Verkenning van de dynamische veranderingen en mechanismen van de immuunmicro -omgeving bij gevorderde colorectale kanker behandeld met IBI363 -combinatietherapie

Verkenning van de dynamische veranderingen en mechanismen van de immuunmicro -omgeving bij gevorderde colorectale kanker behandeld met IBI363 Combinatietherapie Studieprotocol Versie nr.: 1.0.0 Versiedatum: 2 december 2024 I. Studie Achtergrond Colorectal Cancer (CRC) rangschikt als de vijfde meest voorkomende kwaadaardige tumor in de Chinese bevolking. In de huidige klinische praktijk zijn standaard eerste en tweedelijnsbehandelingen voor metastatische microsatelliet-stabiele (MSS)/bekwame mismatch-reparatie (PMMR) CRC gebaseerd op combinatie van multi-drugse chemotherapie-regimes gecombineerd met gerichte therapieën. Deze regimes omvatten chemotherapie op basis van fluoropyrimidine (5-fluorouracil [5-FU], leucovorine of capecitabine) in combinatie met oxaliplatine of irinotecan, met of zonder gerichte monoklonale antilichamen. Na ziekteprogressie na tweedelijnsbehandeling omvatten de goedgekeurde behandelingsopties in China regorafenib, fruquintinib en TAS-102; Hun klinische voordelen blijven echter onbevredigend, met objectieve responspercentages (ORR) van 1-4%, progressievrije overleving (PFS) van 2-3 maanden en totale overleving (OS) van 6-9 maanden volgens de respectieve geneesmiddelenlabels. Immunotherapie is momenteel alleen goedgekeurd voor metastatische CRC met Microsatellite Instability-High (MSI-H) of deficiënte mismatch-reparatie (DMMR) status. Samenvattend blijft de behandelingseffectiviteit voor geavanceerde CRC beperkt, wat de dringende behoefte aan nieuwe geneesmiddelen en therapeutische strategieën benadrukt om de resultaten van de patiënt te verbeteren.

IBI363 is een recombinant bispecifiek molecuul bestaande uit een anti-geprogrammeerde doodsreceptor 1 (PD-1) antilichaam gefuseerd met interleukine-2 (IL-2), toegediend als een injecteerbare formulering. Het blokkeert de PD-1/PD-L1-route terwijl het de IL-2-signaalroute wordt geactiveerd, waardoor T-celuitputting wordt omgekeerd en T/NK-celactivering wordt bevorderd. Vanaf 31 juli 2023 werden in totaal 169 deelnemers ingeschreven in het CIBI363A102 -onderzoek, waaronder 22 deelnemers in deel A (versnelde titratie- en Boin -fase) en 147 in deel B (dosisuitbreidingsfase). Wat de werkzaamheid betreft, in de dosis-escalatiefase werden 21 deelnemers evalueerbaar voor werkzaamheid, waarbij drie deelnemers aan de 100-300 μg/kg QW dosisgroep een beste tumorrespons van gedeeltelijke respons (PR) bereikten. In de dosis-expansiefase werden 76 deelnemers evalueerbaar voor werkzaamheid, waarbij zes deelnemers aan de 100-1000 μg/kg QW dosisgroep PR bereikten.

Het is algemeen bekend dat het immuunsysteem tumorcellen kan elimineren door de kanker-immuniteitscyclus. Dit proces wordt echter niet volgehouden, omdat tumoren geleidelijk de tumor -immuunmicro -omgeving (tijd) in een immunosuppressieve toestand kunnen vormen om de immuniteit van de gastheer tegen te gaan. De balans tussen pro-tumor en anti-tumor inflammatoire mediatoren kan tumorprogressie bepalen (figuur 1). Anti-tumor immuuncellen omvatten voornamelijk effector T-cellen (zoals cytotoxische CD8+ T-cellen en effector CD4+ T-cellen), natuurlijke killer (NK) -cellen, dendritische cellen (DC's) en M1-gepolariseerde macrofagen. Pro-tumor immuuncellen bestaan ​​voornamelijk uit regulerende T-cellen (Tregs), van myeloïde afgeleide suppressorcellen (MDSC's), tumor-geassocieerde macrofagen (TAM's), M2-gepolariseerde macrofagen, N2-gepolariseerde neutrofielen en type 2 aangeboren lymfoïde cellen (ILC2S). Tumoren hebben verschillende mechanismen ontwikkeld om immuunbewaking te ontwijken, zoals defecte antigeenpresentatie, opregulatie van negatieve immuunregulerende routes en werving van pro-tumor immuuncellen. Als gevolg hiervan wordt de functie van anti-tumor immuuncellen onderdrukt en is de anti-tumor immuunrespons moeilijk in stand te houden. Het doel van immunotherapie is het herstellen van de cytotoxische functie van anti-tumor immuuncellen, met name cytotoxische T-lymfocyten (CTL's), tegen tumoren. Daarom zal het onderzoeken van de functie en mechanismen van verschillende immuuncomponenten binnen die tijd helpen de responspercentages van immunotherapie te verbeteren en de ontwikkeling van nieuwe immunotherapeutische strategieën te vergemakkelijken.

