Immuunimikroympäristön dynaamisten muutosten ja mekanismien tutkiminen edistyneessä kolorektaalisyövässä, jota hoidetaan IBI363 -yhdistelmähoidolla

Immuunimikroympäristön dynaamisten muutosten ja mekanismien tutkiminen edistyneessä kolorektaalisyövässä, jota hoidetaan IBI363 -yhdistelmähoitotutkimusprotokollan versiossa: 1.0.0 Version päivämäärä: 2. joulukuuta 2024 I. Tutkimustaustan kolorektaalisyöpä (CRC) on viidenneksi yleisin pahanlaatuinen kasvain Kiinan väestössä. Nykyisessä kliinisessä käytännössä metastaattisten mikrosatelliitti-stabiilien (MSS)/taitavan epäsuhtakorjauksen (PMMR) CRC: n tavanomaiset ensimmäisen ja toisen linjan hoidot perustuvat monilääkeyhdistelmän kemoterapiaohjelmiin yhdistettynä kohdennettuihin terapioihin. Näihin hoitomuotoihin kuuluvat fluoropyrimidiinipohjainen kemoterapia (5-fluoriurasiili [5-FU], leukovoriini tai kapesitabiini) yhdistelmänä oksaliplatiinin tai irinotekaanin kanssa tai ilman kohdennettuja monoklonaalisia vasta-aineita. Toisen linjan hoidon jälkeen taudin etenemisen jälkeen Kiinan hyväksyttyihin hoitomenetelmiin kuuluvat regorafenibi, fruquintinibi ja TAS-102; Niiden kliiniset edut ovat kuitenkin epätyydyttäviä, objektiivisilla vasteprosenteilla (ORR) on 1-4%, etenemisvapaa eloonjääminen (PFS) 2-3 kuukauden ajan ja 6-9 kuukauden kuluessa 6-9 kuukauden yleinen eloonjääminen (OS). Immunoterapia on tällä hetkellä hyväksytty vain metastaattiselle CRC: lle, jolla on mikrosatelliitin epävakauden korkeus (MSI-H) tai puutteellisella epäsuhtakorjaustilalla (DMMR). Yhteenvetona voidaan todeta, että edistyneen CRC: n hoidon teho on edelleen rajoitettua, mikä korostaa uusien lääkkeiden ja terapeuttisten strategioiden kiireellistä tarvetta potilaan tulosten parantamiseksi.

IBI363 on rekombinantti bispesifinen molekyyli, joka koostuu anti-ohjelmoidusta kuoleman reseptorista 1 (PD-1) -vasta-aineesta, joka on sulatettu interleukiini-2: lla (IL-2), jota annetaan injektoitavana formulaationa. Se estää PD-1/PD-L1-reitin aktivoimalla IL-2-signalointireitin, kääntäen siten T-solujen uupumuksen ja edistäen T/NK-solujen aktivaatiota. 31. heinäkuuta 2023 alkaen CIBI363A102 -tutkimukseen osallistui yhteensä 169 osallistujaa, mukaan lukien 22 osallistujaa osassa A (nopeutettu titraus ja boin -vaihe) ja 147 osassa B (annoksen laajennusvaihe). Tehokkuuden suhteen annos-eskalaatiovaiheessa 21 osallistujaa oli arvioitavissa tehokkuuden suhteen, kun kolme osallistujaa oli 100-300 μg/kg QW-annosryhmä saavuttaen parasta tuumorivastetta osittaisessa vasteessa (PR). Annoksen laajennusvaiheessa 76 osallistujaa oli arvioitavissa tehokkuuden suhteen. Kuusi osallistujaa oli 100-1000 μg/kg QW-annosryhmässä, joka saavutti PR: n.

On vakiintunutta, että immuunijärjestelmä voi eliminoida kasvainsolut syöpä-immunisuusjakson kautta. Tätä prosessia ei kuitenkaan ylläpidetä, koska kasvaimet voivat vähitellen muokata kasvaimen immuunijärjestelmää (aikaa) immunosuppressiiviseen tilaan isäntä immuniteetin torjumiseksi. Tasapaino kasvaimen ja kasvaimen vastaisten tulehduksellisten välittäjien välillä voi määrittää kasvaimen etenemisen (kuva 1). Anti-kasvaimen immuunisolut sisältävät ensisijaisesti efektorit-T-solut (kuten sytotoksiset CD8+ T-solut ja efektorisolut CD4+ T-solut), luonnolliset tappaja (NK), dendriittisolut (DCS) ja M1-polarisoidut makrofagit. Pro-tuumorin immuunisolut koostuvat pääasiassa säätelevistä T-soluista (TREG), myeloidista peräisin olevasta suppressorisoluista (MDSC), tuumorista liittyvät makrofagit (TAM), M2-polarisoidut makrofagit, N2-polarisoidut neutrofiilit ja tyypin 2 luontaiset lymfoidisolut (ILC2: t). Kasvaimet ovat kehittäneet erilaisia ​​mekanismeja immuunijärjestelmän välttämiseksi, kuten viallinen antigeenin esitys, negatiivisten immuunisäätelyreittien ylös säätely ja tuumoripro-immuunisolujen rekrytointi. Seurauksena on, että kasvaimen vastaisten immuunisolujen toiminta on tukahdutettu, ja kasvaimenvastaista immuunivastetta on vaikea ylläpitää. Immunoterapian tavoitteena on palauttaa kasvaimen vastaisten immuunisolujen, erityisesti sytotoksisten T-lymfosyyttien (CTL) sytotoksinen toiminta kasvaimia vastaan. Siksi erilaisten immuunikomponenttien toiminnan ja mekanismien tutkiminen ajan kuluessa auttaa parantamaan immunoterapian vasteastetta ja helpottamaan uusien immunoterapeuttisten strategioiden kehittämistä.

