Insulinresistens, sarkopeni och plasma BAIBA-nivåer

Studiedesign och befolkning

Patienter och metoder

Denna studie är en observations-, tvärsnitts- och prospektiv kohortstudie. Etthundrafemtio patienter på icke-diabetiska hemodialyserade patienter kommer att inkluderas i tvärsnittsundersökningen; Tjugo friska försökspersoner kommer att väljas som kontroller. Vanliga vuxna HD-patienter med dialysår över 3 månader kommer att rekryteras. Patienterna får regelbundet HD-recept, tre gånger i veckan, under fyra timmar långa sessioner. Patienter med signifikanta komorbida tillstånd som cancer, hjärtsvikt eller allvarlig leversjukdom och kronisk infektion såsom diabetisk fot kommer att uteslutas. Denna studie genomförs enligt riktlinjerna i Helsingforsdeklarationen, och alla procedurer har granskats och godkänts av Regionsjukhusets etiska kommitté. Alla försökspersoner bör ge sitt skriftliga informerade samtycke till att delta i studien. Försökspersoners demografiska och kliniska egenskaper, inklusive ålder, kön, vikt, längd, kroppsmassaindex (BMI), dialysårgång och Kt/V kommer att registreras, och samsjukligheter och aktuella terapier kommer att samlas in.

Antropometriska och biokemiska bedömningar

Systoliskt och diastoliskt blodtryck tas med försökspersonerna i ryggläge. En mätning av längd och vikt utfördes på alla försökspersoner. Midjeomkretsen mättes vid mittpunkten mellan bröstkorgens nedre kant och höftbenet. Koncentrationen av plasmainsulin analyserades med radioimmunoanalys. Fastande plasmaglukos mättes med användning av glukosoxidasmetoden. HbA1c mättes med affinitetskromatografi. Totala kolesterol-, triglycerid- och HDL-kolesterolnivåer mättes enzymatiskt med användning av en autoanalysator (Hitachi 747; Hitachi, Tokyo, Japan). Seruminsulinkoncentrationer bestäms av IRMA. Adiponektin- och leptinkoncentrationer mäts med användning av ett kommersiellt tillgängligt ELISA-kit.

Provberedning

I varje försöksperson tas blodproverna från den arteriovenösa fisteln hos varje deltagare på morgonen efter att ha fastat i minst 8 timmar och på dagen för hemodialys. Proverna bearbetas korrekt, kyls vid 2-8 C och plasman separeras omedelbart genom centrifugering. Varje serumprov värmeinaktiveras genom inkubation vid 65 C under 30 min. Fetalt bovint serum (FBS; Gibco BRL, Grand Island, NY, USA), en negativ kontroll, behandlas med aktivt kol (Sigma, St. Louis, MO, USA) över natten vid 4 C och filtreras för att avlägsna alla små molekyler och AhR agonister som kan ha funnits. TCDD, en positiv kontroll för AhR-agonister, köptes från Sigma Co. Plasma BAIBA-nivåer bedöms med en vätskekromatografi-tandem masspektrometri (LC-MS/MS) metod, som tidigare beskrivits (15). Cellbaserad AhR-ligandaktivitetsanalys (CALA) och ELISA-analys kommer att utföras (16)

HOMA-IR, HOMA-%B, HOMA-%S och dispositionsindex beräknas med följande formler.

HOMA-IR1 = [fastande insulin (mU/l) × fasteglukos (mg/dl) × 0,0555]/22,5 HOMA-%B1 = [20 × fasteinsulin (mU/l)]/[(fastande glukos(mg/dl) × 0,0555)-3,5] HOMA-%S1 = [1/ HOMA-IR1] × 100% Dispositionsindex 1= (HOMA-%S1/100) × (HOMA-%B1/100)

Dual-Energy X-ray Absorptiometry (DEXA)

DEXA är en allmänt använd referensmetod för kropps-FFM- och FM-mätningar.(10) DEXA utfördes med användning av en Lunar Prodigy (GE Medical Systems, Madison, WI). Helkroppsskanningar utfördes enligt tillverkarens instruktioner, och kropps-FM (FMDEXA), LTM (LTMDEXA) och benmineralinnehåll analyserades med hjälp av tillverkarens programvara. DEXA-metoden använder ett röntgenrör med filter för att generera lågenergi- (40 kV) och högenergi- (70 eller 100 kV) fotoner. När fotoner på olika energinivåer passerar genom vävnad, kan deras absorptioner uttryckas som ett förhållande mellan dämpning vid lägre eller högre energinivåer. DEXA-uppskattning av FFM beräknades som en summa av LTM- och benmineralinnehållsuppskattningar. Alla patienter undersöktes av samma observatör.

Bioelektrisk impedansspektroskopi

Helkroppsbioelektrisk impedansspektroskopi (BIS) mätning med hjälp av en kroppssammansättningsmonitor (BCM: Fresenius Medical Care, Bad Homburg, Tyskland) utfördes på var och en av deltagarna som ingick i studien av en specifik medlem av personalen som hade genomgått en utbildning kurs i BCM-tekniken. BCM mäter impedansspektroskopin vid 50 olika frekvenser mellan 5 kHz och 1 MHz. Mätningar gjordes dagen före dialys med patienten lugn, liggande och avslappnad i dialyssängen i 10 minuter. Fyra elektroder placerades på patientens hand och fot på sidan kontra lateralt om deras arteriovenösa fistel. Specifika uteslutningskriterier dikterades av enheten och inkluderade historia av en pacemaker, defibrillator, metallsuturer eller stentimplantation och amputation av en större lem. Som en multifrekvens bioimpedansanordning ger BCM inte bara extracellulära (ECWBCM), intracellulära (ICWBCM) och total body water (TBWBCM) mätningar utan uppskattar också kroppssammansättningen i termer av mager vävnadsmassa (LTMBCM-huvudsakligen muskel), fettmassa ( FATBCM), fettvävnadsmassa (ATMBCM-huvudsakligen fett) och överhydrering (OH) enligt kroppssammansättningsmodellen.(17) Denna enhet kombinerade BIS med BCM-modellen som beskrivs i Chamney et al,11 och den tar hänsyn till olik hydrering av relevanta vävnader. Kortfattat modifierades anordningen för att återspegla närvaron av överskottsvätska som ackumulerats på grund av patologiska skäl, det vill säga patienter med njursvikt. Den har därför satt konstanter för varje kroppssammansättningsavdelning. Denna enhet har visat sig vara lika exakt som referensmetoderna i guldstandarden och har validerats mot referensmetoder för volymstatus och kroppssammansättningsbedömningar i friska och HD-populationer, med metoder som ofta används i 4-kompartmentmodellen. De procentuella proportionerna av LTMBCM, FATBCM och ATMBCM betecknades följaktligen som pLTMBCM, pFATBCM och pATMBCM.

Muskelstyrka

Muskelfunktionen kommer att bedömas samma dag som rekryteringen omedelbart före start av HD-sessionen genom handgreppsstyrkemätning med hjälp av en handtagsdynamometer. Testet utförs genom att utföra tre försök med varje hand, och medelvärdet av den starkaste handen används för att bestämma muskelstyrkan