Esplorazione dei cambiamenti dinamici e dei meccanismi del microambiente immunitario nel carcinoma del colon -retto avanzato trattati con terapia di combinazione IBI363

Esplorazione dei cambiamenti dinamici e dei meccanismi del microambiente immunitario nel carcinoma del colon -retto avanzato trattati con il protocollo di studio di studio di terapia di combinazione IBI363 N.: 1.0.0 Data di versione: 2 dicembre 2024 I. Studiare il carcinoma del colon -retto di sfondo (CRC) si colloca come il quinto tumore maligno più comune nella popolazione cinese. Nella pratica clinica attuale, i trattamenti standard di prima e seconda linea per il CRC metastatico per la stabilimento di microsatellite (MSS)/riparazione di mancata corrispondenza (PMMR) si basano su regimi di chemioterapia a combinazione multi-farmaco combinati con terapie mirate. Questi regimi includono chemioterapia a base di fluoropirimidina (5-fluorouracile [5-Fu], leucovorin o capecitabina) in combinazione con ossaliplatino o irinotecan, con o senza anticorpi monoclonali mirati. Dopo la progressione della malattia dopo il trattamento di seconda linea, le opzioni di trattamento approvate in Cina includono Regorafenib, Fruqintinib e TAS-102; Tuttavia, i loro benefici clinici rimangono insoddisfacenti, con tassi di risposta oggettivi (ORR) dell'1-4%, sopravvivenza libera da progressione (PFS) di 2-3 mesi e sopravvivenza globale (OS) di 6-9 mesi secondo le rispettive etichette dei farmaci. L'immunoterapia è attualmente approvata solo per CRC metastatico con stato di instabilità al microsatellite (MSI-H) o sufficiente stato di riparazione di mancata corrispondenza (DMMR). In sintesi, l'efficacia del trattamento per la CRC avanzata rimane limitata, evidenziando l'urgente necessità di nuovi farmaci e strategie terapeutiche per migliorare i risultati dei pazienti.

IBI363 è una molecola bispecifica ricombinante costituita da un anticorpo antiprogrammazione del recettore della morte 1 (PD-1) fuso con interleuchina-2 (IL-2), somministrata come formulazione iniettabile. Blocca la via PD-1/PD-L1 mentre si attiva la via di segnalazione IL-2, invertendo così l'esaurimento delle cellule T e promuovendo l'attivazione delle cellule T/NK. Al 31 luglio 2023, un totale di 169 partecipanti sono stati iscritti allo studio CIBI363A102, tra cui 22 partecipanti nella parte A (titolazione accelerata e fase di boin) e 147 nella parte B (fase di espansione della dose). Per quanto riguarda l'efficacia, nella fase di escalation della dose, 21 partecipanti erano valutabili per l'efficacia, con tre partecipanti nel gruppo di dose QW 100-300 μg/kg che ha raggiunto una migliore risposta tumorale della risposta parziale (PR). Nella fase della dose-espansione, 76 partecipanti erano valutabili per l'efficacia, con sei partecipanti nel gruppo di dose QW 100-1000 μg/kg che raggiungeva PR.

È noto che il sistema immunitario può eliminare le cellule tumorali attraverso il ciclo del cancro-immunità. Tuttavia, questo processo non è sostenuto, poiché i tumori possono gradualmente modellare il microambiente immunitario tumorale (tempo) in uno stato immunosoppressivo per contrastare l'immunità dell'ospite. L'equilibrio tra mediatori infiammatori pro-tumori e anti-tumore può determinare la progressione del tumore (Figura 1). Le cellule immunitarie antitumorali includono principalmente cellule T effettrici (come cellule T citotossiche CD8+ e cellule T Effector CD4+), cellule killer naturali (NK), cellule dendritiche (DC) e macrofagi polarizzati M1. Le cellule immunitarie pro-tumori sono costituite principalmente da cellule T regolatorie (TREG), cellule soppressori derivate dai mieloidi (MDSC), macrofagi associati al tumore (TAM), macrofagi polarizzati M2, neutrofili polarizzati N2 e cellule linfoide innate di tipo 2 (ILC2S). I tumori hanno evoluto vari meccanismi per eludere la sorveglianza immunitaria, come la presentazione difettosa dell'antigene, l'upregolazione delle vie regolatori immunitarie negative e il reclutamento di cellule immunitarie pro-tumori. Di conseguenza, viene soppressa la funzione delle cellule immunitarie antitumorali e la risposta immunitaria antitumorale è difficile da sostenere. L'obiettivo dell'immunoterapia è ripristinare la funzione citotossica delle cellule immunitarie antitumorali, in particolare i linfociti T citotossici (CTL), contro i tumori. Pertanto, lo studio della funzione e dei meccanismi di diversi componenti immunitari nel tempo contribuirà a migliorare i tassi di risposta all'immunoterapia e faciliterà lo sviluppo di nuove strategie immunoterapiche.