Kuva 1.Tumoriin liittyvät immuunisolut tuumorimikroympäristössä OMICS-tekniikoiden, kuten multipleksisten immunohistokemian (MIHC), yksisoluisten transkripto-sekvensointi (SCRNA-Seq) ja spatiaalisten transkriptoomin sekvensointin (StrNA-Seq) ja spesifisten solujen subpopulaatioiden (StrNA-Seq) nopea kehitys ja iterointi.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on ilmoittautua potilaille, joilla on edistyksellinen MSS/PMMR-kolorektaalisyöpä (CRC), ja suorittaa yksisoluinen transkriptomesekvensointi lähtötilanteessa ja seurantakudoksenäytteissä. Tavoitteena on kartoittaa dynaamisesti tuumorin immuunimikroympäristön (ajan) alueellisen heterogeenisyys ja evoluutiomaisema koko taudin kurssin aikana alkuperäisestä diagnoosista sairauden etenemiseen. Analysoimalla aikaa eri ajankohtina pyrimme selvittämään IBI363: n mahdolliset vaikutusmekanismit kolorektaalisyövässä. Lisäksi hyödyntämme spatiotemporaalisia transkriptisia analyysejä solujen alaryhmien vuorovaikutusten validoimiseksi in situ tuumorin mikroympäristössä.

II. Tutkimustavoitteet Tämän tutkimuksen tavoitteena on kerätä ja integroida kliinisen tutkimuksen tiedot potilailta, joille tehdään kasvaimen immunoterapia ja suorittaa perusteelliset tiedon louhinta kasvaimen immuunijärjestelmän (TIME) alueellisen heterogeenisyyden ja evoluutiomaiseman kartoittamiseksi dynaamisesti taudin etenemisen kolorektaalisyövän (CRC) potilailla.

Ajan näkökulmasta tutkimme IBI363: n potentiaalisia vaikutusmekanismeja yhdistelmähoidossa verrattuna CRC: n kontrollihoitoihin. Lisäksi analysoimalla resistenssi- ja immuunijärjestelmän kiertämismekanismeja tämän tutkimuksen tarkoituksena on tarjota mekaaninen perusta tarkkuusdiagnoosille, hoidon optimoinnille ja tulevalle terapeuttiselle päätöksenteolle CRC-potilaille.

III. Tutkimussisältö

1. Kartoitus tuumorin immuunimikroympäristö (aika) potilailla, joilla on edennyt MSS/PMMR CRC, tämä tutkimus aikoo ottaa 50 potilasta, joilla on edistyksellinen mikrosatelliittisyövä/taitava epäsuhtakorjaus (MSS/PMMR) kolorektaalisyöpä (CRC), jotka saavat yhdistelmähoitoa immunoterapeuttisella aineella IBI363 ja Bevakizumab Plus -kemoterapialla. Kasvainkudokset kerätään eri ajankohtina hoidon aikana (lähtötaso ja jokaisen kahden hoitosyklin jälkeen tehokkuuden arviointia varten) kudoksen biopsian kautta (mukaan lukien ydinneulabiopsia tai endoskooppiset pihdien biopsia).

   Osa kerätyistä kudosnäytteistä tehdään 10 x genomiikka 3 'yksisoluisen RNA-sekvensointi (SCRNA-Seq), kun taas toinen osa on parafiinia upotettua myöhempää multipleksin immunohistokemiaa varten (MIHC)/immunofluoresenssianalyysiä (IF). Soluklusterointianalyysi suoritetaan käyttämällä CellRanger- tai Seurat-ohjelmistoa, joka perustuu geeniekspressioprofiileihin T-SNE: n ja UMAP-ulottuvuuden vähentämismenetelmien avulla. Kasvain- ja immuunisolujen populaatiot-mukaan lukien T-solut, B-solut, luonnolliset tappaja (NK) -solut, monosyytit, makrofagit, dendriittisolut (DC) ja stroomasolut, kuten fibroblastit, endoteelisolut ja mesotheliaaliset solut, ovat tunnistettuja perusgenerien perusteella, rakentamalla kattava aika-maisema.

