Exploration des changements dynamiques et des mécanismes du microenvironnement immunitaire dans un cancer colorectal avancé traité avec une thérapie combinée IBI363

Exploration des changements dynamiques et des mécanismes du microenvironnement immunitaire dans le cancer colorectal avancé traité avec IBI363 COMBINATION Thérapie Protocole N °: 1.0.0 Date de la version: 2 décembre 2024 I. Étude du cancer du cancer colorectal (CRC) comme la cinquième tumeur maligne la plus courante dans la population chinoise. Dans la pratique clinique actuelle, les traitements standard de première et de deuxième intention pour les CRC de réparation de décalage (PMMR) métastatiques (MSS) / MSMRACH (PMMR) sont basés sur des régimes de chimiothérapie combinée multi-médicaments combinés à des thérapies ciblées. Ces schémas comprennent la chimiothérapie à base de fluoropyrimidine (5-fluorouracile [5-FU], la leucovorine ou la capécitabine) en combinaison avec l'oxaliplatine ou l'irinotécan, avec ou sans anticorps monoclonaux ciblés. Après la progression de la maladie après un traitement de deuxième intention, les options de traitement approuvées en Chine comprennent le régorafenib, le fruquinintib et le TAS-102; Cependant, leurs avantages cliniques restent insatisfaisants, avec des taux de réponse objectifs (ORR) de 1 à 4%, une survie sans progression (PFS) de 2 à 3 mois et une survie globale (OS) de 6 à 9 mois selon les étiquettes de médicament respectives. L'immunothérapie est actuellement approuvée uniquement pour le CRC métastatique avec un statut de réparation de décalage (MSI-H) ou de réparation de décalage déficient en microsatellite. En résumé, l'efficacité du traitement pour le CRC avancé reste limitée, mettant en évidence le besoin urgent de nouveaux médicaments et stratégies thérapeutiques pour améliorer les résultats des patients.

IBI363 est une molécule bispécifique recombinante composée d'un anticorps de mort anti-programmé (PD-1) fusionné avec l'interleukine-2 (IL-2), administré sous forme de formulation injectable. Il bloque la voie PD-1 / PD-L1 lors de l'activation de la voie de signalisation IL-2, inversant ainsi l'épuisement des cellules T et favorisant l'activation des cellules T / NK. Au 31 juillet 2023, un total de 169 participants ont été inscrits à l'étude CIBI363A102, dont 22 participants dans la partie A (titrage accéléré et phase de Boin) et 147 dans la partie B (phase d'expansion de dose). En ce qui concerne l'efficacité, dans la phase d'escalade de dose, 21 participants ont été évaluables pour l'efficacité, trois participants dans le groupe de dose QW de 100 à 300 μg / kg obtenant une meilleure réponse tumorale de réponse partielle (PR). Dans la phase de dose-expansion, 76 participants ont été évaluables pour l'efficacité, avec six participants dans le groupe de dose QW de 100-1000 μg / kg atteignant les PR.

Il est bien établi que le système immunitaire peut éliminer les cellules tumorales à travers le cycle de l'immunité contre le cancer. Cependant, ce processus n'est pas soutenu, car les tumeurs peuvent progressivement façonner le microenvironnement immunitaire tumoral (temps) en un état immunosuppresseur pour contrer l'immunité de l'hôte. L'équilibre entre les médiateurs inflammatoires pro-tumoraux et anti-tumoraux peut déterminer la progression tumorale (figure 1). Les cellules immunitaires anti-tumorales incluent principalement les cellules T effectrices (telles que les cellules T CD8 + cytotoxiques et les cellules T Effecteur CD4 +), les cellules tueuses naturelles (NK), les cellules dendritiques (DC) et les macrophages polarisés M1. Les cellules immunitaires pro-tumorales sont principalement constituées de cellules T régulatrices (Tregs), de cellules suppressives dérivées de myéloïdes (MDSC), de macrophages associés à la tumeur (TAM), de macrophages polarisés M2, de neutrophiles polarisés N2 et de cellules lymphoïdes innoantes de type 2 (ILC2). Les tumeurs ont évolué divers mécanismes pour échapper à la surveillance immunitaire, tels que la présentation défectueuse de l'antigène, la régulation positive des voies de régulation immunitaire négatives et le recrutement de cellules immunitaires pro-tumorales. En conséquence, la fonction des cellules immunitaires anti-tumorales est supprimée et la réponse immunitaire anti-tumorale est difficile à maintenir. Le but de l'immunothérapie est de restaurer la fonction cytotoxique des cellules immunitaires anti-tumorales, en particulier les lymphocytes T cytotoxiques (CTL), contre les tumeurs. Par conséquent, l'étude de la fonction et des mécanismes de différents composants immunitaires dans le temps aidera à améliorer les taux de réponse à l'immunothérapie et à faciliter le développement de nouvelles stratégies immunothérapeutiques.

