Osmoottinen hauraus kolestaattista maksasairautta sairastavien lapsipotilaiden punasoluissa

Ensisijainen tavoite:

Ensisijainen tavoite on määrittää, onko punasolujen ektasytometria epänormaali yli vuoden ikäisten lapsipotilaiden populaatiossa, joilla on kolestaasi.

Toissijaiset tavoitteet:

Toissijaisena tavoitteena on selvittää, missä määrin poikkeavuudet bilirubiinitasoissa, sappihappotasoissa, E-vitamiinitasoissa tai kolesterolitasoissa kolestaattisilla potilailla liittyvät muutoksiin punasolujen ektasytometriassa tässä potilaspopulaatiossa.

Tausta Kolestaattinen maksasairaus on sateenvarjotermi heikentyneelle sapen virtaukselle, joka johtuu joko sappitiehyiden maksan ulkopuolisesta tukkeutumisesta tai viallisesta maksasolujen sappierityksestä. Kolestaasi on hyvin tunnettu dyslipidemian syy, ja se liittyy läheisesti epänormaaliin kolesteroli- ja fosfolipidiaineenvaihduntaan (3). Kolesterolin muuttuminen sappihapoiksi saattaa heikentyä ja apo-lipoproteiini B:n sitoutuminen kolesteroliin voi heikentyä, mikä johtaa lipoproteiini X:n muodostumiseen, joka sisältää apo-lipoproteiini C:tä (3). Kolestaattisten potilaiden dyslipidemian lopputulos on hyperkolesterolemia ja kohonnut kalvon kolesterolin ja fosfolipidien suhde (3).

Ruoansulatuskanavaan pääsyn puute voi johtaa seerumin kolesterolipitoisuuden nousuun ja punasolukalvon epänormaalin korkeisiin kolesteroli-fosfolipidisuhteisiin, mikä johtaa punasolukalvon rakenteellisen eheyden muuttumiseen (4,5). Tämän ilmiön testaamiseksi potilailla, joilla on ekstrahepaattinen sapen atresia, 20 lapsipotilasta testataan käyttämällä ektasytometriaa punasolujen muodonmuutoksen ja osmoottisen haurauden testaamiseksi.

Ektasytometria on diagnostinen työkalu, jota käytetään punasolujen muodonmuutosten mittaamiseen osmoottisella gradientilla (6). Tarkemmin sanottuna se mittaa leikkausjännityksen aiheuttamaa muodonmuutosta, kun taas punasolut ovat suspendoituneet osmoottiseen väliaineeseen (6,7). Se voi erottaa useita veren sairauksia, kuten perinnöllinen sferosytoosi, perinnöllinen elliptosytoosi, Kaakkois-Aasian ovalosytoosi ja pyropoikilosytoosi, joita on muuten vaikea diagnosoida (8). Se tekee tämän analysoimalla reologista käyttäytymistä jatkuvan leikkausjännityksen alaisena in vitro ja käyttämällä muodonmuutosten fotometristä analyysiä. Tämän jälkeen tämä kvantifioidaan ja antaa spesifisen ektasytometriakäyrän (kuva 1).

Ektasytometriakäyrällä on useita ainutlaatuisia ominaisuuksia riippuen analysoitavasta punasolusta. Käyrän Omin-osa edustaa osmolaliteettiarvoa, jossa 50 prosenttia punasoluista hajoaa. Elmax on venymäindeksin arvo, joka saavuttaa maksiminsa lähellä fysiologista osmolaliteettia (300 mOsm/kg). Ja lopuksi Ohyp, joka edustaa käyrän laskevaa osaa ja korreloi solunäytteen alkuperäisen solunsisäisen viskositeetin kanssa.

Tähän mennessä ektasytometriaa ei ole käytetty systemaattisesti mahdollisten punasolujen poikkeavuuksien karakterisoimiseksi kolestaattisilla potilailla. Analyysissämme kolestaattisten potilaiden ektasytometriaprofiileja verrataan historiallisten ei-kolestaattisten ikäsovitettujen kontrollien profiileihin. Haurausaste korreloi seerumin suorien bilirubiinitasojen, seerumin kolesterolitasojen ja E-vitamiinitasojen kanssa.

TUTKIMUKSEN SUUNNITTELU Tämä pilottitutkimus on yksi keskus, prospektiivinen poikkileikkaustutkimus punasolujen ektasytometriasta, jotka on otettu 20 kolestaattiselta lapsipotilaalta, joita seurattiin Cincinnatin lastensairaalassa. Potilaita seurataan säännöllisesti hepatologian klinikalla jatkuvaa seurantaa varten. Kaikkien näiden potilaiden vanhempia pyydetään osallistumaan tähän tutkimukseen. Tutkijat analysoivat myös samanaikaisesti ektasytometriaa 20 ikään sopivalta kontrollilta, jotka on värvätty yleisiltä GI-klinikoilta, joilla ei ole kolestaattista maksasairautta tai punasolukalvovaurioita.

KESTO Tutkimuksen valmistumisen arvioidaan kestävän noin 6-12 kuukautta. Tämä aikataulu sisältää 3–6 kuukautta potilaiden värväämiseen ja määritysten suorittamiseen sekä vielä 3–6 kuukautta tietojen analysointiin ja käsikirjoituksen täyttämiseen.