2. IBI363-tehokkuuden ennustavien biomarkkereiden tunnistaminen vertaamalla vastaajien ja vastaajien aikaeroja 50 ilmoittautuneen CRC-potilaan keskuudessa noin 30 saa IBI363-yhdistelmähoitoa, kun taas 20 suoritetaan hallintahoito. Seurantatietojen perusteella potilaat jaotellaan vastaaja- (CR+PR) ja vastaajien (SD+PD) -ryhmiin. Vertaamalla lähtötilanteen klusterointituloksia ja markkerigeeniekspressioprofiileja kahden ryhmän välillä, pyrimme tunnistamaan solujen alaryhmät, rikastetut signalointireitit tai geeniekspressio -allekirjoitukset, jotka liittyvät merkittävästi terapeuttiseen tehokkuuteen ja potilaan hyötyyn.

   Spatiaalista transkriptiikkaa käytetään kartoittamaan avainsolujen alaryhmien ja geeniekspressiokuvioiden väliset alueelliset suhteet, mikä mahdollistaa hoitovasteeseen liittyvien merkityksellisimpien ennustavien biomarkkereiden tunnistamisen.

3. Tutkimalla IBI363: n vaikutusta ajassa ja sen mahdollisella vaikutusmekanismilla suorittamalla yksisoluisia sekvensointia kasvainkudoksiin lähtötilanteessa ja hoidon jälkeisessä (sykli 2) kaikilla potilailla, suoritamme pseudotime-suuntausanalyysin solujen populaatioiden erilaistumisdynamiikan tutkimiseksi. RNA: n eheyspohjaisia ​​analyysejä käytetään päättelemään solujen kehitysratkoja, kun taas reseptori-ligandin vuorovaikutusanalyysit tarjoavat näkemyksiä solujen välisiin viestintäverkoihin.

Tämä kattava lähestymistapa antaa meille mahdollisuuden karakterisoida systemaattisesti erilaisten käsittelyohjelmien uusintavaikutuksia kasvainsoluihin ja immunosuppressiivisiin solupopulaatioihin kasvaimen mikroympäristössä, mukaan lukien intrutumoraaliset Treg-solut, kasvaimiin liittyvät makrofagit (TAM), myeloidista johdetut suppressorisolut (MDSC) ja M2-makrofaasit. Viime kädessä tämän tutkimuksen tavoitteena on paljastaa eri solujen alatyyppien mahdolliset kliiniset vaikutukset CRC: n immunoterapiassa.

IV.Tekninen reitti

V. Osallistumiskriteerit ja poissulkemiskriteerit tutkimuksen osallistujille

Sisällyttämiskriteerit:

1. Osallistujan on allekirjoitettava kirjallinen tietoinen suostumuslomake (ICF) ja kyettävä noudattamaan protokollapohjaista vierailuaikataulua ja niihin liittyviä menettelytapoja.
2. Ikä ≥18 vuotta ja ≤75 vuotta, ilman sukupuolen rajoituksia.
3. Histologisesti tai sytologisesti vahvistettu edistyneiden pahanlaatuisten kasvainten diagnoosi, joka täyttää seuraavat kohoristispesifiset kriteerit:

Kohortti 2:

• Potilaat, joilla on histopatologisesti vahvistettu edistynyt kolorektaalisyöpä (CRC).
• Paikallisesti vahvistettu epäsuhtakorjausprofiiliksi (PMMR)/mikrosatelliitin epävakauden alhaiseksi (MSI-L) tai mikrosatelliittiselle stabiilille (MSS) standarditestauksen perusteella.

Kohortti 9:

• Potilaat, joilla on histopatologisesti vahvistettu edistynyt kolorektaalisyöpä (CRC).
• Paikallisesti vahvistettu epäsuhtakorjausprofiiliksi (PMMR)/mikrosatelliitin epävakauden alhaiseksi (MSI-L) tai mikrosatelliittia stabiili (MSS) (tarvittaessa testaustulokset ovat saatavilla).
• Perusviivan kuvantamisen on ilmoitettava aktiivisten maksan etäpesäkkeiden puuttuminen. Huomaa: Potilaat, joilla on aikaisemmin hoidetut maksan etäpesäkkeet (mukaan lukien kirurginen resektio, mikroaaltouuni tai radiotaajuinen ablaatio tai stereotaktinen sädehoito, mutta transarterisen kemoembolisointi) ovat kelpoisia, jos he saavat lopullisen hoidon vähintään 6 kuukautta ennen tutkimuksen ilmoittautumista ja myöhempi kuvaus vahvistaa maksan metastaasien poissaolon.

Syrjäytymiskriteerit

1. Raskaana tai imettäviä naisia ​​tai naisia, jotka suunnittelevat raskaaksi ennen kuin tutkimuslääke, sen aikana tai 6 kuukauden kuluessa.