Figuur 1.Tumor-geassocieerde immuuncellen in de tumor micro-omgeving met de snelle ontwikkeling en iteratie van omics-technologieën zoals multiplex immunohistochemie (MIHC), single-cel transcriptoom sequencing (scRNA-seq) en ruimtelijke transcriptoomsequencing (StrNA-SEQ), we kunnen nu individuele cellen of specifieke cellulaire subpopulaties onderzoeken bij een hogere resolutie.

Deze studie is bedoeld om patiënten in te schrijven met geavanceerde MSS/PMMR-colorectale kanker (CRC) en het uitvoeren van eencellige transcriptoomsequencing op basislijn- en follow-upweefselmonsters. Het doel is om de ruimtelijke heterogeniteit en het evolutionaire landschap van de tumor -immuunmicro -omgeving (tijd) gedurende het ziekteverloop dynamisch in kaart te brengen, van de initiële diagnose tot ziekteprogressie. Door tijd op verschillende tijdstippen te analyseren, proberen we de potentiële werkingsmechanismen van IBI363 bij colorectale kanker op te helderen. Verder zullen we gebruikmaken van spatiotemporele transcriptomische analyses om cel -subpopulatie -interacties in situ binnen de micro -omgeving van de tumor te valideren.

II. Onderzoeksdoelstellingen Deze studie beoogt klinische studiegegevens te verzamelen en te integreren van patiënten die tumor-immunotherapie ondergaan en diepgaande datamining uitvoeren om de ruimtelijke heterogeniteit en het evolutionaire landschap van de tumor immuun micro-omgeving (tijd) door de ziekteprogressie bij colorectale kanker (CRC) patiënten (CRC) (CRC) patiënten (CRC) (CRC) (CRC) -patiënten (CRC) in kaart te brengen.

Vanuit het perspectief van de tijd zullen we de potentiële werkingsmechanismen van IBI363 in combinatietherapie onderzoeken in vergelijking met controlebehandelingen in CRC. Bovendien, door het analyseren van resistentie- en immuunontduikingsmechanismen, wil deze studie een mechanistische basis bieden voor precisiediagnose, behandelingsoptimalisatie en toekomstige therapeutische besluitvorming voor CRC-patiënten.

Iii. Onderzoeksinhoud

1. Het in kaart brengen van de tumor-immuunmicro-omgeving (tijd) bij patiënten met gevorderde MSS/PMMR CRC Deze onderzoeksplannen om 50 patiënten in te schrijven met geavanceerde microsatelliet-stabiele/bekwame mismatch-reparatie (MSS/PMMR) colorectale kanker (CRC) die combinatietherapie krijgen met de immunotherapeutische agent IBI363 en BEVACIZUMABOTHEAP. Tumorweefsels zullen op verschillende tijdstippen worden verzameld tijdens de behandeling (basislijn en na elke twee behandelingscycli voor de evaluatie van werkzaamheid) door middel van weefselbiopsie (inclusief kernnaaldbiopsie of endoscopische pincetbiopsie).

   Een deel van de verzamelde weefselmonsters zal 10 × genomics 3 'RNA-sequencing met één cel (scrNA-seq) ondergaan, terwijl een ander deel in paraffine zal worden ingebed voor daaropvolgende multiplex immunohistochemie (MIHC)/immunofluorescentie (IF) analyse. Celclusteringanalyse wordt uitgevoerd met behulp van Cellranger of Seurat-software op basis van genexpressieprofielen via T-SNE en UMAP-dimensionaliteitsreductiemethoden. Tumor- en immuuncelpopulaties, waaronder T-cellen, B-cellen, natuurlijke killer (NK) cellen, monocyten, macrofagen, dendritische cellen (DC's) en stromale cellen zoals fibroblasten, endotheelcellen en mesotheliale cellen zullen worden geïdentificeerd op basis van markergenen, construeren een uitgebreide tijdslandscape.