Figure 1. cellules immunitaires associées au TUMOR dans le microenvironnement tumoral avec le développement rapide et l'itération des technologies omiques telles que l'immunohistochimie multiplex (MIHC), le séquençage du transcriptome unique (SCRNA-SEQ) et le séquençage spatial des transcriptomes (StrNA-Seq), nous pouvons maintenant étudier des cellules individuelles ou des sous-étages cellulaires spécifiques dans une résolution supérieure.

Cette étude vise à inscrire les patients atteints d'un cancer colorectal MSS / PMMR avancé (CRC) et à effectuer un séquençage de transcriptome unique sur les échantillons de tissus de base et de suivi. L'objectif est de cartographier dynamiquement l'hétérogénéité spatiale et le paysage évolutif du microenvironnement immunitaire tumoral (temps) tout au long de l'évolution de la maladie, du diagnostic initial à la progression de la maladie. En analysant le temps à différents moments, nous cherchons à élucider les mécanismes d'action potentiels de l'IBI363 dans le cancer colorectal. En outre, nous partisons des analyses transcriptomiques spatio-temporelles pour valider les interactions de sous-population cellulaire in situ dans le microenvironnement tumoral.

Ii Objectifs de la recherche Cette étude vise à collecter et à intégrer les données des essais cliniques de patients subissant une immunothérapie tumorale et à effectuer une exploition approfondie de données pour cartographier dynamiquement l'hétérogénéité spatiale et le paysage évolutif des microenvironnement tumoraux (temps) tout au long de la progression de la maladie chez les patients atteints de cancer colorectal (CRC).

Du point de vue du temps, nous étudierons les mécanismes potentiels d'action de l'IBI363 en thérapie combinée par rapport aux traitements témoins du CRC. De plus, en analysant les mécanismes de résistance et d'évasion immunitaire, cette étude cherche à fournir un fondement mécaniste pour le diagnostic de précision, l'optimisation du traitement et la prise de décision thérapeutique future pour les patients CRC.

Iii. Recherche de contenu

1. Cartographier le microenvironnement immunitaire tumoral (temps) chez les patients atteints de CRC MSS / PMMR avancée, cette étude prévoit d'inscrire 50 patients atteints de réparation de mésappariement à microsatellite avancée (MSS / PMMR) Cancer colorectal (CRC) qui reçoivent une thérapie combinée avec la chimiothérapie immunothérapeutique. Les tissus tumoraux seront collectés à différents moments pendant le traitement (ligne de base et après deux cycles de traitement pour l'évaluation de l'efficacité) par biopsie tissulaire (y compris la biopsie de l'aiguille centrale ou la biopsie des pinces endoscopiques).

   Une partie des échantillons de tissus collectés subira un séquençage de l'ARN unique de la génomique 3 '(SCRNA-SEQ), tandis qu'une autre partie sera inclinée par la paraffine pour l'analyse d'immunohistochimie multiplex (IF) ultérieure (MIHC) / immunofluorescence (IF). L'analyse du clustering cellulaire sera effectuée à l'aide d'un logiciel CellRanger ou SEURAT basé sur des profils d'expression génique via les méthodes de réduction de la dimensionnalité T-SNE et UMAP. Les populations de cellules tumorales et immunitaires, y compris les cellules T, les cellules B, les cellules tueuses naturelles (NK), les monocytes, les macrophages, les cellules dendritiques (DC) et les cellules stromales telles que les fibroblastes, les cellules endothéliales et les cellules mésothéliales, sont identifiées sur la base des gènes marqueurs, la construction d'un temps complexe.