2. Aktiiviset tai käsittelemättömät keskushermosto (CNS) etäpesäkkeet, jotka vahvistetaan kuvantamisella seulonnan tai aiempien arviointien aikana (esim. Aivot tai leptomeningeaaliset etäpesäkkeet).

   • Potilaat, joilla on oireettomia aivojen etäpesäkkeitä, voivat osallistua.
   • Potilaat, jotka ovat saaneet aivojen etäpesäkkeitä ja olleet oireettisesti vakaaja ≥2 viikkoa ilman todisteita uusista tai laajentuvista vaurioista, voivat myös olla kelvollisia, mikäli he täyttävät kaikki seuraavat:
   • Mitattavissa olevan ekstrakraniaalisen sairauden esiintyminen.
   • Ei metastaaseja meningeissä, keskiaivoissa, poneissa, medulla tai selkäytimessä eikä useita aivojen etäpesäkkeitä.
   • Aivojen vesijohdon, kolmannen tai neljännen kammion tai selkäytimen puristusta.
   • Steroidihoidon lopettaminen vähintään 14 päivää ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen annosta.
3. Aktiivinen tromboosi, syvän laskimotromboosi (DVT) tai keuhkoembolia 4 viikon kuluessa ennen tutkimuslääkkeen ensimmäistä antamista, ellei tutkija huolehtii riittävästi ja sitä pidetään vakaina.

4. Kliinisesti merkittävät sydän- ja verisuoni- tai aivo -verisuonisairaudet, mukaan lukien, mutta rajoittumatta,:

   • Kammion rytmihäiriöt tai muut hallitsemattomat sydämen rytmihäiriöt, jotka vaativat lääketieteellistä interventiota (esim. Rytmihäiriöiden torjunta).
   • Vakavat johtamishäiriöt (esim. Kolmannen asteen atrioventrikulaarinen lohko).
   • QTC -aika (korjattu Friderician kaavalla) ≥480 ms.
   • Hallitsemattomat valtimoverenpainetaudit huolimatta tavanomaisesta hoidosta (systolinen BP ≥160 mmHg tai diastolinen BP ≥100 mmHg).
   • Sydänlihatulehduksen historia.
   • Kongestiivinen sydämen vajaatoiminta, joka vaatii jatkuvaa hoitoa.
   • Vasemman kammion ejektiofraktio (LVEF) <50%.
   • New York Heart Association (NYHA) -luokan III tai IV sydän- ja verisuonisairaus.
   • Akuutti sepelvaltimo -oireyhtymä (esim. Sydäninfarkti, epävakaa angina), sepelvaltimoiden angioplastia tai stentin sijoittaminen 6 kuukauden kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
   • Aivohalvaus tai ohimenevä iskeeminen hyökkäys 6 kuukauden kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
   • Tunnetut aktiiviset kohtaukset.
5. Interstitiaalinen keuhkosairaus (ILD), keuhkofibroosi, pneumkonioosi, lääkkeen aiheuttama keuhkokuume, säteilypneumoniitti, joka vaatii steroidihoitoa tai vaikeaa keuhkojen toimintahäiriötä/rajoittava keuhkosairaus.
6. Allergisen diateesin, astman tai atooppisen ihottuman historia.
7. Toistuvat tai oireelliset keuhkopussin, sydämen tai vatsakalvon effuusiot, jotka vaativat toistuvaa viemäriä.
8. Aktiiviset autoimmuunisairaudet, jotka vaativat systeemistä terapiaa 2 vuoden kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista (lukuun ottamatta korvaavia hoitoja, kuten kilpirauhashormoni, insuliini tai kortikosteroidit lisämunuaisen tai aivolisäkkeen vajaatoimintaan).
9. Allogeenisen elinsiirron tai allogeenisen hematopoieettisen kantasolujen siirron historia.
10. Tunnettu tai epäilty yliherkkyys tutkimuslääkkeelle tai mahdollisille apuaineille.
11. Merkittävän immuunijärjestelmän estäjiin liittyvän myrkyllisyyden historia, joka vaatii pysyvää lopettamista.

12. Ratkaisematon luokka> 1 toksisuus aikaisemmista kasvaimenvastaisista hoidoista, paitsi:

    • Pysyvä luokan 2 hiustenlähtö, perifeerinen neuropatia tai hypomagnesemia.
    • Vakaa, kontrolloitu toksisuus (esim. Kilpirauhasen vajaatoiminta, jota hoidetaan hormonikorvauksella tai verenpainetaudulla, jota hallitaan <160/100 mmHg: iin verenpainelääkellä).
13. Epätäydellinen toipuminen leikkauksesta tai suuresta leikkauksesta 4 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
14. Aktiiviset, hallitsemattomat verenvuoto- tai tunnetut verenvuotohäiriöt.

