Fragilité osmotique dans les globules rouges des patients pédiatriques atteints d'une maladie hépatique cholestatique

Objectif principal :

L'objectif principal est de déterminer si l'ektacytométrie des globules rouges est anormale dans une population de patients pédiatriques de plus d'un an atteints de cholestase.

Objectifs secondaires :

L'objectif secondaire est de déterminer dans quelle mesure les anomalies des taux de bilirubine, d'acides biliaires, de vitamine E ou de cholestérol chez les patients cholestatiques sont liées aux modifications de l'ektacytométrie des globules rouges dans cette population de patients.

CONTEXTE L'hépatopathie cholestatique est un terme générique désignant un flux biliaire réduit dû à une obstruction extrahépatique des voies biliaires ou à une sécrétion biliaire défectueuse des hépatocytes. La cholestase est une cause bien connue de dyslipidémie et est étroitement associée à un métabolisme anormal du cholestérol et des phospholipides (3). La conversion du cholestérol en acides biliaires peut être altérée et la liaison de l'apo-lipoprotéine B au cholestérol peut être altérée, entraînant la formation de la lipoprotéine X qui contient l'apo-lipoprotéine C (3). Le résultat final de la dyslipidémie chez les patients cholestatiques est l'hypercholestérolémie et une augmentation du rapport cholestérol membranaire sur phospholipides (3).

L'absence de bile pénétrant dans le tube digestif peut entraîner une augmentation du cholestérol sérique et des rapports cholestérol/phospholipides de la membrane des globules rouges anormalement élevés, entraînant une altération de l'intégrité structurelle de la membrane des globules rouges (4,5). Pour tester ce phénomène chez les patients atteints d'atrésie biliaire extrahépatique, 20 patients pédiatriques seront testés par ektacytométrie pour tester la déformabilité et la fragilité osmotique des globules rouges.

L'ektacytométrie est un outil de diagnostic utilisé pour mesurer la déformabilité des globules rouges sur un gradient osmotique (6). Plus précisément, il mesure la déformabilité due à la contrainte de cisaillement, tandis que les globules rouges sont en suspension dans un milieu osmotique (6,7). Il peut différencier plusieurs maladies du sang telles que la sphérocytose héréditaire, l'elliptocytose héréditaire, l'ovalocytose d'Asie du Sud-Est et la pyropoïkilocytose qui sont autrement difficiles à diagnostiquer (8). Pour ce faire, il analyse le comportement rhéologique sous contrainte de cisaillement constante in vitro et utilise une analyse photométrique de la déformabilité. Ceci est ensuite quantifié et fournit une courbe d'ektacytométrie spécifique (Figure 1).

La courbe d'ektacytométrie aura plusieurs caractéristiques uniques en fonction du globule rouge analysé. La partie Omin de la courbe représente la valeur de l'osmolalité dans laquelle 50 % des globules rouges se lysent. L'Elmax est la valeur de l'indice d'allongement qui atteint son maximum près de l'osmolalité physiologique (300 mOsm/Kg). Et enfin l'Ohyp, qui représente la partie décroissante de la courbe et correspond à la viscosité intracellulaire initiale de l'échantillon cellulaire.

À ce jour, l'ektacytométrie n'a pas été utilisée systématiquement pour caractériser les anomalies potentielles des globules rouges chez les patients cholestatiques. Dans notre analyse, les profils d'ektacytométrie des patients cholestatiques seront comparés à ceux des témoins historiques non cholestatiques appariés selon l'âge. Le degré de fragilité sera corrélé aux taux sériques de bilirubine directe, aux taux sériques de cholestérol et aux taux de vitamine E.

CONCEPTION DE L'ÉTUDE Cette étude pilote sera une enquête transversale prospective à centre unique sur l'ektacytométrie des globules rouges prélevés chez 20 patients pédiatriques cholestatiques suivis à l'hôpital pour enfants de Cincinnati. Les patients sont vus régulièrement pour un suivi continu à la clinique d'hépatologie. Les parents de tous ces patients seront invités à participer à cette enquête. Les enquêteurs analyseront également simultanément l'ektacytométrie de 20 témoins appariés selon l'âge recrutés dans les cliniques GI générales sans maladie hépatique cholestatique ni anomalies connues de la membrane des globules rouges.

DURÉE L'étude devrait durer environ 6 à 12 mois. Ce calendrier comprend 3 à 6 mois pour recruter des patients et effectuer les tests et 3 à 6 mois supplémentaires pour analyser les données et terminer un manuscrit.