Figura 1. Cellule immunitarie associate al TUMUOR nel microambiente tumorale con il rapido sviluppo e iterazione delle tecnologie omiche come l'immunoistochimica multiplex (MIHC), il sequenziamento del trascrittoma a singola cellula o una sequenziamento cellulare a una subbulitura cellulare a una sequenziamento cellulare.

Questo studio mira a arruolare i pazienti con carcinoma del colon-retto MSS/PMMR avanzato (CRC) ed eseguire il sequenziamento del trascrittoma a cellule singole su campioni di basale e tessuto di follow-up. L'obiettivo è mappare dinamicamente l'eterogeneità spaziale e il panorama evolutivo del microambiente immunitario tumorale (tempo) per tutto il corso della malattia, dalla diagnosi iniziale alla progressione della malattia. Analizzando il tempo in diversi punti temporali, cerchiamo di chiarire i potenziali meccanismi di azione di IBI363 nel carcinoma del colon -retto. Inoltre, sfrutteremo le analisi trascrittomiche spazio -temporali per convalidare le interazioni di sottopopolazione cellulare in situ all'interno del microambiente tumorale.

Ii. Obiettivi di ricerca Questo studio mira a raccogliere e integrare i dati di sperimentazione clinica da pazienti sottoposti a immunoterapia tumorale e condurre il mining approfondito per mappare dinamicamente l'eterogeneità spaziale e il paesaggio evolutivo del microambiente immunitario tumorale (tempo) durante la progressione della malattia nel carcinoma del colore (CRC).

Dal punto di vista del tempo, studieremo i potenziali meccanismi di azione di IBI363 nella terapia di combinazione rispetto ai trattamenti di controllo nella CRC. Inoltre, analizzando i meccanismi di resistenza e di evasione immunitaria, questo studio cerca di fornire una base meccanicistica per la diagnosi di precisione, l'ottimizzazione del trattamento e il futuro processo decisionale terapeutico per i pazienti con CRC.

Iii. Contenuti di ricerca

1. Mappatura del microambiente immunitario tumorale (tempo) in pazienti con CRC avanzato MSS/PMMR Questo studio prevede di iscrivere 50 pazienti con un addetto alla riparazione di disallineamento di microsatellite/abile riparazione di disallineamento (MSS/PMMR) Cancro del colon-retto (CRC) che ricevono la terapia di combinazione con l'agente immunoterapeutico IBI363 e BEVACIZUMAB. I tessuti tumorali saranno raccolti in diversi punti temporali durante il trattamento (basale e dopo ogni due cicli di trattamento per la valutazione dell'efficacia) attraverso la biopsia dei tessuti (inclusa la biopsia dell'ago core o la biopsia della pinza endoscopica).

   Una parte dei campioni di tessuto raccolti subirà un sequenziamento di RNA a cella singola 10 × genomica (scrNA-seq), mentre un'altra porzione verrà integrata in paraffina per la successiva analisi immunoistochimica multiplex (MIHC)/immunoflulorescence (IF). L'analisi del clustering cellulare verrà eseguita utilizzando il software CellRanger o Seurat basato sui profili di espressione genica tramite metodi di riduzione della dimensionalità T-SNE e UMAP. Popolazioni di tumori e cellule immunitarie, incluse cellule T, cellule B, cellule naturali killer (NK), monociti, macrofagi, cellule dendritiche (DC) e cellule stromali come fibroblasti, cellule endoteliali, verranno identificate le cellule mesoteliali in base ai geni del marcatore, che costruiscono un paesaggio temporale.

