Exploração das mudanças e mecanismos dinâmicos do microambiente imunológico em câncer colorretal avançado tratado com terapia combinada IBI363

Exploração das alterações e mecanismos dinâmicos do microambiente imunológico em câncer colorretal avançado tratado com IBI363 Protocolo de Estudo de Terapia Combinado de Ibi363 Versão no.: 1.0.0 Data da versão: 2 de dezembro de 2024 I. Estudo Câncer colorretal (CRC) é o quinto tumor maligno mais comum na população chinesa. Na prática clínica atual, os tratamentos padrão de primeira e segunda linha para o CRC de reparo de incompatibilidade (MSS)/Mismatch (PMMR) da Microssatellite estável (PMMR) são baseados em regimes de quimioterapia combinados com vários medicamentos combinados com terapias direcionadas. Esses regimes incluem quimioterapia à base de fluoropirimidina (5-fluorouracil [5-FU], leucovorina ou capecitabina) em combinação com oxaliplatina ou irinotecano, com ou sem anticorpos monoclonais direcionados. Após a progressão da doença após o tratamento de segunda linha, as opções de tratamento aprovadas na China incluem regorafenibe, fruquintinibe e TAS-102; No entanto, seus benefícios clínicos permanecem insatisfatórios, com taxas de resposta objetivas (ORR) de 1-4%, sobrevida livre de progressão (PFS) de 2-3 meses e sobrevida global (OS) de 6 a 9 meses de acordo com os respectivos rótulos de drogas. Atualmente, a imunoterapia é aprovada apenas para o CRC metastático com o status de alta instabilidade de microssatélites (MSI-H) ou reparo de incompatibilidade deficiente (DMMR). Em resumo, a eficácia do tratamento para CRC avançada permanece limitada, destacando a necessidade urgente de novos medicamentos e estratégias terapêuticas para melhorar os resultados dos pacientes.

O IBI363 é uma molécula biespecífica recombinante que consiste em um anticorpo anti-programado receptor 1 (PD-1) fundido com interleucina-2 (IL-2), administrado como uma formulação injetável. Ele bloqueia a via PD-1/PD-L1 enquanto ativa a via de sinalização da IL-2, revertendo assim a exaustão das células T e promovendo a ativação das células T/NK. Em 31 de julho de 2023, um total de 169 participantes foi incluído no estudo CIBI363A102, incluindo 22 participantes da Parte A (fase acelerada de titulação e boin) e 147 na Parte B (fase de expansão da dose). Em relação à eficácia, na fase de escalada da dose, 21 participantes foram avaliados quanto à eficácia, com três participantes no grupo de dose de 100-300 μg/kg QW alcançando uma melhor resposta do tumor da resposta parcial (PR). Na fase de expansão da dose, 76 participantes foram avaliados quanto à eficácia, com seis participantes no grupo de dose de 100-1000 μg/kg de QW alcançando RP.

Está bem estabelecido que o sistema imunológico pode eliminar as células tumorais através do ciclo de imunidade do câncer. No entanto, esse processo não é sustentado, pois os tumores podem moldar gradualmente o microambiente imunológico do tumor (tempo) em um estado imunossupressor para combater a imunidade do hospedeiro. O equilíbrio entre mediadores inflamatórios pró-tumoral e antitumoral pode determinar a progressão do tumor (Figura 1). As células imunes antitumorais incluem principalmente células T efetoras (como células T CD8+ citotóxicas e células T CD4+ efetoras), células assassinas naturais (NK), células dendríticas (DCs) e macrófagos polarizados em M1. As células imunes pró-tumores consistem principalmente em células T reguladoras (Tregs), células supressoras derivadas de mielóides (MDSCs), macrófagos associados ao tumor (TAMs), macrófagos polarizados por M2, neutrófilos polarizados de N2 e células linfóides inatos do tipo 2 (Ilc2s). Os tumores desenvolveram vários mecanismos para evitar a vigilância imunológica, como a apresentação do antígeno defeituoso, a regulação positiva de vias regulatórias imunes negativas e o recrutamento de células imunes pró-tumorais. Como resultado, a função das células imunes antitumorais é suprimida e a resposta imune antitumoral é difícil de sustentar. O objetivo da imunoterapia é restaurar a função citotóxica das células imunes antitumorais, particularmente os linfócitos T citotóxicos (CTLs), contra tumores. Portanto, investigar a função e os mecanismos de diferentes componentes imunes dentro do tempo ajudará a melhorar as taxas de resposta à imunoterapia e facilitar o desenvolvimento de novas estratégias imunoterapêuticas.