2. Het identificeren van voorspellende biomarkers van IBI363-werkzaamheid door tijdsverschillen bij responders en niet-responders te vergelijken bij de 50 ingeschreven CRC-patiënten, ontvangen ongeveer 30 IBI363-combinatietherapie, terwijl 20 controle-behandeling ondergaan. Op basis van vervolggegevens worden patiënten gestratificeerd in responder (CR+PR) en niet-responder (SD+PD) groepen. Door het vergelijken van de resultaten van baseline clustering en markergenexpressieprofielen tussen de twee groepen, willen we celsubpopulaties, verrijkte signaalroutes of genexpressie -handtekeningen die significant worden geassocieerd met therapeutische werkzaamheid en patiëntenvoordeel identificeren.

   Ruimtelijke transcriptomica zal worden gebruikt om de ruimtelijke relaties tussen belangrijke celsubpopulaties en genexpressiepatronen in kaart te brengen, waardoor de identificatie van de meest relevante voorspellende biomarkers geassocieerd met behandelingsrespons mogelijk wordt.

3. Onderzoek naar de impact van IBI363 op tijd en het potentiële werkingsmechanisme door het uitvoeren van single-cel sequencing op tumorweefsels bij baseline en post-behandeling (cyclus 2) bij alle patiënten zullen we pseudotime-trajectanalyse uitvoeren om de differentiatiedynamiek van cellulaire populaties te bestuderen. Op RNA-integriteit gebaseerde analyses zullen worden gebruikt om cellulaire ontwikkelingstrajecten af ​​te leiden, terwijl receptor-ligand interactieanalyses inzicht zullen geven in intercellulaire communicatienetwerken.

This comprehensive approach will allow us to systematically characterize the remodeling effects of different treatment regimens on tumor cells and immunosuppressive cell populations within the tumor microenvironment, including intratumoral Treg cells, tumor-associated macrophages (TAMs), myeloid-derived suppressor cells (MDSCs), and M2 macrophages. Uiteindelijk is deze studie als doel de potentiële klinische implicaties van verschillende cellulaire subtypen in immunotherapie voor CRC te ontdekken.

Iv.Technische route

V. Inclusiecriteria en uitsluitingscriteria voor deelnemers aan de studie

Inclusiecriteria:

1. De deelnemer moet een schriftelijk geïnformeerde toestemmingsformulier (ICF) ondertekenen en in staat zijn om te voldoen aan het protocol-gespecificeerde bezoekschema en gerelateerde procedures.
2. Leeftijd ≥18 jaar en ≤75 jaar, zonder geslachtsbeperkingen.
3. Histologisch of cytologisch bevestigde diagnose van geavanceerde kwaadaardige tumoren, die voldoen aan de volgende cohort-specifieke criteria:

Cohort 2:

• Patiënten met histopathologisch bevestigde geavanceerde colorectale kanker (CRC).
• Lokaal bevestigd als mismatch-reparatie-bezit (PMMR)/Microsatellite Instability-Low (MSI-L) of Microsatellite Stable (MSS) op basis van standaardtests.

Cohort 9:

• Patiënten met histopathologisch bevestigde geavanceerde colorectale kanker (CRC).
• Lokaal bevestigd als mismatch-reparatie-bezit (PMMR)/Microsatellite Instability-Low (MSI-L) of Microsatellite Stable (MSS) (indien van toepassing zijn testresultaten beschikbaar).
• Baseline beeldvorming moet de afwezigheid van actieve levermetastasen aangeven. Opmerking: Patiënten met eerder behandelde levermetastasen (inclusief chirurgische resectie, magnetron of radiofrequentie -ablatie of stereotactische radiotherapie, maar exclusief transarteriële chemo -embolisatie) komen in aanmerking als ze een definitieve behandeling krijgen die ten minste 6 maanden voorafgaand aan de studie van de studie en de opeenvolgende beeldvorming van de levermetastasen ontvingen.

Uitsluitingscriteria

1. Zwangere of borstvoederende vrouwen, of vrouwen die van plan zijn zwanger te worden voor, tijdens of binnen 6 maanden na de laatste toediening van het onderzoeksmedicijn.

2. Actief of onbehandeld centraal zenuwstelsel (CNS) metastasen, bevestigd door beeldvorming tijdens screening of eerdere evaluaties (bijv. Brain of leptomeningeal metastasen).