2. Identificando i biomarcatori predittivi dell'efficacia IBI363 confrontando le differenze di tempo nei responder e non responder tra i 50 pazienti CRC arruolati, circa 30 riceveranno la terapia di combinazione IBI363, mentre 20 subiranno un trattamento di controllo. Sulla base dei dati di follow-up, i pazienti saranno stratificati nei gruppi di soccorritore (CR+PR) e non rispondite (SD+PD). Confrontando i risultati del clustering basale e i profili di espressione genica marker tra i due gruppi, miriamo a identificare le sottopopolazioni cellulari, le vie di segnalazione arricchite o le firme di espressione genica significativamente associate all'efficacia terapeutica e al beneficio del paziente.

   La trascrittomica spaziale verrà utilizzata per mappare le relazioni spaziali tra le sottopopolazioni delle cellule chiave e i modelli di espressione genica, consentendo l'identificazione dei biomarcatori predittivi più rilevanti associati alla risposta al trattamento.

3. Studiando l'impatto di IBI363 in tempo e il suo potenziale meccanismo d'azione eseguendo il sequenziamento a cellule singole sui tessuti tumorali al basale e post-trattamento (Cycle 2) in tutti i pazienti, condurremo analisi della traiettoria di pseudotime per studiare la dinamica di differenziazione delle popolazioni cellulari. Le analisi basate sull'integrità dell'RNA verranno utilizzate per dedurre le traiettorie di sviluppo cellulare, mentre le analisi di interazione del ligando del recettore forniranno approfondimenti sulle reti di comunicazione intercellulare.

Questo approccio globale ci consentirà di caratterizzare sistematicamente gli effetti di rimodellamento di diversi regimi di trattamento sulle cellule tumorali e le popolazioni di cellule immunosoppressive all'interno del microambiente tumorale, tra cui cellule Treg intratumorali, macrofagi associati al tumore (TAM), cellule di soppressore di MDSC (MDSC) e M2. In definitiva, questo studio mira a scoprire le potenziali implicazioni cliniche dei diversi sottotipi cellulari nell'immunoterapia per CRC.

IV. Technical Route

V. Criteri di inclusione e criteri di esclusione per i partecipanti allo studio

Criteri di inclusione:

1. Il partecipante deve firmare un modulo di consenso informato scritto (ICF) ed essere in grado di rispettare il programma di visita specificato dal protocollo e le procedure correlate.
2. Età ≥18 anni e ≤75 anni, senza restrizioni di genere.
3. Diagnosi istologicamente o citologicamente confermata di tumori maligni avanzati, soddisfacendo i seguenti criteri specifici della coorte:

Coorte 2:

• Pazienti con carcinoma del colon -retto avanzato istopatologicamente confermato (CRC).
• Confermato localmente come insufficiente riparazione (PMMR)/Microsatellite Instability-Low (MSI-L) o Microsatellite Stable (MSS) in base a test standard.

Coorte 9:

• Pazienti con carcinoma del colon -retto avanzato istopatologicamente confermato (CRC).
• Confermato localmente come insufficiente riparazione (PMMR)/Microsatellite Instabilità-Low (MSI-L) o Microsatellite Stable (MSS) (se sono disponibili risultati di test applicabili).
• L'imaging di base deve indicare l'assenza di metastasi epatiche attive. Nota: i pazienti con metastasi epatiche precedentemente trattate (compresa la resezione chirurgica, l'ablazione a microonde o radiofrequenza o radioterapia stereotassica, ma escluse la chemiombolizzazione transarteriale) sono ammissibili se hanno ricevuto un trattamento definitivo almeno 6 mesi prima dell'iscrizione allo studio e successivi imaging che affrontano l'assenza di elastasi.

Criteri di esclusione

1. Le donne in gravidanza o in allattamento o le donne che intendono rimanere incinte prima, durante o entro 6 mesi dall'ultima somministrazione del farmaco di studio.

2. Metastasi del sistema nervoso centrale attivo o non trattato (CNS), confermate dall'imaging durante lo screening o le valutazioni precedenti (ad es. Metastasi cerebrali o leptomeningea).