2. L'identification des biomarqueurs prédictifs de l'efficacité de l'IBI363 en comparant les différences de temps dans les répondeurs et les non-répondants parmi les 50 patients CRC inscrits, environ 30 recevront une thérapie combinée IBI363, tandis que 20 subiront un traitement témoin. Sur la base des données de suivi, les patients seront stratifiés en groupes de répondeurs (CR + PR) et non répondants (SD + PD). En comparant les résultats de regroupement de base et les profils d'expression des gènes de marqueur entre les deux groupes, nous visons à identifier les sous-populations cellulaires, les voies de signalisation enrichies ou les signatures d'expression génique significativement associées à l'efficacité thérapeutique et au bénéfice du patient.

   La transcriptomique spatiale sera utilisée pour cartographier les relations spatiales entre les sous-populations cellulaires clés et les modèles d'expression génique, permettant l'identification des biomarqueurs prédictifs les plus pertinents associés à la réponse au traitement.

3. Enquêtant sur l'impact de l'IBI363 sur le temps et son mécanisme d'action potentiel en effectuant un séquençage unique sur les tissus tumoraux au départ et après le traitement (cycle 2) chez tous les patients, nous effectuerons une analyse de la trajectoire pseudo-temps pour étudier la dynamique de différenciation des populations cellulaires. Des analyses basées sur l'intégrité de l'ARN seront utilisées pour déduire les trajectoires de développement cellulaire, tandis que les analyses d'interaction récepteur-ligand fourniront un aperçu des réseaux de communication intercellulaires.

Cette approche complète nous permettra de caractériser systématiquement les effets de remodelage de différents schémas de traitement sur les cellules tumorales et les populations de cellules immunosuppressives au sein du microenvironnement tumoral, y compris les cellules Treg intratumorales, les macrophages tumoraux (TAM), les cellules de suppresseur dérivées myéloïdes (MDSC) et les macrophages M2. En fin de compte, cette étude vise à découvrir les implications cliniques potentielles de différents sous-types cellulaires dans l'immunothérapie pour le CRC.

IV.Technical Route

V. Critères d'inclusion et critères d'exclusion pour les participants à l'étude

Critères d'inclusion:

1. Le participant doit signer un formulaire de consentement éclairé écrit (ICF) et être en mesure de se conformer au calendrier des visites spécifié par le protocole et aux procédures connexes.
2. Âge ≥ 18 ans et ≤ 75 ans, sans restrictions de genre.
3. Diagnostic histologique ou cytologiquement confirmé des tumeurs malignes avancées, répondant aux critères spécifiques à la cohorte suivants:

Cohorte 2:

• Les patients atteints d'un cancer colorectal avancé confirmé histopathologique (CRC).
• Confirmé localement comme une répartition inadéquat (PMMR) / microsatellite-instabilité-low (MSI-L) ou microsatellite stable (MSS) basé sur des tests standard.

Cohorte 9:

• Les patients atteints d'un cancer colorectal avancé confirmé histopathologique (CRC).
• Confirmé localement comme une répartition inadéquat (PMMR) / microsatellite Instabilité-low (MSI-L) ou Microsatellite stable (MSS) (le cas échéant, les résultats des tests applicables sont disponibles).
• L'imagerie de base doit indiquer l'absence de métastases hépatiques actives. Remarque: Les patients atteints de métastases hépatiques précédemment traités (y compris la résection chirurgicale, l'ablation par micro-ondes ou radiofréquences ou la radiothérapie stéréotaxique, mais à l'exclusion de la chimioembolisation transartérielle) sont éligibles s'ils ont reçu un traitement définitif au moins 6 mois avant l'étude de l'inscription et l'imagerie suivante confirme l'absence des métastases hépatiques.

Critères d'exclusion

1. Les femmes enceintes ou allaitées, ou les femmes qui envisagent de devenir enceintes avant, pendant ou dans les 6 mois suivant la dernière administration du médicament à l'étude.

2. Métastases du système nerveux central actif ou non traité (SNC), confirmé par l'imagerie pendant le dépistage ou les évaluations précédentes (par exemple, les métastases cérébrales ou leptoméningiennes).

