Effekt av granulocytkolonistimulerande faktor på klinisk graviditetsfrekvens hos patienter med endometrios

• Typ av studie: En randomiserad dubbelblind kontrollerad studie.
• Studiemiljö: IVF-enhet på Maternity Hospital vid Ain Shams University.

• Studiepopulation: Totalt 88 kvinnor med endometrios kommer att inkluderas i studien uppdelade i två grupper:

  • Grupp A (N=44): kvinnor kommer att få intrauterin infusion av G-CSF på dagen för äggupptagning under IVF-cykeln.
  • Grupp B (N=44): kvinnor kommer att få placebo intrauterin infusion av koksaltlösning på dagen för äggupptagning under IVF-cykeln.
• Tilldelning och döljande: Åttioåtta kuvert kommer att numreras i serie och i varje kuvert kommer motsvarande bokstav som anger den tilldelade gruppen att placeras enligt randomiseringstabellen. När den första patienten anländer kommer det första kuvertet att öppnas och patienten tilldelas enligt bokstaven inuti
• Randomiseringstabell:

SN Group SN Group SN Group SN Group SN Group SN Group SN Group SN Group

1. A 12 A 23 B 34 B 45 A 56 A 67 B 78 B
2. B 13 A 24 A 35 B 46 A 57 A 68 B 79 A
3. B 14 A 25 B 36 A 47 B 58 B 69 B 80 A
4. B 15 A 26 A 37 A 48 B 59 B 70 A 81 B
5. A 16 A 27 B 38 B 49 B 60 B 71 B 82 A
6. A 17 A 28 A 39 B 50 B 61 A 72 B 83 B
7. A 18 B 29 B 40 B 51 A 62 B 73 A 84 B
8. B 19 B 30 A 41 A 52 A 63 A 74 B 85 B
9. A 20 A 31 A 42 B 53 A 64 B 75 A 86 B
10. A 21 B 32 A 43 A 54 B 65 B 76 B 87 A

11. A 22 B 33 B 44 A 55 A 66 B 77 A 88 A

    • Provstorlek: 88 patienter, 44 i grupp A (fallen) och 44 i grupp B (kontrollerna).
    • Exempel på motivering:

Den erforderliga urvalsstorleken beräknades med hjälp av G*Power Software (Universitӓt Düsseldorf, Tyskland).

Det primära utfallsmåttet är den kliniska graviditetsfrekvensen. För närvarande finns det ingen adekvat information om effekten av granulocytkolonistimulerande faktor på klinisk graviditetsfrekvens hos patienter med endometrios som genomgår provrörsbefruktning; därför skulle föreliggande explorativa studie inriktas på en effektstorlek som kan vara kliniskt relevant.

Så det uppskattas att inkluderingen av 44 patienter i var och en av de 2 studiegrupperna (totalt 88 patienter) skulle uppnå en kraft på 80 % (typ II-fel, 0,2) för att upptäcka en statistiskt signifikant skillnad mellan de 2 grupperna med avseende på den kliniska graviditetsfrekvensen för en medeleffektstorlek motsvarande en w-koefficient på 0,3 med ett tvåsidigt chi-kvadrattest med 1 frihetsgrad och den målinriktade testkonfidensen satt till en nivå av 95 % (typ I-fel. 0,05). Effektstorleken (w) beräknas enligt följande:

w = , där är chi-kvadratstatistiken och N är den totala urvalsstorleken (Chow et al., 2003).

Den riktade effektstorleken på w = 0,3 har valts ut eftersom det skulle kunna betraktas som en kliniskt relevant skillnad att söka i denna explorativa studie.

• Etiska överväganden: Ett skriftligt informerat samtycke kommer att erhållas från alla deltagare innan screening och registrering. Deltagarna kommer att delta frivilligt i forskningen och deras konfidentialitet kommer att respekteras. Fördelarna med att delta i forskningen kommer att förklaras för alla deltagare. Deltagande i forskningen kommer inte att skada deltagarna efter godkännande av forskningsetiska kommittén.
• Studieprocedurer:

Alla deltagare kommer att utsättas för följande:

A) Detaljerad medicinsk historia inklusive:

• Personlig historia
• Menstruationshistoria
• Tidigare och obstetrisk historia

B) Fysisk undersökning:

Efter att ha tagit anamnesen och uppfyllt både inklusions- och uteslutningskriterier kommer klinisk undersökning att göras inklusive: allmän buk- och bäckenundersökning.

C) Laboratorieundersökningar:

Rutinundersökningar inklusive: fasta och postprandialt blodsocker och fullständigt blodvärde.