Figura 1. Células imunológicas associadas ao tumor no microambiente tumoral com o rápido desenvolvimento e iteração de tecnologias omics, como a imuno-histoquímica multiplex (MIHC), o sequenciamento de transcriptoma único de células (SCRNA-seq) e o transcriptoma spatial.

Este estudo tem como objetivo inscrever pacientes com câncer colorretal MSS/PMMR avançado (CRC) e realizar sequenciação de transcriptoma de célula única na linha de base e amostras de tecido de acompanhamento. O objetivo é mapear dinamicamente a heterogeneidade espacial e a paisagem evolutiva do microambiente imunológico do tumor (tempo) ao longo do curso da doença, do diagnóstico inicial à progressão da doença. Ao analisar o tempo em diferentes momentos, procuramos elucidar os potenciais mecanismos de ação do IBI363 no câncer colorretal. Além disso, aproveitaremos análises transcriptômicas espaço -temporais para validar as interações de subpopulação celular in situ no microambiente tumoral.

Ii. Objetivos da pesquisa Este estudo tem como objetivo coletar e integrar dados de ensaios clínicos de pacientes submetidos à imunoterapia tumoral e conduzir mineração detalhada de dados para mapear dinamicamente a heterogeneidade espacial e a paisagem evolutiva dos pacientes com microambiente imune do tumor (tempo) durante a progressão da doença no câncer colorretal (CRC).

Do ponto de vista do tempo, investigaremos os possíveis mecanismos de ação do IBI363 na terapia combinada em comparação com os tratamentos de controle na CRC. Além disso, analisando mecanismos de resistência e evasão imune, este estudo busca fornecer uma base mecanicista para diagnóstico de precisão, otimização do tratamento e futuras tomadas de decisão terapêutica para pacientes com CRC.

Iii. Conteúdo de pesquisa

1. Mapeando o microambiente imune do tumor (tempo) em pacientes com MSS/PMMR CRC avançado Este estudo planeja inscrever 50 pacientes com câncer colorretal avançado de microssatélites-estáveis/proficientes de incompatibilidade (MSS/PMMR) (CRC) que recebe terapia combinada com o agente imunoterapêutico IBI363 e o BC) e o agente imunoterapêutico IBI363 e o BC) e o agente imunoterapêutico IBI363 e o BC) e o BC) e o agente imunoterapêutico IBI363 e o seio do agente imunoterapêutico. Os tecidos tumorais serão coletados em diferentes momentos durante o tratamento (linha de base e após cada dois ciclos de tratamento para avaliação de eficácia) através da biópsia tecidual (incluindo biópsia do núcleo da agulha ou biópsia endoscópica de fórceps).

   Uma parte das amostras de tecido coletadas passará por sequenciamento de RNA de célula única de 10 × genômica 3 '(scRNA-seq), enquanto outra parte será incorporada para parafina para a análise de imuno-histoquímica multiplex subsequente (MIHC)/imunofluorescência (se). A análise de cluster de células será realizada usando o software CellRanger ou Seurat com base nos perfis de expressão gênica via métodos de redução de dimensionalidade T-SNE e UMAP. Populações de células tumorais e de células imunológicas, incluindo células T, células B, células assassinas naturais (NK), monócitos, macrófagos, células dendríticas (DCs) e células estromais, como fibroblastos, células endoteliais e células metoteléticas que se identificam com base em genes marcadores, construindo um número de células-integradas.