   • Les patients atteints de métastases cérébrales asymptomatiques peuvent participer.
   • Les patients qui ont reçu un traitement pour les métastases cérébrales et qui ont été symptomatiquement stables pendant ≥ 2 semaines sans signe de lésions nouvelles ou agrandies peuvent également être éligibles, à condition qu'ils respectent tous les éléments suivants:
   • Présence d'une maladie extracrânienne mesurable.
   • Pas de métastases dans les méninges, le cerveau moyen, les pons, la moelle ou la moelle épinière, et pas de métastases cérébelleuses multiples.
   • Aucune compression de l'aqueduc cérébral, du troisième ou du quatrième ventricule ou de la moelle épinière.
   • Arrêt de la thérapie par stéroïde au moins 14 jours avant la première dose de médicament à l'étude.
3. Thrombose active, thrombose veineuse profonde (TVP) ou embolie pulmonaire dans les 4 semaines précédant la première administration du médicament d'étude, sauf si l'investigateur a traité de manière adéquate et considérée par l'investigateur.

4. Maladies cardiovasculaires ou cérébrovasculaires cliniquement significatives, y compris, mais sans s'y limiter:

   • Arythmies ventriculaires ou autres arythmies cardiaques incontrôlées nécessitant une intervention médicale (par exemple, une thérapie antiarythmique).
   • Troubles de la conduction sévères (par exemple, bloc auriculo-ventriculaire du troisième degré).
   • Intervalle QTC (corrigé par la formule de Fridericia) ≥480 ms.
   • Hypertension artérielle non contrôlée malgré un traitement standard (PA systolique ≥160 mmHg ou PA diastolique ≥ 100 mmHg).
   • Histoire de la myocardite.
   • Insuffisance cardiaque congestive nécessitant un traitement en cours.
   • Fraction d'éjection ventriculaire gauche (LVEF) <50%.
   • Association du cœur de New York (NYHA) Classe III ou maladie cardiovasculaire IV.
   • Syndrome coronarien aigu (par exemple, infarctus du myocarde, poitrine instable), angioplastie coronaire ou placement de stent dans les 6 mois avant la première étude de l'administration du médicament.
   • AVC ou attaque ischémique transitoire dans les 6 mois avant la première étude de l'administration du médicament.
   • Des crises actives connues.
5. Maladie pulmonaire interstitielle (ILD), fibrose pulmonaire, pneumoconiose, pneumonite induite par le médicament, radiothérapie nécessitant un traitement stéroïde ou une dysfonction pulmonaire sévère / une maladie pulmonaire restrictive.
6. Antécédents de diathèse allergique, d'asthme ou de dermatite atopique.
7. Épanches pleurales, péricardiques ou péritonéales récurrentes ou symptomatiques nécessitant un drainage répété.
8. Les maladies auto-immunes actives nécessitant un traitement systémique dans les 2 ans avant la première étude de l'administration du médicament (à l'exception des thérapies de remplacement telles que l'hormone thyroïdienne, l'insuline ou les corticostéroïdes pour l'insuffisance surrénalienne ou hypophysaire).
9. Histoire de la transplantation d'organes allogéniques ou de la transplantation allogénique des cellules souches hématopoïétiques.
10. Hypersensibilité connue ou suspectée au médicament d'étude ou à tout excipie.
11. Antécédents d'une toxicité liée à l'inhibiteur de point de contrôle immunitaire significatif nécessitant une interruption permanente.

12. Grade non résolu> 1 toxicité des traitements antitumoraux précédents, sauf pour:

    • Alopécie persistante de grade 2, neuropathie périphérique ou hypomagnésémie.
    • Toxicités stables et contrôlées (par exemple, l'hypothyroïdie gérée avec un remplacement hormonal ou une hypertension contrôlée à <160/100 mmHg par thérapie antihypertense).
13. Récupération incomplète après une chirurgie ou une chirurgie majeure dans les 4 semaines précédant la première étude Administration du médicament.
14. Saignements actifs, incontrôlés ou troubles de saignement connus.

15. Maladies gastro-intestinales significatives dans les 6 mois avant la première étude de l'administration du médicament, y compris, mais sans s'y limiter:

    • Antécédents de la maladie inflammatoire de l'intestin (MII).
    • ≥ Grade 2 Diarrhée dans les 2 semaines avant la première étude de l'administration du médicament.
    • Entérite de radiation.
16. Douleur non contrôlée liée à la tumeur ou hypercalcémie symptomatique.