   • Patiënten met asymptomatische hersenmetastasen kunnen deelnemen.
   • Patiënten die behandeling hebben ontvangen voor hersenmetastasen en symptomatisch stabiel zijn geweest al ≥2 weken zonder bewijs van nieuwe of vergrote laesies kunnen ook in aanmerking komen, op voorwaarde dat ze aan alle volgende voldoen:
   • Aanwezigheid van meetbare extracraniële ziekte.
   • Geen metastasen in de meningen, middenhersenen, pons, medulla of ruggenmerg, en geen meerdere cerebellaire metastasen.
   • Geen compressie van het cerebrale aquaduct, derde of vierde ventrikel of ruggenmerg.
   • Stoping van steroïde therapie ten minste 14 dagen voorafgaand aan de eerste dosis studiegeneesmiddelen.
3. Actieve trombose, diepe veneuze trombose (DVT) of longembolie binnen 4 weken voorafgaand aan de eerste toediening van het onderzoeksmedicijn, tenzij voldoende behandeld en door de onderzoeker stabiel wordt beschouwd.

4. Klinisch significante cardiovasculaire of cerebrovasculaire ziekten, inclusief maar niet beperkt tot:

   • Ventriculaire aritmieën of andere ongecontroleerde hartritmestoornissen die medische interventie vereisen (bijvoorbeeld antiaritmische therapie).
   • Ernstige geleidingsstoornissen (bijv. Derdegraads atrioventriculair blok).
   • QTC -interval (gecorrigeerd door de formule van Fridericia) ≥480 ms.
   • Ongecontroleerde arteriële hypertensie ondanks de standaardbehandeling (systolische bp ≥160 mmHg of diastolische BP ≥100 mmHg).
   • Geschiedenis van myocarditis.
   • Congestief hartfalen dat voortdurende behandeling vereist.
   • Linker ventriculaire ejectiefractie (LVEF) <50%.
   • New York Heart Association (NYHA) Klasse III of IV hart- en vaatziekten.
   • Acuut coronair syndroom (bijv. Myocardinfarct, onstabiele angina), coronaire angioplastiek of stentplaatsing binnen 6 maanden vóór de eerste studie -toediening van de studie.
   • Beroerte of voorbijgaande ischemische aanval binnen 6 maanden vóór de eerste toediening van het medicijn.
   • Bekende actieve aanvallen.
5. Interstitiële longziekte (ILD), longfibrose, pneumoconiose, door geneesmiddelen geïnduceerde pneumonitis, stralingspneumonitis die een steroïde-behandeling vereisen of ernstige longdisfunctie/beperkende longziekte.
6. Geschiedenis van allergische diathese, astma of atopische dermatitis.
7. Terugkerende of symptomatische pleurale, pericardiale of peritoneale effusies die herhaalde drainage vereisen.
8. Actieve auto -immuunziekten die systemische therapie vereisen binnen 2 jaar vóór de eerste studie -toediening van het medicijn (behalve voor vervangingstherapieën zoals schildklierhormoon, insuline of corticosteroïden voor bijnier- of hypofyse -insufficiëntie).
9. Geschiedenis van allogene orgaantransplantatie of allogene hematopoietische stamceltransplantatie.
10. Bekende of vermoedelijke overgevoeligheid voor het studiemedicijn of enige hulpstoffen.
11. Geschiedenis van significante immuuncontrolepuntremmer-gerelateerde toxiciteit die permanente stopzetting vereist.

12. Onopgeloste graad> 1 toxiciteit van eerdere antitumorbehandelingen, behalve:

    • Aanhoudende graad 2 alopecia, perifere neuropathie of hypomagnesiëmie.
    • Stabiele, gecontroleerde toxiciteiten (bijv. Hypothyreoïdie beheerd met hormoonvervanging of hypertensie geregeld tot <160/100 mmHg met antihypertensieve therapie).
13. Onvolledig herstel van chirurgie of grote chirurgie binnen 4 weken voorafgaand aan de eerste toediening van de studie geneesmiddelen.
14. Actieve, ongecontroleerde bloedingen of bekende bloedingsstoornissen.