   • I pazienti con metastasi cerebrali asintomatiche possono partecipare.
   • I pazienti che hanno ricevuto un trattamento per le metastasi cerebrali e sono stati sintomaticamente stabili per ≥2 settimane senza evidenza di lesioni nuove o ingrandite possono anche essere ammissibili, a condizione che soddisfino tutte le seguenti:
   • Presenza di malattie extracraniche misurabili.
   • Nessuna metastasi nelle meningi, nel mesencefalo, nei ponti, nel midollo o nel midollo spinale e nessuna metastasi cerebellari multiple.
   • Nessuna compressione dell'acquedotto cerebrale, terzo o quarto ventricolo o midollo spinale.
   • Interruzione della terapia steroidea almeno 14 giorni prima della prima dose di farmaco in studio.
3. Trombosi attiva, trombosi vena profonda (TVV) o embolia polmonare entro 4 settimane prima della prima somministrazione del farmaco di studio, se non adeguatamente trattata e considerata stabile dal ricercatore.

4. Malattie cardiovascolari o cerebrovascolari clinicamente significative, inclusi ma non limitati a:

   • Aritmie ventricolari o altre aritmie cardiache non controllate che richiedono un intervento medico (ad esempio terapia antiaritmica).
   • Gravi disturbi di conduzione (ad es. Blocco atrioventricolare di terzo grado).
   • Intervallo QTC (corretto dalla formula di Fridericia) ≥480 ms.
   • Ipertensione arteriosa non controllata nonostante il trattamento standard (BP sistolica ≥160 mmHg o BP diastolico ≥100 mmHg).
   • Storia della miocardite.
   • Insufficienza cardiaca congestizia che richiede un trattamento in corso.
   • Frazione di eiezione ventricolare sinistra (LVEF) <50%.
   • NEW YORK HEART ASSOCIAZIONE (NYHA) Classe III o Malattia cardiovascolare.
   • Sindrome coronarica acuta (ad es. Infarto miocardico, angina instabile), angioplastica coronarica o posizionamento dello stent entro 6 mesi prima della prima somministrazione di farmaci in studio.
   • Ictus o attacco ischemico transitorio entro 6 mesi prima della prima somministrazione di farmaci in studio.
   • Convulsioni attive conosciute.
5. Malattia polmonare interstiziale (ILD), fibrosi polmonare, pneumoconiosi, polmonite indotta da farmaci, polmonite da radiazioni che richiede un trattamento steroideo o grave disfunzione polmonare/malattia polmonare restrittiva.
6. Storia di diatesi allergica, asma o dermatite atopica.
7. Effusioni pleuriche ricorrenti o sintomatiche pleuriche, pericardiche o peritoneali che richiedono un drenaggio ripetuto.
8. Malattie autoimmuni attive che richiedono una terapia sistemica entro 2 anni prima della prima somministrazione di farmaci in studio (ad eccezione di terapie sostitutive come l'ormone tiroideo, l'insulina o i corticosteroidi per insufficienza surrenale o ipofisaria).
9. Storia del trapianto di organi allogenici o del trapianto di cellule staminali ematopoietiche allogeniche.
10. Ipersensibilità nota o sospetta al farmaco di studio o agli eccipienti.
11. Storia di significativa tossicità correlata all'inibitore immunitario che richiede l'interruzione permanente.

12. Grado irrisolto> 1 tossicità da precedenti trattamenti antitumorali, ad eccezione di:

    • Alopecia di grado 2 persistente, neuropatia periferica o ipomagnesemia.
    • Tossicità stabili e controllate (ad es. Ipotiroidismo gestito con sostituzione ormonale o ipertensione controllata a <160/100 mmHg con terapia antiipertensiva).
13. Recupero incompleto dalla chirurgia o da un intervento chirurgico maggiore entro 4 settimane prima della prima somministrazione di farmaci in studio.
14. Sanguinamento attivo, non controllato o disturbi da sanguinamento noti.

15. Malattie gastrointestinali significative entro 6 mesi prima della prima somministrazione di farmaci in studio, incluso ma non limitato a:

    • Storia della malattia infiammatoria intestinale (IBD).
    • Diarrea ≥grazi 2 entro 2 settimane prima della prima somministrazione di farmaci in studio.
    • Enterite da radiazioni.
16. Dolori non controllati sul tumore o ipercalcemia sintomatica.

