Insuliiniresistenssi, sarkopenia ja plasman BAIBA-tasot

Tutkimussuunnittelu ja väestö

Potilaat ja menetelmät

Tämä tutkimus on havainnollinen, poikkileikkaus- ja prospektiivinen kohorttitutkimus. Poikkileikkaustutkimukseen otetaan mukaan sataviisikymmentä potilasta, joilla on ei-diabeettisia hemodialyysipotilaita; Kontrolleiksi valitaan 20 tervettä henkilöä. Rekrytoidaan yleisiä aikuisia HD-potilaita, joilla on dialyysivuodet yli 3 kuukautta. Potilaita hoidetaan tavallisella HD-reseptillä, kolme kertaa viikossa, neljän tunnin ajan. Potilaat, joilla on merkittäviä samanaikaisia ​​sairauksia, kuten syöpä, sydämen vajaatoiminta tai vakava maksasairaus ja krooninen infektio, kuten diabeettinen jalka, suljetaan pois. Tämä tutkimus on tehty Helsingin julistuksen ohjeiden mukaisesti ja kaikki menettelyt on tarkistettu ja hyväksytty aluesairaalan eettisessä toimikunnassa. Kaikkien koehenkilöiden tulee antaa kirjallinen tietoinen suostumuksensa osallistua tutkimukseen. Koehenkilöiden demografiset ja kliiniset ominaisuudet, mukaan lukien ikä, sukupuoli, paino, pituus, painoindeksi (BMI), dialyysivuosi ja Kt/V, kirjataan, ja samanaikaiset sairaudet ja nykyiset hoidot kerätään.

Antropometriset ja biokemialliset arvioinnit

Systolinen ja diastolinen verenpaine mitataan koehenkilöiden ollessa makuuasennossa. Kaikille koehenkilöille suoritettiin pituuden ja painon mittaus. Vyötärön ympärysmitta mitattiin rintakehän alareunan ja suoliluun välisestä keskikohdasta. Plasman insuliinin pitoisuus määritettiin radioimmunomäärityksellä. Plasman paastoglukoosi mitattiin glukoosioksidaasimenetelmällä. HbA1c mitattiin affiniteettikromatografialla. Kokonaiskolesteroli-, triglyseridi- ja HDL-kolesterolitasot mitattiin entsymaattisesti käyttämällä autoanalysaattoria (Hitachi 747; Hitachi, Tokio, Japani). Seerumin insuliinipitoisuudet määrittää IRMA. Adiponektiini- ja leptiinipitoisuudet mitataan käyttämällä kaupallisesti saatavaa ELISA-kittiä.

näytteen valmistus

Jokaiselta koehenkilöltä otetaan verinäytteet jokaisen osallistujan valtimo-laskimofistelistä aamulla vähintään 8 tunnin paaston jälkeen ja hemodialyysipäivänä. Näytteet käsitellään asianmukaisesti, jäähdytetään 2-8 C:een ja plasma erotetaan välittömästi sentrifugoimalla. Jokainen seeruminäyte lämpöinaktivoidaan inkuboimalla 65 °C:ssa 30 minuutin ajan. Naudan sikiön seerumi (FBS; Gibco BRL, Grand Island, NY, USA), negatiivinen kontrolli, käsitellään aktiivihiilellä (Sigma, St. Louis, MO, USA) yön yli 4 °C:ssa ja suodatetaan kaikkien pienten molekyylien ja AhR:n poistamiseksi. agonisteja, jotka saattoivat olla läsnä. TCDD, positiivinen kontrolli AhR-agonisteille, ostettiin Sigma Co:lta. Plasman BAIBA-tasot määritetään nestekromatografia-tandem-massaspektrometria (LC-MS/MS) -menetelmällä, kuten aiemmin on kuvattu (15). Solupohjainen AhR-ligandiaktiivisuusmääritys (CALA) ja ELISA-määritys suoritetaan (16)

HOMA-IR, HOMA-%B, HOMA-%S ja sijoitusindeksi lasketaan seuraavilla kaavoilla.