17. Infection au VIH connue, hépatite B active (VHB), hépatite C (VHC) ou tuberculose active:

    • Les patients HBV positifs doivent subir des tests d'ADN HBV. Les patients sont éligibles si l'ADN du VHB est ≤2,5 × 10³ copies / ml ou ≤500 UI / ml.
    • Les patients HBSAG positifs doivent recevoir un traitement antiviral pendant l'étude pour prévenir la réactivation.
    • Les patients atteints de HBCAB (+), HbsAg (-), Hbs (-) et l'ADN du VHB (-) ne nécessitent pas de prophylaxie antivirale mais doivent être étroitement surveillés pour la réactivation.
    • Les patients séropositifs du VHC avec l'ARN du VHC négatif ou indétectable sont éligibles.
    • Les patients qui ont terminé le traitement du VHC et ont obtenu une charge virale indétectable sont éligibles.
18. Infections sévères / non contrôlées nécessitant des antibiotiques IV dans les 2 semaines avant la première étude de l'administration du médicament ou de la fièvre inexpliquée (> 38 ° C).
19. Diagnostic d'une autre malignité au cours des 5 dernières années, à l'exception du carcinome basal / squameux traité curative, du carcinome in situ, du cancer de la prostate localisé ou du carcinome thyroïdien papillaire.

20. Médicaments et thérapies interdits, y compris, mais sans s'y limiter:

    • Cytokines IL-2 / IL-15 (à l'exception de leur utilisation dans la thérapie cellulaire adoptive ou la modulation immunitaire chez les patients immunodéprimés).
    • Chimiothérapie ou thérapie ciblée à petite molécule dans les 2 semaines (ou 5 demi-vies) avant la première étude de l'administration du médicament, sauf si aucune toxicité retardée n'est attendue. Exceptions:
    • Les nitrosouas et la mitomycine C nécessitent une période de lavage de 6 semaines.
    • Thérapies à base d'anticorps dans les 4 semaines avant la première étude de l'administration de médicaments.
    • Participation à un autre essai interventionnel dans les 2 semaines avant la première étude de l'administration du médicament.
    • Radiothérapie palliative dans les 2 semaines avant la première étude de l'administration du médicament.
    • Vaccines vivants dans les 4 semaines avant la première étude de l'administration du médicament.
    • Thérapie immunosuppressive ou corticostéroïdes systémique (> 10 mg / jour de prednisone d'équivalent) dans les 2 semaines avant la première étude de l'administration de médicaments.
    • Médecine traditionnelle chinoise avec des effets antitumoraux connus dans une semaine avant la première étude de l'administration du médicament.

21. Contre-indications pour les thérapies combinées, y compris, mais sans s'y limiter:

    • UGT1A1 * 6 / * 6, UGT1A1 * 28 / * 28, ou UGT1A1 * 6 / * 28 génotypes, qui peuvent avoir un impact sur le métabolisme de l'irinotécan.
    • Radiothérapie abdominale / pelvienne extensive antérieure, telle qu'évaluée par l'investigateur, qui peut affecter la moelle osseuse ou la fonction gastro-intestinale.
22. Toute condition, traitement ou anomalie de laboratoire qui, dans le jugement de l'investigateur, peut compromettre la sécurité des patients, interférer avec le consentement éclairé, affecter la conformité ou un impact sur l'évaluation des médicaments.
23. Des troubles psychiatriques graves, des troubles cognitifs ou une toxicomanie qui peuvent interférer avec le processus de consentement ou la conformité de l'étude.
24. Tout autre facteur connu ou anticipé qui, de l'avis de l'investigateur, rendrait le patient inadapté à l'étude.

Critères d'exclusion pour des cohortes spécifiques

Cohorte 2:

1. Symptômes ou risque de saignement, de perforation ou d'obstruction sur le site tumoral colorectal primaire.
2. Antécédents de toxicité significative nécessitant l'arrêt permanent du bevacizumab, de l'oxaliplatine, de la capécitabine ou du 5-FU.
3. Allergie connue pour étudier les médicaments ou les excipients.

Cohorte 9:

1. Antécédents d'une toxicité significative nécessitant l'arrêt permanent du bevacizumab, du fruquintinib ou de la trifluridine / tipiracile, ou contre-indications pour étudier les médicaments évalués par l'investigateur.
2. Allergie connue pour étudier les médicaments ou les excipients.