17. Infezione da HIV conosciuta, epatite B (HBV), epatite C (HCV) o tubercolosi attiva:

    • I pazienti positivi all'HBV devono sottoporsi a test del DNA dell'HBV. I pazienti sono ammissibili se il DNA HBV è ≤2,5 × 10³ copie/mL o ≤500 UI/mL.
    • I pazienti HBSAG positivi devono ricevere terapia antivirale durante lo studio per prevenire la riattivazione.
    • I pazienti con HBCAB (+), HBSAG (-), HBS (-) e HBV DNA (-) non richiedono profilassi antivirale ma devono essere attentamente monitorati per la riattivazione.
    • Sono ammissibili i pazienti con HCV seropositivi con RNA HCV negativo o non rilevabile.
    • I pazienti che hanno completato il trattamento con HCV e hanno raggiunto un carico virale non rilevabile sono ammissibili.
18. Infezioni gravi/non controllate che richiedono antibiotici IV entro 2 settimane prima della prima somministrazione di farmaci in studio o febbre inspiegabile (> 38 ° C).
19. Diagnosi di un'altra malignità negli ultimi 5 anni, ad eccezione del carcinoma a cellule basali/squamose curate in modo curativo, del carcinoma in situ, del carcinoma della prostata localizzato o del carcinoma tiroideo papillare.

20. Farmaci e terapie proibite, inclusi ma non limitati a:

    • Citokine IL-2/IL-15 (ad eccezione del loro utilizzo nella terapia cellulare adottiva o nella modulazione immunitaria nei pazienti immunocompromessi).
    • Chemioterapia o terapia mirata a piccole molecole entro 2 settimane (o 5 emivite) prima della prima somministrazione di farmaci per lo studio, a meno che non sia prevista alcuna tossicità ritardata. Eccezioni:
    • Nitrosoureas e mitomicina C richiedono un periodo di lavaggio di 6 settimane.
    • Terapie a base di anticorpi entro 4 settimane prima della prima somministrazione di farmaci in studio.
    • Partecipazione a un altro studio interventistico entro 2 settimane prima della prima amministrazione del farmaco.
    • Radioterapia palliativa entro 2 settimane prima della prima somministrazione di farmaci in studio.
    • Vaccini vivi entro 4 settimane prima della prima somministrazione di droghe dello studio.
    • Terapia immunosoppressiva o corticosteroidi sistemici (> 10 mg/giorno di prednisone equivalente) entro 2 settimane prima della prima somministrazione di farmaci in studio.
    • Medicina tradizionale cinese con effetti antitumorali noti entro 1 settimana prima della prima somministrazione di farmaci da studio.

21. Controindicazioni per terapie combinate, inclusi ma non limitati a:

    • Ugt1a1*6/*6, ugt1a1*28/*28 o ugt1a1*6/*28 genotipi, che possono avere un impatto sul metabolismo dell'irinotecan.
    • Precedente estesa radioterapia addominale/pelvica, valutata dallo investigatore, che può colpire il midollo osseo o la funzione gastrointestinale.
22. Qualsiasi condizione, trattamento o anomalia di laboratorio che, a giudizio dell'investigatore, può compromettere la sicurezza dei pazienti, interferisce con il consenso informato, influisce sulla conformità o sulla valutazione dei farmaci per lo studio dell'impatto.
23. Gravi disturbi psichiatrici, compromissione cognitiva o abuso di sostanze che possono interferire con il processo di consenso o la conformità allo studio.
24. Qualsiasi altro fattore noto o atteso che, secondo lo investigatore, renderebbe il paziente inadatto allo studio.

Criteri di esclusione per coorti specifiche

Coorte 2:

1. Sintomi o rischio di sanguinamento, perforazione o ostruzione nel sito del tumore del colon -retto primario.
2. Storia di tossicità significativa che richiede l'interruzione permanente di bevacizumab, oxaliplatino, capecitabina o 5-FU.
3. Allergia nota per studiare farmaci o eccipienti.

Coorte 9:

1. Storia di tossicità significativa che richiede l'interruzione permanente di bevacizumab, fruquintinib o trifluridina/tipiracile o controindicazioni per studiare i farmaci come valutato dal ricercatore.
2. Allergia nota per studiare farmaci o eccipienti.