15. Significante gastro -intestinale ziekten binnen 6 maanden vóór de eerste studie -toediening van de studie, inclusief maar niet beperkt tot:

    • Geschiedenis van inflammatoire darmaandoeningen (IBD).
    • ≥Grade 2 diarree binnen 2 weken vóór de eerste studie -toediening van de studie.
    • Straling -enteritis.
16. Ongecontroleerde tumor-gerelateerde pijn of symptomatische hypercalciëmie.

17. Bekende HIV -infectie, actieve hepatitis B (HBV), hepatitis C (HCV) of actieve tuberculose:

    • HBV-positieve patiënten moeten HBV-DNA-testen ondergaan. Patiënten komen in aanmerking als HBV -DNA ≤2,5 x 10³ kopieën/ml of ≤500 IE/ml is.
    • HBSAG-positieve patiënten moeten tijdens de studie antivirale therapie krijgen om reactivering te voorkomen.
    • Patiënten met HBCAB (+), HBsAg (-), HBS (-) en HBV DNA (-) vereisen geen antivirale profylaxe maar moeten nauw worden gevolgd op reactivering.
    • HCV-seropositieve patiënten met negatieve of niet-detecteerbaar HCV-RNA komen in aanmerking.
    • Patiënten die de HCV -behandeling hebben voltooid en een niet -detecteerbare virale belasting hebben bereikt, komen in aanmerking.
18. Ernstige/ongecontroleerde infecties die IV -antibiotica vereisen binnen 2 weken vóór de eerste studie -toediening van de studie of onverklaarbare koorts (> 38 ° C).
19. Diagnose van een andere maligniteit in de afgelopen 5 jaar, behalve voor curerend behandeld basaal/plaveiselcelcarcinoom, carcinoom in situ, gelokaliseerde prostaatkanker of papillair schildkliercarcinoom.

20. Verboden medicijnen en therapieën, inclusief maar niet beperkt tot:

    • IL-2/IL-15 cytokines (behalve voor hun gebruik bij adoptieve celtherapie of immuunmodulatie bij immuungecompromitteerde patiënten).
    • Chemotherapie of klein-molecuul gerichte therapie binnen 2 weken (of 5 halfwaardetijd) vóór het eerste onderzoek van de studie geneesmiddelen, tenzij er geen vertraagde toxiciteit wordt verwacht. Uitzonderingen:
    • Nitrosoureas en mitomycine C vereisen een uitspoelingsperiode van 6 weken.
    • Op antilichaam gebaseerde therapieën binnen 4 weken vóór de eerste studie-toediening van het onderzoek.
    • Deelname aan een nieuwe interventionele studie binnen 2 weken vóór de eerste studie -toediening van de studie.
    • Palliatieve radiotherapie binnen 2 weken vóór de eerste studie -toediening van het onderzoek.
    • Levende vaccins binnen 4 weken vóór de eerste studie -toediening van de studie.
    • Immunosuppressieve therapie of systemische corticosteroïden (> 10 mg/dag prednison equivalent) binnen 2 weken vóór de eerste toediening van het medicijn.
    • Traditionele Chinese geneeskunde met bekende antitumor -effecten binnen 1 week vóór de eerste studie -toediening van de studie.

21. Contra -indicaties voor combinatietherapieën, inclusief maar niet beperkt tot:

    • Ugt1a1*6/*6, ugt1a1*28/*28, of ugt1a1*6/*28 genotypen, die van invloed kunnen zijn op irinotecan metabolisme.
    • Eerdere uitgebreide buik/bekkenradiotherapie, zoals beoordeeld door de onderzoeker, die de beenmerg- of gastro -intestinale functie kunnen beïnvloeden.
22. Elke aandoening, behandeling of laboratoriumafwijking die naar het oordeel van de onderzoeker de patiëntveiligheid kan in gevaar brengen, de geïnformeerde toestemming, beïnvloeden van de naleving of de evaluatie van de impactstudieonderzoek kunnen verstoren.
23. Ernstige psychiatrische aandoeningen, cognitieve stoornissen of middelenmisbruik die het toestemmingsproces of de naleving van de studie kunnen verstoren.
24. Alle andere bekende of verwachte factoren die naar de mening van de onderzoeker de patiënt ongeschikt zouden maken voor het onderzoek.

Uitsluitingscriteria voor specifieke cohorten

Cohort 2:

1. Symptomen of risico op bloedingen, perforatie of obstructie op de primaire colorectale tumorplaats.
2. Geschiedenis van significante toxiciteit die permanente stopzetting van bevacizumab, oxaliplatine, capecitabine of 5-FU vereist.
3. Bekende allergie om medicijnen of hulpstoffen te bestuderen.

