Fragilidad osmótica en glóbulos rojos de pacientes pediátricos con enfermedad hepática colestásica

Objetivo principal:

El objetivo principal es determinar si la ektacitometría de glóbulos rojos es anormal en una población de pacientes pediátricos mayores de un año con colestasis.

Objetivos secundarios:

El objetivo secundario es determinar en qué medida las anomalías en los niveles de bilirrubina, ácidos biliares, vitamina E o colesterol en pacientes colestásicos están relacionadas con cambios en la ektacitometría de glóbulos rojos en esta población de pacientes.

ANTECEDENTES La enfermedad hepática colestática es un término genérico para la reducción del flujo de bilis debido a la obstrucción extrahepática de los conductos biliares oa la secreción biliar defectuosa de los hepatocitos. La colestasis es una causa bien reconocida de dislipidemia y está estrechamente asociada con el metabolismo anormal del colesterol y los fosfolípidos (3). La conversión del colesterol en ácidos biliares puede verse afectada y la unión de la apolipoproteína B al colesterol puede verse afectada, lo que da como resultado la formación de lipoproteína X que contiene apolipoproteína C (3). El resultado final de la dislipidemia en pacientes colestásicos es la hipercolesterolemia y un aumento de la relación entre el colesterol de membrana y los fosfolípidos (3).

La falta de bilis que ingresa al tracto digestivo puede conducir a un aumento del colesterol sérico y a una proporción anormalmente alta de colesterol en la membrana de los glóbulos rojos: fosfolípidos, lo que da como resultado una alteración de la integridad estructural de la membrana de los glóbulos rojos (4,5). Para evaluar este fenómeno en pacientes con atresia biliar extrahepática, 20 pacientes pediátricos serán evaluados mediante ektacitometría para evaluar la deformabilidad y la fragilidad osmótica de los glóbulos rojos.

La ektacitometría es una herramienta de diagnóstico utilizada para medir la deformabilidad de los glóbulos rojos en un gradiente osmótico (6). Más específicamente, mide la deformabilidad debido al esfuerzo cortante, mientras que los glóbulos rojos están suspendidos en un medio osmótico (6,7). Puede diferenciar entre varias enfermedades de la sangre, como la esferocitosis hereditaria, la eliptocitosis hereditaria, la ovalocitosis del sudeste asiático y la piropoiquilocitosis, que de otro modo son difíciles de diagnosticar (8). Lo hace analizando el comportamiento reológico bajo esfuerzo cortante constante in vitro y utilizando análisis fotométricos de deformabilidad. Luego se cuantifica y proporciona una curva de ektacitometría específica (Figura 1).

La curva de ektacitometría tendrá varias características únicas según el glóbulo rojo que se analice. La porción Omin de la curva representa el valor de la osmolaridad en el que se lisa el 50 por ciento de los glóbulos rojos. El Elmax es el valor del índice de elongación que alcanza su máximo cerca de la osmolalidad fisiológica (300 mOsm/Kg). Y, por último, el Ohyp, que representa la porción decreciente de la curva y se correlaciona con la viscosidad intracelular inicial de la muestra celular.

Hasta la fecha, la ektacitometría no se ha empleado sistemáticamente para caracterizar posibles anomalías de los glóbulos rojos en pacientes colestásicos. En nuestro análisis, los perfiles de ektacitometría de pacientes colestásicos se compararán con los de controles históricos no colestásicos de la misma edad. El grado de fragilidad se correlacionará con los niveles de bilirrubina directa en suero, los niveles de colesterol en suero y los niveles de vitamina E.

DISEÑO DEL ESTUDIO Este estudio piloto será una investigación transversal prospectiva de centro único sobre la ektacitometría de glóbulos rojos tomados de 20 pacientes pediátricos colestásicos seguidos en el Cincinnati Children's Hospital. Los pacientes son vistos regularmente para un seguimiento continuo en la clínica de hepatología. Se pedirá a los padres de todos estos pacientes que participen en esta investigación. Los investigadores también analizarán simultáneamente la ektacitometría de 20 controles emparejados por edad reclutados de las clínicas gastrointestinales generales sin enfermedad hepática colestásica ni defectos conocidos de la membrana de los glóbulos rojos.

DURACIÓN Se anticipa que el estudio tomará aproximadamente de 6 a 12 meses para completarse. Este cronograma incluye de 3 a 6 meses para reclutar pacientes y realizar los ensayos y otros 3 a 6 meses para analizar los datos y completar un manuscrito.