Vi. Plan de gestion pour les événements indésirables communs

I. Les effets indésirables les plus courants dans cette étude sont ceux associés à la biopsie tissulaire. Les principaux principes et méthodes de gestion sont les suivants:

1. Saignement Cause: La biopsie a induit des dommages aux vaisseaux sanguins (en particulier dans les tumeurs avec une coagulation anormale ou un riche alimentation vasculaire).

   Symptômes: saignement ou hématome au site de la ponction; Vomissements de sang, tabourets noirs (saignement gastro-intestinal) après biopsie endoscopique; Des saignements significatifs peuvent entraîner une hypotension, une tachycardie et des signes de choc.

   Mesures de gestion:

   • Pression locale: appliquez une pression pendant 10 à 15 minutes pour les saignements superficiels; Les saignements endoscopiques peuvent être contrôlés par pulvérisation d'agents hémostatiques (par exemple, une solution d'épinéphrine) ou de l'électrocauterie.
   • Hémostase pharmacologique: administration intraveineuse de médicaments hémostatiques (par exemple, acide tranexamique, vitamine K).
   • Interventionnel / chirurgical: les saignements graves peuvent nécessiter une embolisation vasculaire ou une hémostase chirurgicale.
   • Surveillance: surveiller les signes vitaux, les niveaux d'hémoglobine et transfuser le sang si nécessaire.

   Prévention:

   • Évaluation de la coagulation préopératoire (INR, plaquettes) et correction des anomalies.
   • Évitez la biopsie dans les zones à forte alimentation vasculaire (basée sur l'imagerie).
   • Contrôler la pression artérielle chez les patients hypertendus avant de procéder.

2. Cause d'infection: contamination pendant la procédure ou l'état immunitaire compromis du patient.

   Symptômes: rougeur, gonflement et formation de PUS au site de ponction; Fièvre, frissons, augmentation du nombre de globules blancs; infections profondes (par exemple, abcès hépatique, pneumonie).

   Mesures de gestion:

   • Antibiotiques: antibiotiques à large spectre (par exemple, céphalosporines de troisième génération) adaptés au site d'infection et aux agents pathogènes, administration intraveineuse pour les infections graves.
   • Drainage: drainage par ponction ou chirurgie si un abcès se forme.
   • Traitement de soutien: remplacement des liquides, antipyrétiques, etc.

   Prévention:

   • Technique aseptique stricte, désinfection appropriée des instruments endoscopiques.
   • Antibiotiques prophylactiques pour les patients à haut risque (par exemple, diabète, immunodéprimé).
   • Soins postopératoires pour garder le site de ponction propre et sec.

3. Douleur Cause: Dommages tissulaires ou stimulation nerveuse. Symptômes: douleur localisée persistante, éventuellement rayonnante vers les zones environnantes; Douleur référée après biopsie viscérale (par exemple, douleur à l'épaule droite après biopsie hépatique) .-

   Mesures de gestion:

   • Douleur légère: compresse à froid local, repos, AINS oraux (par exemple, ibuprofène).
   • Douleur sévère: Après exclusion des saignements ou des lésions organiques, des opioïdes faibles (par exemple, le tramadol) peuvent être utilisés à court terme.
   • Bloc nerveux: La douleur persistante peut nécessiter un traitement interventionnel.

   Prévention:

   • Technique douce pour éviter les perforations répétées.
   • Anesthésie locale adéquate (par exemple, infiltration de lidocaïne).

4. Blessure à l'organe

   Sites à haut risque:

   • Biopsie pulmonaire → Pneumothorax, hémopneumothorax.
   • Biopsie hépatique → fuite de la bile, hémorragie biliaire.
   • Biopsie intestinale endoscopique → perforation.

   Symptômes:

   • Pneumothorax: douleur thoracique soudaine, dyspnée, diminution des bruits de respiration du côté affecté.
   • Perforation: Douleurs abdominales sévères, irritation péritonéale, air libre sous le diaphragme (sur l'imagerie).