Cohort 9:

1. Geschiedenis van significante toxiciteit die permanente stopzetting van bevacizumab, fruquintinib of trifluridine/tipiracil vereist, of contra -indicaties om medicijnen te bestuderen zoals beoordeeld door de onderzoeker.
2. Bekende allergie om medicijnen of hulpstoffen te bestuderen.

Vi. Managementplan voor gemeenschappelijke bijwerkingen

I. De meest voorkomende bijwerkingen in deze studie zijn die geassocieerd met weefselbiopsie. De belangrijkste managementprincipes en methoden zijn als volgt:

1. Bleeding Oorzaak: biopsie veroorzaakte schade aan bloedvaten (vooral bij tumoren met abnormale coagulatie of rijke vasculaire toevoer).

   Symptomen: bloedingen of hematoom op de lekkingsplaats; braken bloed, zwarte ontlasting (gastro -intestinale bloedingen) na endoscopische biopsie; Aanzienlijke bloedingen kunnen leiden tot hypotensie, tachycardie en tekenen van shock.

   Managementmaatregelen:

   • Lokale druk: oefen druk uit gedurende 10-15 minuten voor oppervlakkige bloedingen; Endoscopische bloedingen kunnen worden geregeld door hemostatische middelen (bijv. Epinefrine -oplossing) of elektrocautery te spuiten.
   • Farmacologische hemostase: intraveneuze toediening van hemostatische geneesmiddelen (bijv. Tranexaminezuur, vitamine K).
   • Interventioneel/chirurgisch: ernstige bloeding kan vasculaire embolisatie of chirurgische hemostase vereisen.
   • Monitoring: controleer vitale tekens, hemoglobinespiegels en transfuseerbloed indien nodig.

   Preventie:

   • Preoperatieve coagulatiebeoordeling (INR, bloedplaatjes) en correctie van afwijkingen.
   • Vermijd biopsie in gebieden met een hoge vasculaire levering (op basis van beeldvorming).
   • Controleer de bloeddruk bij hypertensieve patiënten voordat u verder gaat.

2. Infectieoorzaak: besmetting tijdens de procedure of gecompromitteerde immuunstatus van de patiënt.

   Symptomen: roodheid, zwelling en pusvorming op de lekkingsplaats; koorts, rillingen, verhoogde telling van witte bloedcellen; Diepe infecties (bijv. Leverabces, longontsteking).

   Managementmaatregelen:

   • Antibiotica: breed-spectrum antibiotica (bijv. Cephalosporines van de derde generatie) afgestemd op de infectieplaats en pathogenen, intraveneuze toediening voor ernstige infecties.
   • Drainage: drainage door punctie of chirurgie als een abces ontstaat.
   • Ondersteunende behandeling: vloeistofvervanging, antipyretica, etc.

   Preventie:

   • Strikte aseptische techniek, juiste desinfectie van endoscopische instrumenten.
   • Profylactische antibiotica voor patiënten met een hoog risico (bijv. Diabetes, immunosuppressief).
   • Postoperatieve zorg om de lekkingsplaats schoon en droog te houden.

3. Pijn veroorzaakt: weefselschade of zenuwstimulatie. Symptomen: aanhoudende gelokaliseerde pijn, mogelijk stralend naar omliggende gebieden; Verwezen pijn na viscerale biopsie (bijv. Rechtsschouderpijn na leverbiopsie) .-

   Managementmaatregelen:

   • Milde pijn: lokaal koude kompres, rust, orale NSAID's (bijv. Ibuprofen).
   • Ernstige pijn: na het uitsluiten van bloedingen of orgaanletsel kunnen zwakke opioïden (bijv. Tramadol) op korte termijn worden gebruikt.
   • Zenuwblok: aanhoudende pijn kan een interventionele behandeling vereisen.

   Preventie:

   • Zachte techniek om herhaalde lekke banden te voorkomen.
   • Adequate lokale anesthesie (bijv. Lidocaïne -infiltratie).

4. Orgaanletsel

   Sites met een hoog risico:

   • Longbiopsie → Pneumothorax, Hemopneumothorax.
   • Leverbiopsie → Gallekkage, galwegen.
   • Endoscopische darmbiopsie → perforatie.

   Symptomen:

   • Pneumothorax: plotselinge pijn op de borst, dyspneu, verminderde ademgeluiden aan de getroffen kant.
   • Perforatie: ernstige buikpijn, peritoneale irritatie, vrije lucht onder het diafragma (op beeldvorming).