15. Merkittävät maha -suolikanavan sairaudet 6 kuukauden kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista, mukaan lukien, mutta rajoittumatta:

    • Tulehduksellisen suolistosairauden (IBD) historia.
    • ≥Rade 2 ripulia 2 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
    • Säteily -enteriitti.
16. Kasvaimeen liittyvä tuumoriin liittyvä kipu tai oireenmukainen hyperkalsemia.

17. Tunnettu HIV -infektio, aktiivinen hepatiitti B (HBV), hepatiitti C (HCV) tai aktiivinen tuberkuloosi:

    • HBV-positiivisten potilaiden on suoritettava HBV-DNA-testaus. Potilaat ovat kelvollisia, jos HBV -DNA on ≤2,5 × 10³ kopiota/ml tai ≤500 IU/ml.
    • HBsAG-positiivisten potilaiden on saatava viruslääkettä tutkimuksen aikana uudelleenaktivoinnin estämiseksi.
    • Potilaita, joilla on HBCAB (+), HBsAg (-), HBS (-) ja HBV-DNA (-), eivät vaadi viruslääketiedettä, mutta on tarkkailtava tarkkaan uudelleenaktivointia varten.
    • HCV-seropositiiviset potilaat, joilla on negatiivinen tai huomaamaton HCV-RNA, ovat tukikelpoisia.
    • Potilaat, jotka ovat suorittaneet HCV -hoidon ja saavuttaneet havaitsemattoman viruskuorman, ovat tukikelpoisia.
18. Vakavat/hallitsemattomat infektiot, jotka vaativat IV -antibiootteja 2 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista tai selittämätöntä kuumetta (> 38 ° C).
19. Toisen pahanlaatuisuuden diagnoosi viimeisen viiden vuoden aikana, lukuun ottamatta parantuneita perus-/okasolusyöpä, karsinooma in situ, paikallinen eturauhassyöpä tai papillaarinen kilpirauhasen karsinooma.

20. Kiellettyjä lääkkeitä ja hoitoja, mukaan lukien, mutta rajoittumatta:

    • IL-2/IL-15-sytokiinit (lukuun ottamatta niiden käyttöä adoptiosolihoidossa tai immuunimoduloinnissa immuunipuutteisilla potilailla).
    • Kemoterapia tai pienimolekyylinen kohdennettu terapia 2 viikon (tai 5 puoliintumisajan) sisällä ennen ensimmäisen tutkimuksen lääkkeen antamista, ellei viivästynyttä toksisuutta odoteta. Poikkeukset:
    • Nitrosoureas ja mitomysiini C vaativat 6 viikon pesujakson.
    • Vasta-ainepohjaiset terapiat 4 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
    • Osallistuminen toiseen interventiotutkimukseen 2 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
    • Palliatiivinen sädehoito 2 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
    • Elävät rokotteet 4 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
    • Immunosuppressiivinen terapia tai systeemiset kortikosteroidit (> 10 mg/päivä prednisoniekvivalentti) 2 viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.
    • Perinteinen kiinalainen lääketiede, jolla on tunnettuja kasvaimenvastaisia ​​vaikutuksia viikon kuluessa ennen ensimmäistä tutkimuslääkkeen antamista.

21. Yhdistelmähoitojen vasta -aiheet, mukaan lukien, mutta niihin rajoittumatta,:

    • UGT1A1*6/*6, UGT1A1*28/*28 tai UGT1A1*6/*28 genotyyppiä, jotka voivat vaikuttaa irinotekaanin aineenvaihduntaan.
    • Aikaisempi laaja vatsa-/lantion sädehoito tutkijan arvioimana, mikä voi vaikuttaa luuytimen tai maha -suolikanavan toimintaan.
22. Mikä tahansa tila, hoito tai laboratorion poikkeavuus, joka tutkijan arvioinnissa voi vaarantaa potilasturvallisuuden, häiritä tietoista suostumusta, vaikuttaa vaatimustenmukaisuuteen tai iskututkimuksen lääkkeiden arviointiin.
23. Vakavat psykiatriset häiriöt, kognitiivinen heikentyminen tai päihteiden väärinkäyttö, joka voi häiritä suostumusprosessia tai tutkimuksen noudattamista.
24. Kaikki muut tunnettuja tai ennakoituja tekijöitä, jotka tutkijan mielestä potilaasta tekisivät tutkimusta sopimattoman.

Erityisten kohorttien syrjäytymiskriteerit

Kohortti 2:

1. Oireet tai verenvuoto-, perforoinnin tai tukkeutumisen riski primaarisessa kolorektaalisessa kasvainkohdassa.
2. Merkittävän toksisuuden historia, joka vaatii bevasitsumabin, oksaliplatiinin, kapesitabiinin tai 5-fu: n pysyvän lopettamisen.
3. Tunnetut allergia lääkkeiden tai apuaineiden tutkimukselle.

