaan. Punktioneula liitetään aspiraatiolaitteeseen, joka on kiinnitetty kiinnitysrenkaalla emättimen anturin etu- ja takapäähän, mikä määrittää pistosuunnan, joka vastaa ultraäänikuvan ohjaussädettä.
• Aspiraatio tarkistetaan koeputkilla. Kohtu, sekä munasarjat että suoliluun verisuonet tunnistetaan visualisoinnin avulla molemmista tasoista. Emättimen ylemmän navan ja munasarjojen välinen etäisyys arvioidaan tarkasti (huolehditaan suoliston tai verisuonten väliinpositiosta).
• Lähimmän saavutettavissa olevan follikkelin (etäisyys emättimen yläosasta follikkelin keskustaan) syvyyspaikannus tehdään. Neula työnnetään voimakkaasti follikkelin keskustaan ​​(Aspiraatiopaine 90-100 mmHg).

G) IVF-ICSI:

- Intrasytoplasminen siittiöiden injektio suoritetaan metafaasin II munasoluille suoralla tunkeutumistekniikalla, hedelmöitystulokset arvioidaan 16-19 tuntia ICSI:n jälkeen. Hedelmöitystä pidetään normaalina kahden esituman läsnäolon vuoksi. Munasolujen degeneraatio tunnistetaan sytoplasmisen sisällön romahtamisesta ja vyöhykkeestä irtautumisesta. Epäonnistunut hedelmöitys määritellään esitumien puuttumisen perusteella.

H) Alkionsiirto:

• Alkionsiirto suoritetaan päivänä 5 käyttämällä kokkikatetria ultraääniohjaimen alla noin 1-1,5 cm:n etäisyydellä silmänpohjasta saman gynekologin toimesta.
• Siirrettyjen alkioiden määrä 2-3 alkiota.

Minä viimeinkin:

Seerumin βhCG suoritetaan 12 päivää alkionsiirron jälkeen ja toistetaan 48 tunnin kuluttua. jota seurasi USA 6 viikkoa alkionsiirron jälkeen.

• Tutkimusinterventiot: G-CSF-ryhmälle munasolujen talteenottopäivänä munasolujen keräämisen jälkeen annettiin 30 mU (300 mcg/0,5 ml) G-CSF:ää (NeupogenTM, Filgastrim, Amgen Inc., Thousand Oaks, CA, USA) hitaalla kohdunsisäisellä infuusiolla IUI-katetrilla (AINSEGREY, RIMOS, Italia). Kontrollissa käytettiin normaalia suolaliuosta kohdunsisäiseen infuusioon G-CSF:n sijasta.
• Tilastollinen analyysi: Tiedot analysoidaan käyttämällä IBM© SPSS© Statistics versiota 22 (IBM© Corp., Armonk, NY). Normaalisti jakautuneet numeeriset tiedot esitetään keskiarvoina ja SD-arvoina ja vinotiedot mediaani- ja kvartiilivälinä. Laadulliset tiedot ovat lukuja ja prosentteja. Normaalisti jakautuneiden numeeristen tietojen vertailu tehdään parittoman t-testin avulla. Vääristyneitä tietoja verrataan Mann-Whitney-testillä. Kategorisia tietoja verrataan käyttämällä Pearsonin khin neliötestiä tai kalastajan tarkkaa testiä tarvittaessa. Kaksipuolista p-arvoa ˂0,05 pidetään tilastollisesti merkitsevänä.