   Managementmaatregelen:

   • Pneumothorax: kleine (longcompressie <20%) → observatie, zuurstoftherapie; Matig tot grote → Afwatering van gesloten borst.
   • Perforatie: NPO, gastro -intestinale decompressie, intraveneuze antibiotica; Endoscopische knippen of noodoperaties.
   • Gallek: interventionele drainage of chirurgisch beheer.

   Preventie:

   • Beeldvorming-geleide benadering om kritische structuren te voorkomen.
   • Controle punctie diepte (bijv. Voor longbiopsie, plaats aan het einde van uitademing).

5. Allergische reacties triggers: lokale anesthetica, desinfectiemiddelen (bijv. Tinctuur van jodium), latex (bijv. Handschoenen).

   Symptomen: huid Erytheem, jeuk; Laryngeaal oedeem, bronchospasme, anafylactische shock.

   Managementmaatregelen:

   - Stop het aanstootgevende agent, zorg voor luchtweg doorgankelijkheid.

   • Antiallergische behandeling:
   • Epinefrine (ernstige reactie): 0,3-0,5 mg IK BEN.
   • Corticosteroïden (bijv. Dexamethason 10 mg iv).
   • Antihistaminica (bijv. Difenhydramine 20mg IM).
   • Schokbeheer: vloeistofreanimatie, vasopressoren, reanimatie indien nodig.

   Preventie:

   • Gedetailleerde allergiegeschiedenis preoperatief.
   • Beschikbaarheid van noodmedicijnen (bijv. Epinefrine, zuurstof).

6. Vagale zenuwreflex gebruikelijk in: endoscopische biopsie of lek die de nervus vagus stimuleert. Symptomen: bleekheid, zweten, bradycardie, hypotensie.

   Beheer:

   • Stop de procedure, plaats de patiënt in rugligging.
   • Atropine 0,5 mg IV (voor hartslag <50 bpm).
   • Snelle vloeistofreanimatie, vasopressoren indien nodig.

   Preventie:

   - Zachte techniek, vermijd overmatige tractie.

7. Tumorzaaien (zeldzaam) Risico: tumorcellenverspreiding langs het biopsienaald spoor of endoscopisch biopsiepad.

Beheer:

• Lokale radiotherapie of chirurgische resectie.
• Monitor voor metastatische tekenen (bijv. Via follow-up van beeldvorming).

Preventie:

• Kies het kortste biopsiepad.
• Voer post-procedure deactivering van het biopsietrack uit (bijv. Radiofrequente ablatie).

II. Bijwerkingenproces

1. Onmiddellijke beoordeling: volg vitale tekens en identificeer het type bijwerkingen.

2. Stabiliseer de toestand:

   • Bloeden → Breng druk, vloeistofreanimatie uit.
   • Allergische reactie → epinefrine, antihistaminica.
   • Pneumothorax → Zuurstoftherapie, drainage op de borst.
3. Multidisciplinaire samenwerking: contactchirurgie, interventionele radiologie, ICU voor hulp.
4. Record en rapport: documenteer het incident grondig en rapporteer ernstige bijwerkingen volgens ziekenhuisprotocollen.

Iii. Speciale overwegingen voor verschillende biopsietypen

Biopsietype Hoogrisico Complicaties Preventieve maatregelen Endoscopische beetbiopsiebloedingen, perforatie Vermijden diepe weefselbeten, gebruik elektrocautery voor vasculaire gebieden.

Long Biopsie Pneumothorax, Hemoptysis Eind-exhalation naaldinvoeging, onmiddellijke post-op borst röntgenfoto.

Leverbiopsiebloedingen, gallekkage ultrageluidgeleide om belangrijke bloedvaten en galwegen te voorkomen, breng na-op drukverklaring aan.

Prostaatbiopsie hematurie, preoperatieve darmbereiding, profylactische antibiotica.

Vii. Gegevensanalyse (a) steekproefgrootte De steekproefgrootte van deze studie is niet gebaseerd op statistische hypothese -testen. Ongeveer 50 onderwerpen zijn gepland om te worden ingeschreven.