D) Induktion av ägglossning:

• På dag 3 av spontana cykler kommer alla patienter att ha basal hormonprofil (FSH, LH, E2, TSH och prolaktin).
• Transvaginalt (TV) ultraljud (U/S) på dag 3 av icke-stimulerade cykler kommer att göras med transvaginal sond på 5-9 MHZ. Alla patienter som upptäcks ha avvikelser i livmodern kommer att uteslutas.
• Ovarial hyperstimuleringsprotokoll kommer att hållas enligt ett långt GnRH-agonistprotokoll som börjar från midlutealfasen genom daglig subkutan injektion av triptorelinacetat (Decapeptyl 0,05 mg, Ferring Pharmaceutical, Kid, Tyskland). Sedan på dag 3 av nästa cykel kommer ovariehyperstimulering att startas genom daglig injektion av HMG (Menogon 75 lU/amp "Ferring Pharmaceutical, Kid, Tyskland "eller Merional 75 IE/amp" IBSA, Schweiz"). Startdosen av gonadotropiner kommer att ordineras i enlighet med försökspersonernas ålder och kroppsvikt, därefter kommer dosen att justeras enligt äggstockssvaret som kommer att bedömas genom transvaginal follikulometri som kommer att göras på cykeldag sex.
• Enligt äggstockssvaret kommer TV U/S varannan dag att utföras och i det ögonblick när den ledande follikeln når 16 mm kommer daglig TV U/S att utföras tills den största follikeln når en diameter på >18 mm. Den maximala varaktigheten av HMG kommer inte att tillåtas överstiga dag 16.
• HCG (Choriomon 10 000 lU/amp. "IBSA, Switzerland") kommer att administreras för att utlösa ägglossning.

E) Sonografi:

Transvaginal sonografi kommer att utföras på dagen för HCG-administration för att mäta endometrietjocklek och mönster.

Endometriummönstret kommer att klassificeras som:

• Proliferativ när ekogenicitet är hypoekoisk i förhållande till myometriet.
• Peri-ägglossning när den är trilaminär.
• Sekretoriskt när det är hyperechoic.

F) Upptagning av ägg:

• 36 timmar efter HCG-injektion kommer givaren att anslutas till ultraljudssystemet. Styrstrålens riktning kommer att kontrolleras. Punkteringsnålen kommer att anslutas till en aspirationsapparat som är fäst med en fixeringsring vid den främre och bakre änden av den vaginala transduktorn, och definierar därigenom punkteringsriktningen som motsvarar styrstrålen på ultraljudsbilden.
• Aspirationen kommer att kontrolleras med hjälp av provrör. Livmodern, både äggstockar och höftkärl kommer att identifieras av visualiseringen i båda planen. Avståndet mellan slidans övre pol och äggstocken kommer att utvärderas noggrant (försiktighet kommer att vidtas för att undvika intestinal eller vaskulär interposition).
• Djuplokalisering av närmast tillgängliga follikel (avstånd från den övre slidpolen till mitten av follikeln) kommer att göras. Nålen kommer att tryckas kraftigt till mitten av follikeln (aspirationstryck 90-100 mmHg).

G) IVF-ICSI:

- Intracytoplasmatisk spermieinjektion kommer att utföras på metafas II oocyter med hjälp av direktpenetrationstekniken, befruktningsresultat kommer att bedömas 16 till 19 timmar efter ICSI. Befruktning kommer att anses vara normal genom närvaron av två pronuclei. Oocytdegeneration kommer att identifieras genom kollaps av cytoplasmatiskt innehåll och separation från zonen. Misslyckad befruktning kommer att definieras av frånvaron av pronuclei.

H) Embryoöverföring:

• Embryoöverföring kommer att göras dag 5 med kokkateter under ultraljudsguide på ett avstånd ca 1-1,5 cm från ögonbotten av samma gynekolog.
• Antal embryon överförda 2-3 embryon.

I) Slutligen:

En serum-βhCG kommer att utföras 12 dagar efter embryoöverföring och upprepas efter 48 timmar. följt av US 6 veckor efter embryoöverföring.

• Studieinterventioner: I G-CSF-gruppen administrerades 30 mU (300 mcg/0,5 ml) G-CSF (NeupogenTM, Filgastrim, Amgen Inc., Thousand Oaks, CA, USA) på dagen för oocythämtning, efter oocytuppsamling. genom långsam transcervikal intrauterin infusion med IUI-kateter (AINSEGREY, RIMOS, Italien). I kontroller användes normal saltlösning för intrauterin infusion istället för G-CSF.
• Statistisk analys: Data kommer att analyseras med IBM© SPSS© Statistics version 22 (IBM© Corp., Armonk, NY). Normalt fördelade numeriska data kommer att presenteras som medelvärde och SD, och skeva data som median och interkvartilt intervall. Kvalitativ data kommer att vara antal och procent. Jämförelse av normalfördelade numeriska data kommer att göras med det oparade t-testet. Skev data kommer att jämföras med Mann-Whitney-testet. Kategoriska data kommer att jämföras med Pearsons chi-kvadrattest eller Fishers exakta test, om så är lämpligt. Ett tvåsidigt p-värde ˂0,05 kommer att anses vara statistiskt signifikant.