   Mesures de gestion:

   • Pneumothorax: petite (compression pulmonaire <20%) → Observation, oxygénothérapie; Drainage thoracique modéré à grand → fermé.
   • Perforation: NPO, décompression gastro-intestinale, antibiotiques intraveineux; Écrêtage endoscopique ou chirurgie d'urgence.
   • Fuite de la bile: drainage interventionnel ou gestion chirurgicale.

   Prévention:

   • Approche guidée par l'imagerie pour éviter les structures critiques.
   • Profondeur de ponction de contrôle (par exemple, pour la biopsie pulmonaire, insérer à la fin de l'expiration).

5. Les réactions allergiques déclenchent: anesthésiques locaux, désinfectants (par exemple, teinture d'iode), latex (par exemple, les gants).

   Symptômes: érythème cutané, démangeaisons; œdème laryngé, bronchospasme, choc anaphylactique.

   Mesures de gestion:

   - interrompre l'agent incriminé, assurer la perméabilité des voies respiratoires.

   • Traitement antiallergique:
   • Épinéphrine (réaction sévère): 0,3-0,5 mg JE SUIS.
   • Corticostéroïdes (par exemple, dexaméthasone 10 mg IV).
   • Antihistaminiques (par exemple, diphenhydramine 20 mg IM).
   • Gestion des chocs: réanimation fluide, vasopresseurs, RCR si nécessaire.

   Prévention:

   • Histoire détaillée des allergies en préopératoire.
   • Disponibilité des médicaments d'urgence (par exemple, épinéphrine, oxygène).

6. Réflexe du nerf vagal commun dans: biopsie endoscopique ou ponction stimulant le nerf vague. Symptômes: pâleur, transpiration, bradycardie, hypotension.

   Gestion:

   • Arrêtez la procédure, placez le patient en position couchée.
   • Atropine 0,5 mg IV (pour la fréquence cardiaque <50 bpm).
   • Réanimation fluide rapide, vasopresseurs si nécessaire.

   Prévention:

   - Technique douce, éviter une traction excessive.

7. Section tumorale (rare) Risque: dissémination des cellules tumorales le long de la piste à aiguille de biopsie ou un chemin de biopsie endoscopique.

Gestion:

• Radiothérapie locale ou résection chirurgicale.
• Surveillez les signes métastatiques (par exemple, via le suivi de l'imagerie).

Prévention:

• Choisissez le chemin de biopsie le plus court.
• Effectuer la désactivation post-procédure de la piste de biopsie (par exemple, ablation par radiofréquence).

Ii Processus de manipulation des réactions indésirables

1. Évaluation immédiate: surveillez les signes vitaux et identifiez le type de réaction indésirable.

2. Stabilisez la condition:

   • Saignement → Appliquer la pression, réanimation fluide.
   • Réaction allergique → épinéphrine, antihistaminiques.
   • Pneumothorax → oxygénothérapie, drainage thoracique.
3. Collaboration multidisciplinaire: contacter la chirurgie, radiologie interventionnelle, USI pour obtenir de l'aide.
4. Record et rapport: documentez soigneusement l'incident et signalez des événements indésirables sévères selon les protocoles de l'hôpital.

Iii. Considérations spéciales pour différents types de biopsie

Type de biopsie Complications à haut risque Mesures préventives Les saignements de biopsie endoscopique, perforation Évitez les piqûres de tissus profonds, utilisez l'électrocauserie pour les zones vasculaires.

Biopsie pulmonaire pneumothorax, insertion d'aiguille d'exhalation finale de l'hémoptysie, radiographie thoracique postopératoire immédiate.

Biopsie hépatique Saignement, fuite de la bile guidée par ultrasons pour éviter les principaux vaisseaux sanguins et les canaux biliaires, appliquez un pansement de pression après l'opération.

Biopsie de la prostate Hématurie, infection Préparation intestinale préopératoire, antibiotiques prophylactiques.

Vii. Analyse des données (a) Taille de l'échantillon La taille de l'échantillon de cette étude n'est pas basée sur des tests d'hypothèse statistique. Environ 50 sujets devraient être inscrits.

