Effect van granulocyt-koloniestimulerende factor op het aantal klinische zwangerschappen bij patiënten met endometriose

• Type studie: een gerandomiseerde dubbelblinde gecontroleerde studie.
• Studieomgeving: IVF-eenheid in het Kraamziekenhuis van de Ain Shams University.

• Studiepopulatie: In totaal zullen 88 vrouwen met endometriose deelnemen aan de studie, verdeeld in twee groepen:

  • Groep A (N=44): vrouwen krijgen tijdens de IVF-cyclus een intra-uteriene infusie van G-CSF op de dag van het ophalen van de eicel.
  • Groep B (N=44): vrouwen krijgen een placebo-intra-uterien infuus van zoutoplossing op de dag van het ophalen van de eicel tijdens de IVF-cyclus.
• Toewijzing en geheimhouding: achtentachtig enveloppen worden serieel genummerd en in elke envelop wordt de corresponderende letter die de toegewezen groep aangeeft, geplaatst volgens de randomisatietabel. Wanneer de eerste patiënt arriveert, wordt de eerste envelop geopend en wordt de patiënt toegewezen volgens de brief erin
• Randomisatietabel:

SN Groep SN Groep SN Groep SN Groep SN Groep SN Groep SN Groep SN Groep

1. A 12 A 23 B 34 B 45 A 56 A 67 B 78 B
2. B 13 A 24 A 35 B 46 A 57 A 68 B 79 A
3. B 14 A 25 B 36 A 47 B 58 B 69 B 80 A
4. B 15 A 26 A 37 A 48 B 59 B 70 A 81 B
5. A 16 A 27 B 38 B 49 B 60 B 71 B 82 A
6. A 17 A 28 A 39 B 50 B 61 A 72 B 83 B
7. A 18 B 29 B 40 B 51 A 62 B 73 A 84 B
8. B 19 B 30 A 41 A 52 A 63 A 74 B 85 B
9. A 20 A 31 A 42 B 53 A 64 B 75 A 86 B
10. A 21 B 32 A 43 A 54 B 65 B 76 B 87 A

11. A 22 B 33 B 44 A 55 A 66 B 77 A 88 A

    • Steekproefgrootte: 88 patiënten, 44 in groep A (de gevallen) en 44 in groep B (de controles).
    • Voorbeeld rechtvaardiging:

De vereiste steekproefomvang werd berekend met behulp van de G*Power Software (Universitӓt Düsseldorf, Duitsland).

De primaire uitkomstmaat is het klinisch zwangerschapspercentage. Momenteel is er geen adequate informatie over het effect van granulocyt-koloniestimulerende factor op het klinische zwangerschapspercentage bij patiënten met endometriose die in-vitrofertilisatie ondergaan; daarom zou de huidige verkennende studie zich richten op een effectgrootte die klinisch relevant zou kunnen zijn.

Er wordt dus geschat dat de inclusie van 44 patiënten in elk van de 2 studiegroepen (totaal, 88 patiënten) een vermogen van 80% zou bereiken (type II-fout, 0,2) om een ​​statistisch significant verschil tussen de 2 groepen te detecteren wat betreft het klinische zwangerschapspercentage voor een gemiddelde effectgrootte dat overeenkomt met een w-coëfficiënt van 0,3 met behulp van een tweezijdige chikwadraattoets met 1 vrijheidsgraad en het beoogde testvertrouwen ingesteld op een niveau van 95% (type I-fout. 0,05). De effectgrootte (w) wordt als volgt berekend:

w = , waar is de chikwadraat-statistiek en N is de totale steekproefomvang (Chow et al., 2003).

Er is gekozen voor de beoogde effectgrootte van w = 0,3 omdat dit kan worden beschouwd als een klinisch relevant verschil waarnaar in deze verkennende studie moet worden gezocht.

• Ethische overwegingen: Voorafgaand aan de screening en inschrijving zal van alle deelnemers een schriftelijke geïnformeerde toestemming worden verkregen. Deelnemers nemen vrijwillig deel aan het onderzoek en hun vertrouwelijkheid wordt gerespecteerd. Voordelen van deelname aan het onderzoek zullen aan alle deelnemers worden uitgelegd. Deelname aan het onderzoek zal de deelnemers geen schade berokkenen na goedkeuring van de ethische commissie voor onderzoek.
• Studieprocedures:

Alle deelnemers worden onderworpen aan het volgende:

A) Gedetailleerde medische geschiedenis, waaronder:

• Persoonlijke geschiedenis
• Menstruatie geschiedenis
• Verleden en verloskundige geschiedenis

B) Lichamelijk onderzoek:

Na het afnemen van de anamnese en het voldoen aan zowel inclusie- als exclusiecriteria, zal klinisch onderzoek worden gedaan, waaronder: algemeen abdominaal en bekkenonderzoek.

C) Laboratoriumonderzoeken:

Routineonderzoeken, waaronder: nuchtere en postprandiale bloedsuikerspiegel en volledig bloedbeeld.