Kohortti 9:

1. Merkittävän myrkyllisyyden historia, joka vaatii bevatsitsumabin, fruquintinibin tai trifluridiinin/tipiraksiilin tai vasta -aiheita tutkivan lääkkeiden pysyvää lopettamista, tutkijan arvioimiseksi.
2. Tunnetut allergia lääkkeiden tai apuaineiden tutkimukselle.

Vi. Yleisten haittatapahtumien hallintasuunnitelma

I. Yleisimmät haittavaikutukset tässä tutkimuksessa ovat kudoksen biopsiaan liittyviä. Tärkeimmät hallinnan periaatteet ja menetelmät ovat seuraavat:

1. Verenvuoto Syy: Biopsia aiheutti verisuonten vaurioita (etenkin kasvaimissa, joilla on epänormaali hyytyminen tai rikas verisuonitarjonta).

   Oireet: verenvuoto tai hematooma puhkaisussa; Oksenteluveri, mustat uloste (maha -suolikanavan verenvuoto) endoskooppisen biopsian jälkeen; Merkittävä verenvuoto voi johtaa hypotensioon, takykardiaan ja shokin merkkeihin.

   Hallintatoimenpiteet:

   • Paikallinen paine: Aseta paine 10-15 minuutiksi pinnallisen verenvuodon suhteen; Endoskooppista verenvuotoa voidaan hallita suihkuttamalla hemostaattisia aineita (esim. Epinefriiniliuos) tai sähkökuopalla.
   • Farmakologinen hemostaasi: hemostaattisten lääkkeiden laskimonsisäinen antaminen (esim. Traneksaamihappo, K -vitamiini).
   • Interventio-/kirurginen: Vakava verenvuoto voi vaatia verisuonten embolisointia tai kirurgista hemostaasia.
   • Seuranta: Seuraa elintärkeitä merkkejä, hemoglobiinitasoja ja verensiirtoa tarvittaessa verta.

   Ennaltaehkäisy:

   • Preoperatiivinen hyytymisarvio (INR, verihiutaleet) ja poikkeavuuksien korjaus.
   • Vältä biopsiaa alueilla, joilla on korkea verisuonitarvike (kuvantamisen perusteella).
   • Verenpaine verenpainepotilailla ennen jatkamista.

2. Infektio Syy: Kontaminaatio potilaan menettelyn aikana tai vaarantunut immuunitila.

   Oireet: punoitus, turvotus ja mätämuodostus puhkaisukohdassa; Kuume, vilunväristykset, lisääntynyt valkosolujen määrä; Syvät infektiot (esim. Maksan paise, keuhkokuume).

   Hallintatoimenpiteet:

   • Antibiootit: laajapektriset antibiootit (esim. Kolmannen sukupolven kefalosporiinit), jotka on räätälöity infektiokohtaan ja patogeeneihin, laskimonsisäinen antaminen vakaville infektioille.
   • Viemäröinti: Viemäröinti puhkaisemalla tai leikkauksella, jos paise muodostuu.
   • Tukikäsittely: Nesteen korvaaminen, antidyretics jne.

   Ennaltaehkäisy:

   • Tiukka aseptinen tekniikka, endoskooppisten instrumenttien oikea desinfiointi.
   • Ennaltaehkäisevä antibiootti korkean riskin potilaille (esim. Diabetes, immunosuppressoitu).
   • Leikkauksen jälkeinen hoito puhkaisukohdan pitämiseksi puhtaana ja kuivana.

3. Kipu aiheuttaa: Kudosvauriot tai hermojen stimulaatio. Oireet: pysyvä paikallinen kipu, mahdollisesti säteilevät ympäröiville alueille; viitattu kipu viskeraalisen biopsian jälkeen (esim. Oikea olkakipu maksan biopsian jälkeen) .-

   Hallintatoimenpiteet:

   • Lievä kipu: Paikallinen kylmä kompressori, lepää ja suun kautta annetut tulehduskipulääkkeet (esim. Ibuprofeeni).
   • Vakava kipu: Verenvuodon tai elinvaurion sulkemisen jälkeen heikkoa opioideja (esim. Tramadoli) voidaan käyttää lyhytaikaisesti.
   • Hermoslohko: Pysyvä kipu voi vaatia interventiohoitoa.

   Ennaltaehkäisy:

   • Lempeä tekniikka toistuvien puhkaisujen välttämiseksi.
   • Riittävä paikallispuudutus (esim. Lidokaiinin tunkeutuminen).

4. Elinvamma

   Korkean riskin sivustot:

   • Keuhkojen biopsia → Pneumothorax, hemopneumothorax.
   • Maksan biopsia → sappivuoto, sappiverenvuoto.
   • Endoskooppinen suoliston biopsia → perforointi.

   Oireet:

   • Pneumothorax: Äkillinen rintakipu, hengenahdistus, vähentynyt hengitysäänet kärsivällisellä puolella.
   • Rei'itys: Vakava vatsakipu, vatsakalvon ärsytys, vapaata ilmaa kalvon alla (kuvantamisessa).