Vi. Piano di gestione per eventi avversi comuni

I. Le reazioni avverse più comuni in questo studio sono quelle associate alla biopsia tissutale. I principali principi e metodi di gestione sono i seguenti:

1. Causa sanguinante: la biopsia ha indotto un danno ai vasi sanguigni (specialmente nei tumori con coagulazione anormale o ricca offerta vascolare).

   Sintomi: sanguinamento o ematoma nel sito di puntura; Vomito sangue, feci nere (sanguinamento gastrointestinale) dopo biopsia endoscopica; Un sanguinamento significativo può portare a ipotensione, tachicardia e segni di shock.

   Misure di gestione:

   • Pressione locale: applicare la pressione per 10-15 minuti per sanguinamento superficiale; Il sanguinamento endoscopico può essere controllato spruzzando agenti emostatici (ad es. Soluzione di epinefrina) o elettrocauterizzazione.
   • Emostasi farmacologica: somministrazione endovenosa di farmaci emostatici (ad es. Acido transamico, vitamina K).
   • Interventistico/chirurgico: un sanguinamento grave può richiedere embolizzazione vascolare o emostasi chirurgica.
   • Monitoraggio: monitorare i segni vitali, i livelli di emoglobina e trasfondere il sangue se necessario.

   Prevenzione:

   • Valutazione della coagulazione preoperatoria (INR, piastrine) e correzione di anomalie.
   • Evitare la biopsia nelle aree con un'alta fornitura vascolare (basata sull'imaging).
   • Controllare la pressione sanguigna nei pazienti ipertesi prima di procedere.

2. Causa dell'infezione: contaminazione durante la procedura o lo stato immunitario compromesso del paziente.

   Sintomi: arrossamento, gonfiore e formazione di pus nel sito di puntura; febbre, brividi, aumento della conta dei globuli bianchi; Infezioni profonde (ad es. Abeso epatico, polmonite).

   Misure di gestione:

   • Antibiotici: antibiotici ad ampio spettro (ad es. Cefalosporine di terza generazione) su misura per il sito di infezione e i patogeni, somministrazione endovenosa per infezioni gravi.
   • Drenaggio: drenaggio per foratura o chirurgia se si forma un ascesso.
   • Trattamento di supporto: sostituzione dei fluidi, antipiretici, ecc.

   Prevenzione:

   • Stringere tecnica asettica, adeguata disinfezione di strumenti endoscopici.
   • Antibiotici profilattici per pazienti ad alto rischio (ad es. Diabete, immunosoppressi).
   • Cure postoperatorie per mantenere il sito di puntura pulito e asciutto.

3. Causa del dolore: danno tissutale o stimolazione nervosa. Sintomi: dolore localizzato persistente, eventualmente irradianti verso le aree circostanti; dolore riferito dopo biopsia viscerale (ad esempio, dolore alla spalla destra dopo biopsia epatica) .-

   Misure di gestione:

   • Dolore lieve: impacco freddo locale, riposo, FANS orali (ad es. Ibuprofene).
   • Grave dolore: dopo aver escluso il sanguinamento o lesioni da organi, gli oppioidi deboli (ad es. Tramadolo) possono essere usati a breve termine.
   • Blocco nervoso: il dolore persistente può richiedere un trattamento interventistico.

   Prevenzione:

   • Tecnica delicata per evitare forature ripetute.
   • Adeguata anestesia locale (ad es. Infiltrazione di lidocaina).

4. Lesioni dell'organo

   Siti ad alto rischio:

   • Biopsia polmonare → pneumotorace, emopneumotorace.
   • Biopsia epatica → Perdita biliare, emorragia biliare.
   • Biopsia intestinale endoscopica → Perforazione.

   Sintomi:

   • Pneumotorace: dolore al torace improvviso, dispnea, riduzione dei suoni del respiro sul lato interessato.
   • Perforazione: forte dolore addominale, irritazione peritoneale, aria libera sotto il diaframma (sull'imaging).

