Осмотическая хрупкость эритроцитов у детей с холестатическим заболеванием печени

Основная цель:

Основная цель состоит в том, чтобы определить, является ли эктацитометрия эритроцитов ненормальной в популяции педиатрических пациентов старше одного года с холестазом.

Второстепенные цели:

Вторичная цель состоит в том, чтобы установить степень, в которой отклонения уровней билирубина, уровней желчных кислот, уровней витамина Е или уровней холестерина у пациентов с холестатическим заболеванием связаны с изменениями в эктацитометрии эритроцитов в этой популяции пациентов.

ПРЕДПОСЫЛКИ Холестатическая болезнь печени является общим термином для обозначения сниженного потока желчи либо из-за внепеченочной обструкции желчных протоков, либо из-за нарушения секреции желчи гепатоцитами. Холестаз является хорошо известной причиной дислипидемии и тесно связан с нарушением метаболизма холестерина и фосфолипидов (3). Превращение холестерина в желчные кислоты может быть нарушено, а связывание апо-липопротеина В с холестерином может быть нарушено, что приводит к образованию липопротеина X, который содержит апо-липопротеин С (3). Конечным результатом дислипидемии у пациентов с холестатическим синдромом является гиперхолестеринемия и повышенное отношение мембранного холестерина к фосфолипидам (3).

Недостаток желчи, поступающей в пищеварительный тракт, может привести к повышению уровня холестерина в сыворотке крови и аномально высокому соотношению холестерина и фосфолипидов мембран эритроцитов, что приводит к изменению структурной целостности мембран эритроцитов (4,5). Чтобы проверить это явление у пациентов с внепеченочной атрезией желчевыводящих путей, 20 детей будут протестированы с использованием эктацитометрии для проверки деформируемости и осмотической хрупкости эритроцитов.

Эктацитометрия — это диагностический инструмент, используемый для измерения деформируемости эритроцитов по осмотическому градиенту (6). В частности, он измеряет деформируемость из-за напряжения сдвига, когда эритроциты находятся во взвешенном состоянии в осмотической среде (6,7). Его можно дифференцировать между несколькими заболеваниями крови, такими как наследственный сфероцитоз, наследственный эллиптоцитоз, овалоцитоз в Юго-Восточной Азии и пиропойкилоцитоз, которые иначе трудно диагностировать (8). Это достигается путем анализа реологического поведения при постоянном напряжении сдвига in vitro и использования фотометрического анализа деформируемости. Затем это определяется количественно и дает конкретную кривую эктацитометрии (рис. 1).

Кривая эктацитометрии будет иметь несколько уникальных особенностей в зависимости от анализируемого эритроцита. Часть кривой Omin представляет значение осмоляльности, при котором лизируется 50 процентов эритроцитов. Elmax представляет собой значение индекса удлинения, которое достигает своего максимума вблизи физиологической осмоляльности (300 мОсм/кг). И, наконец, Ohyp, который представляет собой падающую часть кривой и коррелирует с начальной внутриклеточной вязкостью клеточного образца.

На сегодняшний день эктацитометрия не применялась систематически для характеристики потенциальных аномалий эритроцитов у пациентов с холестатическим синдромом. В нашем анализе профили эктацитометрии холестатических пациентов будут сравниваться с профилями контрольной группы того же возраста, не страдающей холестатическим заболеванием. Степень хрупкости будет коррелировать с уровнями прямого билирубина в сыворотке, уровнями холестерина в сыворотке и уровнями витамина Е.

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ Это пилотное исследование будет одноцентровым проспективным поперечным исследованием эктацитометрии эритроцитов, взятых у 20 холестатических педиатрических пациентов, наблюдаемых в детской больнице Цинциннати. Пациенты регулярно наблюдаются для дальнейшего наблюдения в гепатологической клинике. Родителей всех этих пациентов попросят принять участие в этом расследовании. Исследователи также одновременно проанализируют эктацитометрию 20 человек контрольной группы того же возраста, набранных из общих клиник желудочно-кишечного тракта, у которых нет ни холестатического заболевания печени, ни дефектов мембраны эритроцитов.

ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ Ожидается, что исследование займет примерно 6-12 месяцев. Этот график включает 3–6 месяцев для набора пациентов и проведения анализов и еще 3–6 месяцев для анализа данных и завершения рукописи.