   Hallintatoimenpiteet:

   • Pneumotorax: pieni (keuhkojen puristus <20%) → havainto, happiterapia; Kohtalainen tai iso → suljettu rintakyljetys.
   • Rei'itys: NPO, maha -suolikanavan dekompressio, laskimonsisäiset antibiootit; Endoskooppinen leikkaus tai hätäleikkaus.
   • Sappivuoto: interventiokyvyn tai kirurgisen hoidon.

   Ennaltaehkäisy:

   • Kuvanohjattu lähestymistapa kriittisten rakenteiden välttämiseksi.
   • Kontrolli puhkaisun syvyys (esim. Keuhkojen biopsialle, insertti uloshengityksen lopussa).

5. Allergiset reaktiot laukaisevat: paikallispuudutus, desinfiointiaineet (esim. Jodi -tinktuuri), lateksi (esim. Käsineet).

   Oireet: ihon punoitus, kutina; Kurkunpään turvotus, bronkospasmi, anafylaktinen shokki.

   Hallintatoimenpiteet:

   - Lopeta loukkaava edustaja, varmista hengitysteiden patenssi.

   • Antiallerginen hoito:
   • Epinefriini (vaikea reaktio): 0,3-0,5 mg Im.
   • Kortikosteroidit (esim. Deksametasoni 10 mg IV).
   • Antihistamiinit (esim. Difenhydramiini 20 mg IM).
   • Shokinhallinta: Nesteen elvyttäminen, vasopressorit, CPR tarvittaessa.

   Ennaltaehkäisy:

   • Yksityiskohtainen allergiahistoria ennen leikkausta.
   • Hätälääkkeiden saatavuus (esim. Epinefriini, happi).

6. Vagaali hermorefleksi Yleinen: endoskooppinen biopsia tai reunusta stimuloiva emättimen hermoa. Oireet: Pallor, hikoilu, bradykardia, hypotensio.

   Hallinta:

   • Pysäytä toimenpide, aseta potilas makuulla.
   • Atropiini 0,5 mg IV (syke <50 bpm).
   • Nopea nesteen elvytys, tarvittaessa vasopressorit.

   Ennaltaehkäisy:

   - Lellätty tekniikka, vältä liiallista pitoa.

7. Kasvaimen siemennys (harvinainen) riski: Kasvainsolujen leviäminen biopsian neulan radalla tai endoskooppisella biopsiapolulla.

Hallinta:

• Paikallinen sädehoito tai kirurginen resektio.
• Tarkkaile metastaattisia merkkejä (esim. Imaging-seurannan kautta).

Ennaltaehkäisy:

• Valitse lyhin biopsiapolku.
• Suorita biopsiaradan (esim. Radiofrequency-ablaatio) deaktivointi.

II. Haittavaikutusprosessi

1. Välitön arvio: Seuraa elintärkeitä merkkejä ja tunnista haittavaikutuksen tyyppi.

2. Vakauttaa kunto:

   • Verenvuoto → Aseta paine, nesteen elvytys.
   • Allerginen reaktio → epinefriini, antihistamiinit.
   • Pneumotorax → happiterapia, rintakyvyn viemäröinti.
3. Monitieteinen yhteistyö: Yhteyskirurgia, interventioradiologia, ICU apua varten.
4. Tallenna ja raportti: Dokumentoi tapahtuma perusteellisesti ja ilmoita vakavista haittavaikutuksista sairaalaprotokollien mukaan.

III. Eri biopsiatyyppien erityiset näkökohdat

Biopsiatyyppinen korkean riskin komplikaatioiden ennaltaehkäisevä mittaukset endoskooppinen puremisen biopsian verenvuoto, perforointi Vältä syviä kudoksen puremia, käytä sähköautomaattia verisuonialueille.

Keuhkojen biopsiapneumotoraksi, hemoptysis-loppukalvoneulan asettaminen, välitön post-op-rinnan röntgenkuvaus.

Maksan biopsian verenvuoto, sappivuoto ultraääniohjattu suurten verisuonten ja sappikanavien välttämiseksi, levitä painekasketus OP: n jälkeen.

Eturauhasen biopsia hematuria, infektio preoperatiivinen suolenvalmistus, ennaltaehkäisevä antibiootit.

Vii. Tietoanalyysi (a) Näytteen koko Tämän tutkimuksen näytteen koko ei perustu tilastolliseen hypoteesitesteeseen. Noin 50 koehenkilöä on tarkoitus ilmoittautua.