   Misure di gestione:

   • Pneumotorace: piccolo (compressione polmonare <20%) → osservazione, terapia di ossigeno; Drenaggio toracico da moderato a grande → chiuso.
   • Perforazione: NPO, decompressione gastrointestinale, antibiotici per via endovenosa; Clipping endoscopico o chirurgia di emergenza.
   • Perdita bile: drenaggio interventistico o gestione chirurgica.

   Prevenzione:

   • Approccio guidato da imaging per evitare strutture critiche.
   • Controllare la profondità di puntura (ad es. Per la biopsia polmonare, inserire alla fine dell'espirazione).

5. Trigger di reazioni allergiche: anestetici locali, disinfettanti (ad es. Tintura di iodio), lattice (ad esempio guanti).

   Sintomi: eritema della pelle, prurito; Edema laringeo, broncospasmo, shock anafilattico.

   Misure di gestione:

   - interrompere l'agente offensivo, assicurarsi la pervietà delle vie aeree.

   • Trattamento antiallergico:
   • Epinefrina (reazione grave): 0,3-0,5 mg IO SONO.
   • Corticosteroidi (ad es. Dexametasone 10mg IV).
   • Antistaminici (ad es. Difenidramina 20mg IM).
   • Gestione degli shock: rianimazione fluida, vasopressori, CPR se necessario.

   Prevenzione:

   • Storia di allergia dettagliata prima dell'intervento.
   • Disponibilità di farmaci di emergenza (ad es. Epinefrina, ossigeno).

6. Reflesso del nervo vagale comune in: biopsia endoscopica o puntura che stimola il nervo vago. Sintomi: pallore, sudorazione, bradicardia, ipotensione.

   Gestione:

   • Fermare la procedura, posizionare il paziente in posizione supina.
   • Atropina 0,5 mg IV (per frequenza cardiaca <50 bpm).
   • Resustazione del fluido rapido, vasopressori se necessario.

   Prevenzione:

   - Tecnica delicata, evita una trazione eccessiva.

7. Seeding tumorale (raro) Rischio: diffusione delle cellule tumorali lungo il percorso della biopsia endoscopica dell'ago di biopsia.

Gestione:

• Radioterapia locale o resezione chirurgica.
• Monitorare i segni metastatici (ad esempio, tramite follow-up di imaging).

Prevenzione:

• Scegli il percorso di biopsia più breve.
• Eseguire la disattivazione post-procedura della traccia di biopsia (ad es. Ablazione della radiofrequenza).

Ii. Processo di gestione della reazione avversa

1. Valutazione immediata: monitorare i segni vitali e identificare il tipo di reazione avversa.

2. Stabilizzare la condizione:

   • Sanguinamento → Applicare pressione, rianimazione fluida.
   • Reazione allergica → Epinefrina, antistaminici.
   • Pneumotorace → terapia di ossigeno, drenaggio toracico.
3. Collaborazione multidisciplinare: chirurgia di contatto, radiologia interventistica, terapia intensiva per assistenza.
4. Registrazione e rapporto: documentare accuratamente l'incidente e segnalare gravi eventi avversi secondo i protocolli ospedalieri.

Iii. Considerazioni speciali per diversi tipi di biopsia

Complicanze ad alto rischio di biopsia Misure preventive Misure endoscopiche Biopsia Biopsia, Perforazione Evitare i morsi di tessuto profondo, utilizzare l'elettrocauterio per le aree vascolari.

Pneumotorace della biopsia polmonare, inserzione dell'ago di eshalazione finale di emoptysi, radiografia del torace post-operatoria immediata.

Sanguinamento della biopsia epatica, a perdita di biliare a ultrasuoni guidati per evitare i principali vasi sanguigni e i dotti biliari, applicare la medicazione a pressione post-operatoria.

Ematuria della biopsia prostatica, preparazione preoperatoria dell'intestino, antibiotici profilattici.

Vii. Analisi dei dati (A) Dimensione del campione La dimensione del campione di questo studio non si basa su test di ipotesi statistica. Si prevede che circa 50 soggetti siano iscritti.

