Resistência à insulina, sarcopenia e níveis plasmáticos de BAIBA

Desenho do estudo e população

Pacientes e métodos

Este estudo é um estudo de coorte observacional, transversal e prospectivo. Cento e cinquenta pacientes em hemodiálise não diabéticos serão incluídos para a pesquisa transversal; Vinte indivíduos saudáveis ​​serão eleitos como controles. Serão recrutados pacientes adultos em HD prevalentes com safras de diálise superiores a 3 meses. Os pacientes são mantidos com prescrição regular de HD, três vezes por semana, em sessões de quatro horas. Indivíduos com comorbidades significativas, como câncer, insuficiência cardíaca ou doença hepática grave e infecção crônica, como pé diabético, serão excluídos. Este estudo é conduzido de acordo com as diretrizes estabelecidas na Declaração de Helsinki, e todos os procedimentos foram revisados ​​e aprovados pelo Comitê de Ética Hospitalar Regional. Todos os indivíduos devem dar seu consentimento informado por escrito para participar do estudo. As características demográficas e clínicas dos participantes, incluindo idade, sexo, peso, altura, índice de massa corporal (IMC), tempo de diálise e Kt/V serão registradas, e comorbidades e terapias atuais serão coletadas.

Avaliação antropométrica e bioquímica

As pressões sanguíneas sistólica e diastólica são medidas com os sujeitos na posição supina. A medição de altura e peso foi realizada em todos os indivíduos. A circunferência da cintura foi medida no ponto médio entre a borda inferior da caixa torácica e o osso ilíaco. A concentração de insulina plasmática foi avaliada por radioimunoensaio. A glicose plasmática em jejum foi medida usando o método da glicose oxidase. A HbA1c foi medida por cromatografia de afinidade. Os níveis de colesterol total, triglicerídeos e colesterol HDL foram medidos enzimaticamente usando um autoanalisador (Hitachi 747; Hitachi, Tóquio, Japão). As concentrações séricas de insulina são determinadas por IRMA. As concentrações de adiponectina e leptina são medidas usando um kit ELISA disponível comercialmente.

Preparação de amostra

Em cada sujeito, as amostras de sangue são coletadas da fístula arteriovenosa de cada participante pela manhã após jejum de pelo menos 8 horas e no dia da hemodiálise. As amostras são devidamente processadas, refrigeradas a 2-8 C, e o plasma é separado imediatamente por centrifugação. Cada amostra de soro é inativada pelo calor por incubação a 65 C por 30 min. Soro bovino fetal (FBS; Gibco BRL, Grand Island, NY, EUA), um controle negativo, é tratado com carvão ativado (Sigma, St. Louis, MO, EUA) durante a noite a 4 C e filtrado para remover todas as moléculas pequenas e AhR agonistas que possam estar presentes. TCDD, um controle positivo para agonistas de AhR, foi adquirido da Sigma Co. Os níveis de BAIBA no plasma são avaliados por um método de cromatografia líquida-espectrometria de massa tandem (LC-MS/MS), conforme descrito anteriormente (15). O ensaio de atividade do ligante AhR baseado em células (CALA) e o ensaio ELISA serão realizados (16)

HOMA-IR, HOMA-%B, HOMA-%S e índice de disposição são calculados pelas seguintes fórmulas.

HOMA-IR1 = [insulina em jejum (mU/l) × glicose em jejum (mg/dl) × 0,0555]/22,5 HOMA-%B1 = [20 × insulina em jejum (mU/l)]/[(glicose em jejum (mg/dl) × 0,0555)-3,5] HOMA-%S1 = [1/ HOMA-IR1] × 100% Índice de disposição 1= (HOMA-%S1/100) × (HOMA-%B1/100)

Absorciometria de raios X de dupla energia (DEXA)

DEXA é um método de referência amplamente utilizado para medições de MLG e FM corporais.(10) A DEXA foi realizada usando um Lunar Prodigy (GE Medical Systems, Madison, WI). As varreduras de corpo inteiro foram realizadas de acordo com as instruções do fabricante, e o corpo FM (FMDEXA), LTM (LTMDEXA) e o conteúdo mineral ósseo foram analisados ​​usando o software do fabricante. O método DEXA usa um tubo de raios X com um filtro para gerar fótons de baixa energia (40 kV) e de alta energia (70 ou 100 kV). Quando os fótons em diferentes níveis de energia passam pelo tecido, suas absorções podem ser expressas como uma razão de atenuação em níveis de energia mais baixos ou mais altos. A estimativa DEXA da MLG foi calculada como uma soma das estimativas LTM e do conteúdo mineral ósseo. Todos os pacientes foram examinados pelo mesmo observador.

Espectroscopia de Impedância Bioelétrica

A medição de espectroscopia de impedância bioelétrica (BIS) de corpo inteiro usando um monitor de composição corporal (BCM: Fresenius Medical Care, Bad Homburg, Alemanha) foi realizada em cada um dos participantes inscritos no estudo por um membro específico da equipe que completou um treinamento curso na técnica BCM. O BCM mede a espectroscopia de impedância em 50 frequências diferentes entre 5 kHz e 1 MHz. As medições foram feitas no dia anterior à diálise com o paciente calmo, em decúbito dorsal e relaxado na cama de diálise por 10 minutos. Quatro eletrodos foram colocados na mão e no pé do paciente no lado oposto à fístula arteriovenosa. Critérios de exclusão específicos foram ditados pelo dispositivo e incluíram histórico de marca-passo, desfibrilador, suturas metálicas ou implantação de stent e amputação de um membro maior. Como um dispositivo de bioimpedância de multifrequência, o BCM não apenas fornece medições extracelulares (ECWBCM), intracelulares (ICWBCM) e água corporal total (TBWBCM), mas também estima a composição corporal em termos de massa de tecido magro (LTMBCM - principalmente músculo), massa gorda ( FATBCM), massa de tecido adiposo (ATMBCM-principalmente gordura) e hiperidratação (OH) de acordo com o modelo de composição corporal.(17) Este dispositivo combinou o BIS com o modelo BCM descrito em Chamney et al,11 e leva em consideração a hidratação dissimilar dos tecidos relevantes. Resumidamente, o dispositivo foi modificado para refletir a presença de excesso de líquido acumulado por motivos patológicos, ou seja, pacientes com insuficiência renal. Portanto, definiu constantes para cada um dos compartimentos da composição corporal. Este dispositivo demonstrou ser tão preciso quanto os métodos de referência padrão-ouro e foi validado em comparação com métodos de referência para avaliações de status de volume e composição corporal em populações saudáveis ​​e em HD, com métodos frequentemente usados ​​no modelo de 4 compartimentos. As proporções percentuais de LTMBCM, FATBCM e ATMBCM foram denotadas de acordo como pLTMBCM, pFATBCM e pATMBCM.

Força muscular

A função muscular será avaliada no mesmo dia do recrutamento imediatamente antes do início da sessão de HD por meio da mensuração da força de preensão manual, utilizando um dinamômetro de empunhadura. O teste é realizado realizando três tentativas com cada mão, e a média da mão mais forte é utilizada para determinar a força muscular