(B) Tilastolliset menetelmät

1. Perusmenetelmät, ellei toisin mainita, tämän tutkimuksen tiedot esitetään yhteenvetokuvaustilastoilla. Kategoriset tiedot esitetään taajuusmääränä (N) ja prosenttimäärinä (%), tarvittaessa 95%: n luottamusväleillä (CI). Jatkuvat muuttujat esitetään yhteenvetona keskiarvolla, keskihajonnalla (SD), mediaanilla, minimillä ja maksimilla. Aika-tapahtumatiedot analysoidaan käyttämällä Kaplan-Meier-arvioita eloonjäämiskäyrillä ja 95% CI: lla. Farmakokineettiset (PK) tiedot tiivistetään käyttämällä keskiarvoa, geometristä keskiarvoa, SD: tä, variaatiokerrointa (CV), geometrisen CV: n, mediaanin, maksimin ja minimin mukaisesti.
2. Tehokkuusanalyysi

1. Ensisijainen tehokkuusanalyysi:

   Ensisijainen tehon päätepiste on objektiivinen vasteaste (ORR). Kuvailevat tilastot tekevät yhteenvedon parhaasta kokonaisvasteesta (BOR) kohorttien ja hoitovarsien välillä. Vastaajien lukumäärä ja osuus (CR+PR) tarjotaan, ja ORR: n 95% CI arvioidaan Clopper-Pearson-menetelmällä. Ryhmien A ja B välillä oleva ORR -ero kussakin kohortissa esitetään yhteenveto kuvaavilla tilastoilla ja 95% CI lasketaan käyttämällä normaalia likiarvomenetelmää.

2. Toissijainen tehokkuusanalyysi:

Taudin torjuntanopeus (DCR) analysoidaan samalla tavalla kuin ORR. Tehokkuuden päätepisteissä, kuten vasteen kesto (DOR), etenemisvapaa eloonjääminen (PFS) ja yleinen eloonjääminen (OS), Kaplan-Meier-menetelmää käytetään arvioimaan mediaanien ja juonen eloonjäämiskäyrät. Mediaani-arvioiden 95% CI lasketaan käyttämällä Brookmeyer-Crowley-menetelmää. 12 kuukauden OS-nopeus ja sen 95% CI arvioidaan käyttämällä log (-log) -muunnosta ja selkämuutos normaalin lähentämisen perusteella.

3. Kasvaimen immuunijärjestelmä (aika) -kartan kartoitus on visualisointityökalu, jota käytetään kuvaamaan solujen koostumusta ja vuorovaikutuksia kasvaimen mikroympäristössä. Se tarjoaa käsityksen eri solutyyppien, kuten kasvainsolujen, immuunisolujen ja stroomasolujen, alueellisesta jakautumisesta.

1. CellRanger ja Seurat -ohjelmisto:

   - CellRanger: Analyysityökalu yksisoluiselle RNA-sekvensointitiedolle, joka tuottaa geeniekspressiomatriisit ja suorittaa alkuperäisen tietojenkäsittelyn.

   - Seurat: R-paketti yksisoluisen RNA-sekvensointia koskevalle tietoanalyysille, joka tarjoaa toiminnallisuuksia, kuten datan esikäsittelyä, klusterointia ja visualisointia.

2. T-SNE ja UMAP:

   • T-SNE (T-levitetty stokastinen naapurin upotus) ja UMAP (tasainen jako-likiarvo ja projisointi) ovat mittasuhdetekniikoita, jotka projisoivat korkean ulottuvuuden (esim. Geeniekspressiotiedot) kahden tai kolmiulotteiseen tilaan visualisointia varten.
   • Nämä menetelmät säilyttävät paikallisen tietorakenteen ja auttavat tunnistamaan erilaisia ​​solupopulaatioita.

3. Soluklusterointianalyysi:

   - Unleationalisuuden vähentämisen jälkeen solut on klusteroitu geeniekspressiokuvioiden perusteella. Samankaltaiset solut on ryhmitelty toisiinsa, kun taas erilaiset solut erotetaan.

4. Merkitysgeenit:

   • Markerigeenit ovat ominaisia ​​spesifisille solutyypeille. Analysoimalla niiden ilmentymistä tutkijat voivat tunnistaa kasvainkudoksen erilaiset solutyypit.

   Kasvaimen immuunimikroympäristössä (aika) seuraavat solutyypit ovat ensisijaisia ​​kiinnostavia:

   Kasvainsolut: syöpäsolut kasvainkudoksessa.

   Immuunisolut:

   - T -solut: Vastuu solujen immuunivasteesta.

   • B-solut: vasta-aineita tuottavat solut.
   • NK -solut: luonnolliset tappajasolut, jotka osallistuvat kasvaimen vastaiseen immuniteettiin.
   • Monosyytit ja makrofagit: Osallistu immuunivasteisiin ja solujätteiden poistamiseen.
   • Dendriittisolut: antigeeniä esittelevät immuunisolut.

   Stromasolut:

   • Fibroblastit: Osallistu kudoksen korjaamiseen ja solunulkoisen matriisin muodostumiseen.
   • Endoteelisolut: muodostavat verisuonet.
   • Mesoteliaaliset solut: peitä rungon onteloita.