(B) Méthodes statistiques

1. Les méthodes de base, sauf indication contraire, les données de cette étude seront résumées à l'aide de statistiques descriptives. Les données catégorielles seront présentées sous forme de dénombrements de fréquences (n) et de pourcentages (%), avec des intervalles de confiance à 95% (IC) si nécessaire. Les variables continues seront résumées en utilisant la moyenne, l'écart type (SD), la médiane, le minimum et le maximum. Les données de temps à événement seront analysées à l'aide d'estimations de Kaplan-Meier avec des courbes de survie et des IC à 95%. Les données pharmacocinétiques (PK) seront résumées en utilisant la moyenne, la moyenne géométrique, le SD, le coefficient de variation (CV), le CV géométrique, la médiane, le maximum et le minimum, le cas échéant.
2. Analyse de l'efficacité

1. Analyse d'efficacité primaire:

   Le critère d'évaluation de l'efficacité principale est le taux de réponse objectif (ORR). Les statistiques descriptives résumeront la meilleure réponse globale (BOR) entre les cohortes et les bras de traitement. Le nombre et la proportion de répondants (CR + PR) seront fournis, et l'IC à 95% pour l'ORR sera estimé à l'aide de la méthode Clopper-Pearson. La différence ORR entre les groupes A et B dans chaque cohorte sera résumé à l'aide de statistiques descriptives, et l'IC à 95% sera calculé en utilisant la méthode d'approximation normale.

2. Analyse d'efficacité secondaire:

Le taux de contrôle de la maladie (DCR) sera analysé de manière similaire à l'ORR. Pour les critères d'évaluation de l'efficacité tels que la durée de la réponse (DOR), la survie sans progression (PFS) et la survie globale (OS), la méthode de Kaplan-Meier sera utilisée pour estimer les temps médians et les courbes de survie des parcelles. L'IC à 95% pour les estimations médianes sera calculée à l'aide de la méthode Brookmeyer-Crowley. Le taux d'OS à 12 mois et son IC à 95% seront estimés à l'aide de la transformation log (-log) et de la transformation en arrière en fonction de l'approximation normale.

3. Microenvironnement immunitaire tumoral (temps) La cartographie du temps est un outil de visualisation utilisé pour décrire la composition cellulaire et les interactions au sein du microenvironnement tumoral. Il donne un aperçu de la distribution spatiale de divers types de cellules tels que les cellules tumorales, les cellules immunitaires et les cellules stromales.

1. Logiciel CellRanger et SEURAT:

   - CellRanger: un outil d'analyse pour les données de séquençage d'ARN unique qui génère des matrices d'expression génique et effectue un traitement initial des données.

   - SEURAT: un package R pour l'analyse des données de séquençage d'ARN unique, offrant des fonctionnalités telles que le prétraitement des données, le regroupement et la visualisation.

2. t-sne et umap:

   • Le T-SNE (intérim des voisins stochastiques en T) et UMAP (approximation et projection uniformes) sont des techniques de réduction de la dimensionnalité qui projettent des données de grande dimension (par exemple, des données d'expression génique) en espace bidimensionnel ou tridimensionnel pour la visualisation.
   • Ces méthodes préservent la structure des données locales et aident à identifier différentes populations de cellules.

3. Analyse du clustering cellulaire:

   - Après la réduction de la dimensionnalité, les cellules sont regroupées en fonction des modèles d'expression génique. Les cellules similaires sont regroupées, tandis que les cellules différentes sont séparées.

4. Gènes marqueurs:

   • Les gènes marqueurs sont caractéristiques de types de cellules spécifiques. En analysant leur expression, les chercheurs peuvent identifier divers types de cellules dans le tissu tumoral.

   Dans le microenvironnement immunitaire tumoral (temps), les types de cellules suivants sont d'un intérêt principal:

   Cellules tumorales: cellules cancéreuses dans le tissu tumoral.

   Cellules immunitaires:

   - cellules T: responsable de la réponse immunitaire cellulaire.

   • Cellules B: cellules productrices d'anticorps.
   • Cellules NK: cellules tueuses naturelles impliquées dans l'immunité antitumorale.
   • Monocytes et macrophages: participer aux réponses immunitaires et élimination des débris cellulaires.
   • Cellules dendritiques: cellules immunitaires présentant l'antigène.

   Cellules stromales:

   • Fibroblastes: impliqués dans la réparation des tissus et la formation de matrice extracellulaire.
   • Cellules endothéliales: constituent des vaisseaux sanguins.
   • Cellules mésothéliales: couvrir les cavités corporelles.