HOMA-IR1 = [paastoinsuliini (mU/l) × paastoglukoosi (mg/dl) × 0,0555]/22,5 HOMA-%B1 = [20 × paastoinsuliini (mU/l)]/[(paastoglukoosi (mg/dl) × 0,0555) -3,5] HOMA-%S1 = [1/ HOMA-IR1] × 100 % sijoitusindeksi 1 = (HOMA-%S1/100) × (HOMA-%B1/100)

Dual-Energy X-ray Absorptiometry (DEXA)

DEXA on laajalti käytetty vertailumenetelmä kehon FFM- ja FM-mittauksiin.(10) DEXA suoritettiin käyttämällä Lunar Prodigya (GE Medical Systems, Madison, WI). Koko kehon skannaukset tehtiin valmistajan ohjeiden mukaisesti ja kehon FM (FMDEXA), LTM (LTMDEXA) ja luun mineraalipitoisuus analysoitiin valmistajan ohjelmistolla. DEXA-menetelmässä käytetään suodattimella varustettua röntgenputkea, joka tuottaa matalaenergisiä (40 kV) ja korkeaenergisiä (70 tai 100 kV) fotoneja. Kun fotonit eri energiatasoilla kulkevat kudoksen läpi, niiden absorptio voidaan ilmaista vaimennussuhteena alemmilla tai korkeammilla energiatasoilla. DEXA-arvio FFM:stä laskettiin LTMandin luun mineraalipitoisuuden arvioiden summana. Kaikki potilaat tutki sama tarkkailija.

Biosähköinen impedanssispektroskopia

Koko kehon biosähköisen impedanssispektroskopian (BIS) mittaus kehonkoostumusmittarilla (BCM: Fresenius Medical Care, Bad Homburg, Saksa) suoritettiin jokaiselle tutkimukseen osallistuneelle henkilölle, joka oli suorittanut koulutuksen. BCM-tekniikan kurssi. BCM mittaa impedanssispektroskopiaa 50 eri taajuudella välillä 5 kHz - 1 MHz. Mittaukset tehtiin dialyysihoitoa edeltävänä päivänä potilaan ollessa rauhallinen, selällään ja rentoutunut dialyysivuoteella 10 minuuttia. Neljä elektrodia asetettiin potilaan käteen ja jalkaan valtimo-laskimofistelin vastakkaiselle puolelle. Laite saneli erityiset poissulkemiskriteerit, ja niihin sisältyi sydämentahdistimen, defibrillaattorin, metallisten ompeleiden tai stentin implantoinnin ja pääraajan amputoinnin historia. Monitaajuisena bioimpedanssilaitteena BCM ei ainoastaan ​​suorita solunulkoisia (ECWBCM), solunsisäisiä (ICWBCM) ja koko kehon vesimittauksia (TBWBCM), vaan se myös arvioi kehon koostumuksen vähärasvaisen kudosmassan (LTMBCM-pääasiassa lihasmassan), rasvamassan ( FATBCM), rasvakudosmassa (ATMBCM-pääasiassa rasva) ja ylihydraatio (OH) kehon koostumusmallin mukaan.(17) Tämä laite yhdisti BIS:n BCM-malliin, joka on kuvattu julkaisussa Chamney et al,11, ja se ottaa huomioon asiaankuuluvien kudosten erilaisen hydraation. Lyhyesti sanottuna laitetta muunnettiin heijastamaan patologisista syistä eli munuaisten vajaatoiminnasta kärsivien potilaiden ylimääräistä nestettä. Siksi se on asettanut vakiot jokaiselle kehon koostumusosastolle. Tämän laitteen on osoitettu olevan yhtä tarkka kuin kultastandardin vertailumenetelmät, ja se on validoitu vertailumenetelmiin verrattuna tilavuuden ja kehon koostumuksen arvioimiseen terveissä ja HD-populaatioissa, menetelmillä, joita käytetään usein 4-osastoisessa mallissa. LTMBCM:n, FATBCM:n ja ATMBCM:n prosenttiosuudet merkittiin vastaavasti pLTMBCM:ksi, pFATBCM:ksi ja pATMBCM:ksi.

Lihasvoima

Lihasten toiminta arvioidaan samana rekrytointipäivänä välittömästi ennen HD-istunnon aloittamista kädensijan voimakkuuden mittauksella kahvadynamometrillä. Testi suoritetaan kolme yritystä kummallakin kädellä ja vahvimman käden keskiarvolla määritetään lihasvoima