(B) Statistische methoden

1. Basismethoden, tenzij anders aangegeven, zullen gegevens in deze studie worden samengevat met behulp van beschrijvende statistieken. Categorische gegevens worden gepresenteerd als frequentietellingen (N) en percentages (%), met 95% betrouwbaarheidsintervallen (CI) waar nodig. Continue variabelen zullen worden samengevat met behulp van gemiddelde, standaardafwijking (SD), mediaan, minimum en maximum. Time-to-event-gegevens worden geanalyseerd met behulp van Kaplan-Meier-schattingen met overlevingscurves en 95% CIS. Farmacokinetische (PK) -gegevens zullen worden samengevat met behulp van het gemiddelde, geometrische gemiddelde, SD, variatiecoëfficiënt (CV), geometrische CV, mediaan, maximum en minimum als van toepassing.
2. Werkzaamheidsanalyse

1. Primaire werkzaamheidsanalyse:

   Het primaire eindpunt van de werkzaamheid is de objectieve responsnelheid (ORR). Beschrijvende statistieken zullen de beste algemene respons (BOR) samenvatten over cohorten en behandelingsarmen. Het aantal en het aandeel van de responders (CR+PR) worden verstrekt en de 95% BI voor ORR wordt geschat met behulp van de Clopper-Pearson-methode. Het ORR -verschil tussen groepen A en B binnen elk cohort zal worden samengevat met behulp van beschrijvende statistieken, en de 95% BI wordt berekend met behulp van de normale benaderingsmethode.

2. Secundaire werkzaamheidsanalyse:

Ziektecontrolesnelheid (DCR) zal op dezelfde manier worden geanalyseerd als ORR. Voor eindpunten van de werkzaamheid zoals de duur van de respons (DOR), progressievrije overleving (PFS) en algehele overleving (OS), zal de Kaplan-Meier-methode worden gebruikt om mediane tijden en plotoverlevingscurves te schatten. De 95% BI voor mediane schattingen zal worden berekend met behulp van de Brookmeyer-Crowley-methode. Het OS-percentage van 12 maanden en de 95% BI worden geschat met behulp van de log (-log) transformatie en rugtransformatie op basis van de normale benadering.

3. Tumor Immuun -micro -omgeving (tijd) Mapping De tijdkaart is een visualisatietool die wordt gebruikt om de cellulaire samenstelling en interacties in de micro -omgeving van de tumor te beschrijven. Het geeft inzicht in de ruimtelijke verdeling van verschillende celtypen zoals tumorcellen, immuuncellen en stromale cellen.

1. Cellranger en Seurat -software:

   - Cellranger: een analysetool voor RNA-sequentiegegevens met één cel die genexpressiematrices genereert en initiële gegevensverwerking uitvoert.

   - Seurat: een R-pakket voor gegevensanalyse van een enkele cel-RNA-sequencing, die functionaliteiten aanbieden zoals gegevensvoorbewerking, clustering en visualisatie.

2. T-SNE en UMAP:

   • T-SNE (t-gedistribueerde stochastische buur insluiting) en UMAP (uniforme verdeelstukbenadering en projectie) zijn dimensionaliteitsreductietechnieken die hoogdimensionale gegevens (bijvoorbeeld genexpressiegegevens) in twee of driedimensionale ruimte voor visualisatie projecteren.
   • Deze methoden behouden de lokale gegevensstructuur en helpen verschillende celpopulaties te identificeren.

3. Celclusteringanalyse:

   - Na dimensionaliteitsreductie worden cellen geclusterd op basis van genexpressiepatronen. Soortgelijke cellen zijn gegroepeerd, terwijl ongelijksoortige cellen worden gescheiden.

4. Markergenen:

   • Markergenen zijn kenmerkend voor specifieke celtypen. Door hun expressie te analyseren, kunnen onderzoekers verschillende celtypen in tumorweefsel identificeren.

   In de tumor immuun micro -omgeving (tijd) zijn de volgende celtypen van primair belang:

   Tumorcellen: kankercellen in het tumorweefsel.

   Immuuncellen:

   - T -cellen: verantwoordelijk voor cellulaire immuunrespons.

   • B-cellen: antilichaamproducerende cellen.
   • NK -cellen: natuurlijke moordenaarscellen die betrokken zijn bij antitumor -immuniteit.
   • Monocyten en macrofagen: deelnemen aan immuunresponsen en verwijdering van cellulair puin.
   • Dendritische cellen: antigeen-presenterende immuuncellen.

   Stromale cellen:

   • Fibroblasten: betrokken bij weefselherstel en extracellulaire matrixvorming.
   • Endotheelcellen: vormen bloedvaten.
   • Mesotheliale cellen: bedek lichaamsholten.