(B) Metodi statistici

1. Metodi di base se non diversamente specificato, i dati in questo studio saranno riassunti utilizzando statistiche descrittive. I dati categorici saranno presentati come conteggi di frequenza (N) e percentuali (%), con intervalli di confidenza al 95% (CI) ove necessario. Le variabili continue saranno riassunte usando la media, la deviazione standard (SD), la mediana, il minimo e il massimo. I dati di evento time-to verranno analizzati utilizzando stime Kaplan-Meier con curve di sopravvivenza e IC al 95%. I dati farmacocinetici (PK) saranno riassunti usando media, media geometrica, SD, coefficiente di variazione (CV), CV geometrico, mediana, massimo e minimo come applicabile.
2. Analisi di efficacia

1. Analisi di efficacia primaria:

   L'endpoint di efficacia primaria è il tasso di risposta obiettivo (ORR). Le statistiche descrittive riassumono la migliore risposta complessiva (BOR) tra coorti e bracci di trattamento. Verranno forniti il ​​numero e la proporzione di responder (CR+PR) e l'IC al 95% per ORR sarà stimato utilizzando il metodo Clopper-Pearson. La differenza ORR tra i gruppi A e B all'interno di ciascuna coorte verrà riassunta usando statistiche descrittive e l'IC al 95% verrà calcolato usando il metodo di approssimazione normale.

2. Analisi di efficacia secondaria:

Il tasso di controllo della malattia (DCR) verrà analizzato in modo simile a ORR. Per endpoint di efficacia come la durata della risposta (DOR), la sopravvivenza libera da progressione (PFS) e la sopravvivenza globale (OS), il metodo Kaplan-Meier verrà utilizzato per stimare i tempi mediani e le curve di sopravvivenza trama. L'IC 95% per le stime mediane sarà calcolato usando il metodo Brookmeyer-Crowley. Il tasso di sistema operativo a 12 mesi e il suo IC al 95% saranno stimati usando la trasformazione e la trasformazione del log (-log) in base all'approssimazione normale.

3. Microambiente immunitario tumorale (tempo) Mapping La mappa del tempo è uno strumento di visualizzazione utilizzato per descrivere la composizione cellulare e le interazioni all'interno del microambiente tumorale. Fornisce approfondimenti sulla distribuzione spaziale di vari tipi di cellule come cellule tumorali, cellule immunitarie e cellule stromali.

1. Software CellRanger e Seurat:

   - CellRanger: uno strumento di analisi per i dati di sequenziamento dell'RNA a cellula singola che generano matrici di espressione genica ed esegue l'elaborazione iniziale dei dati.

   - SEURAT: un pacchetto R per l'analisi dei dati di sequenziamento dell'RNA a cellula singola, offrendo funzionalità come preelaborazione dei dati, clustering e visualizzazione.

2. T-SNE e Umap:

   • L'incorporamento del vicino stocastico distratto a T) e l'UMAP (approssimazione e proiezione del collettore uniforme) sono tecniche di riduzione della dimensionalità che proiettano dati ad alta dimensione (ad es. Dati di espressione genica) nello spazio bidimensionale o tridimensionale per la visualizzazione.
   • Questi metodi conservano la struttura dei dati locali e aiutano a identificare diverse popolazioni cellulari.

3. Analisi del clustering cellulare:

   - Riduzione dopo dimensionalità, le cellule sono raggruppate in base ai modelli di espressione genica. Le cellule simili sono raggruppate insieme, mentre le cellule diverse sono separate.

4. Geni marker:

   • I geni marker sono caratteristici di specifici tipi di cellule. Analizzando la loro espressione, i ricercatori possono identificare vari tipi di cellule nel tessuto tumorale.

   Nel microambiente immunitario tumorale (tempo), i seguenti tipi di cellule sono di interesse primario:

   Cellule tumorali: cellule tumorali all'interno del tessuto tumorale.

   Cellule immunitarie:

   - Cellule T: responsabile della risposta immunitaria cellulare.

   • Cellule B: cellule che producono anticorpi.
   • Cellule NK: cellule killer naturali coinvolte nell'immunità antitumorale.
   • Monociti e macrofagi: partecipare alle risposte immunitarie e alla rimozione dei detriti cellulari.
   • Cellule dendritiche: cellule immunitarie presentanti antigene.

   Cellule stromali:

   • Fibroblasti: coinvolto nella riparazione dei tessuti e nella formazione di matrice extracellulare.
   • Cellule endoteliali: costituiscono vasi sanguigni.
   • Cellule mesoteliali: coprire le cavità del corpo.