D) Inductie van ovulatie:

• Op dag 3 van spontane cycli hebben alle patiënten een basaal hormonaal profiel (FSH, LH, E2, TSH en prolactine).
• Transvaginale (TV) echografie (U/S) op dag 3 van niet-gestimuleerde cycli wordt uitgevoerd door een transvaginale sonde van 5-9 MHZ. Elke patiënt met baarmoederafwijkingen wordt uitgesloten.
• Ovarieel hyperstimulatieprotocol zal worden gehouden volgens een lang GnRH-agonistprotocol, beginnend vanaf de midluteale fase door dagelijkse subcutane injectie van triptoreline-acetaat (Decapeptyl 0,05 mg, Ferring Pharmaceutical, Kid, Duitsland). Vervolgens zal op dag 3 van de volgende cyclus ovariële hyperstimulatie worden gestart door dagelijkse injectie van HMG (Menogon 75 lU/amp "Ferring Pharmceutical, Kid, Duitsland" of Merional 75 IU/amp" IBSA, Zwitserland"). De startdosis gonadotropines zal worden voorgeschreven op basis van de leeftijd en het lichaamsgewicht van de proefpersonen, daarna zal de dosis worden aangepast op basis van de ovariële respons die zal worden beoordeeld door middel van transvaginale folliculometrie, wat zal worden gedaan op cyclusdag zes.
• Volgens de ovariële respons wordt TV U/S om de andere dag uitgevoerd en op het moment dat de leidende follikel 16 mm bereikt, wordt dagelijks TV U/S uitgevoerd totdat de grootste follikel een diameter van >18 mm bereikt. De maximale duur van HMG mag niet langer zijn dan dag 16.
• HCG (Choriomon 10.000 lU/amp. "IBSA, Zwitserland") zal worden toegediend om de eisprong op gang te brengen.

E) Echografie:

Transvaginale echografie zal worden uitgevoerd op de dag van HCG-toediening om de dikte en het patroon van het endometrium te meten.

Het endometriumpatroon wordt geclassificeerd als:

• Proliferatief wanneer echogeniciteit hypo-echoïsch is ten opzichte van het myometrium.
• Peri-ovulatoir wanneer het trilaminair is.
• Secretoir wanneer het hyperechoïsch is.

F) Ovum ophalen:

• 36 uur na de HCG-injectie wordt de transducer aangesloten op het ultrasone systeem. De richting van de geleidestraal wordt gecontroleerd. De punctienaald zal worden verbonden met een afzuigapparaat dat met een fixatiering aan de voor- en achtereinden van de vaginale transducer is bevestigd, waardoor de richting van de punctie wordt bepaald die overeenkomt met de geleidingsstraal op het ultrasone beeld.
• De aspiratie wordt gecontroleerd met behulp van reageerbuizen. De baarmoeder, beide eierstokken en iliacale vaten worden geïdentificeerd door de visualisatie in beide vlakken. De afstand tussen de bovenpool van de vagina en de eierstok zal nauwkeurig worden geëvalueerd (er zal voor worden gezorgd dat intestinale of vasculaire interpositie wordt vermeden).
• Dieptelokalisatie van de dichtstbijzijnde toegankelijke follikel (afstand van de bovenste vaginale pool tot het midden van de follikel) zal worden gedaan. De naald wordt krachtig naar het midden van de follikel geduwd (aspiratiedruk 90-100 mmHg).

G) IVF-ICSI:

- Intracytoplasmatische sperma-injectie zal worden uitgevoerd op metafase II-eicellen met behulp van de directe penetratietechniek, bevruchtingsresultaten zullen 16 tot 19 uur na ICSI worden beoordeeld. Bevruchting wordt als normaal beschouwd door de aanwezigheid van twee pronuclei. Eiceldegeneratie zal worden geïdentificeerd door ineenstorting van de cytoplasmatische inhoud en scheiding van de zona. Mislukte bevruchting wordt bepaald door de afwezigheid van de pronuclei.

H) Embryotransfer:

• Embryo-overdracht zal op dag 5 worden gedaan met behulp van een kookkatheter onder echografie op een afstand van ongeveer 1-1,5 cm van de fundus door dezelfde gynaecoloog.
• Aantal teruggeplaatste embryo's 2-3 embryo's.

ik) Tot slot:

Een serum βhCG zal 12 dagen na de embryotransfer worden uitgevoerd en na 48 uur worden herhaald. gevolgd door US 6 weken na embryotransfer.

• Studie-interventies: In de G-CSF-groep werd op de dag van het ophalen van de eicel, na het verzamelen van de eicellen, 30 mU (300 mcg/0,5 ml) G-CSF (NeupogenTM, Filgastrim, Amgen Inc., Thousand Oaks, CA, VS) toegediend. door langzame transcervicale intra-uteriene infusie met IUI-katheter (AINSEGREY, RIMOS, Italië). Bij controles werd normale zoutoplossing gebruikt voor intra-uteriene infusie in plaats van G-CSF.
• Statistische analyse: De gegevens worden geanalyseerd met behulp van IBM© SPSS© Statistics versie 22 (IBM© Corp., Armonk, NY). Normaal verdeelde numerieke gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde en SD, en scheve gegevens als mediaan en interkwartielbereik. Kwalitatieve gegevens zijn aantal en percentage. Vergelijking van normaal verdeelde numerieke gegevens zal worden gedaan met behulp van de ongepaarde t-test. Scheve gegevens zullen worden vergeleken met behulp van de Mann-Whitney-test. Categorische gegevens zullen worden vergeleken met behulp van de Pearson chi-kwadraattoets of de exacte toets van Fisher, indien van toepassing. Een tweezijdige p-waarde ˂0,05 wordt als statistisch significant beschouwd.