2. Identificando os biomarcadores preditivos da eficácia do IBI363, comparando as diferenças de tempo em respondedores e não respondedores entre os 50 pacientes com CRC inscritos, aproximadamente 30 receberão terapia combinada de IBI363, enquanto 20 serão submetidos a tratamento de controle. Com base nos dados de acompanhamento, os pacientes serão estratificados em grupos de respondentes (CR+PR) e não-resposta (SD+PD). Ao comparar os resultados do cluster de linha de base e os perfis de expressão do gene marcador entre os dois grupos, pretendemos identificar subpopulações celulares, vias de sinalização enriquecidas ou assinaturas de expressão gênica significativamente associadas à eficácia terapêutica e benefício do paciente.

   A transcriptômica espacial será usada para mapear as relações espaciais entre as principais subpopulações celulares e os padrões de expressão gênica, permitindo a identificação dos biomarcadores preditivos mais relevantes associados à resposta do tratamento.

3. Investigando o impacto do IBI363 no tempo e seu potencial mecanismo de ação, realizando sequenciamento de célula única nos tecidos tumorais na linha de base e pós-tratamento (ciclo 2) em todos os pacientes, realizaremos a análise de trajetória de pseudotime para estudar a dinâmica de diferenciação das populações celulares. As análises baseadas em integridade de RNA serão usadas para inferir trajetórias de desenvolvimento celular, enquanto as análises de interação receptor-ligante fornecerão informações sobre redes de comunicação intercelular.

Essa abordagem abrangente nos permitirá caracterizar sistematicamente os efeitos de remodelação de diferentes regimes de tratamento nas células tumorais e populações de células imunossupressoras dentro do microambiente tumoral, incluindo células intratumorais de Treg, macrófagos associados a tumores (TAMs), células suprimas de MDSCs (MDSCs) e M2r). Por fim, este estudo tem como objetivo descobrir as possíveis implicações clínicas de diferentes subtipos celulares na imunoterapia para a CRC.

IV. Rota técnica

V. Critérios de inclusão e critérios de exclusão para participantes do estudo

Critérios de inclusão:

1. O participante deve assinar um formulário de consentimento informado por escrito (ICF) e poder cumprir o cronograma de visita especificado pelo protocolo e os procedimentos relacionados.
2. Idade ≥ 18 anos e ≤75 anos, sem restrições de gênero.
3. Diagnóstico histologicamente ou citologicamente confirmado de tumores malignos avançados, atendendo aos seguintes critérios específicos da coorte:

Coorte 2:

• Pacientes com câncer colorretal avançado confirmado histopatologicamente (CRC).
• Confirmado localmente como incompatibilidade de reparo (PMMR)/microssatélite Instabilidade-baixa (MSI-L) ou estábulo de microssatélites (MSS) com base em testes padrão.

Coorte 9:

• Pacientes com câncer colorretal avançado confirmado histopatologicamente (CRC).
• Confirmado localmente como incompatibilidade de reparo (PMMR)/microssatélite Instabilidade-baixa (MSI-L) ou estábulo de microssatélites (MSS) (se os resultados de testes aplicáveis ​​estiverem disponíveis).
• A imagem basal deve indicar a ausência de metástases hepáticas ativas. Nota: Pacientes com metástases hepáticas previamente tratadas (incluindo ressecção cirúrgica, ablação por microondas ou radiofrequência ou radioterapia estereotática, mas excluindo quimioembolização transarterial) são elegíveis se receberam tratamento definitivo pelo menos 6 meses antes do estudo do estudo e a imagem subsequente confirmará o aço de fóssea de fósseis.

Critérios de exclusão

1. Mulheres grávidas ou amamentando, ou mulheres que planejam engravidar antes, durante ou dentro de 6 meses após a última administração do medicamento do estudo.

2. Metástases do sistema nervoso central ativo ou não tratado (SNC), confirmadas por imagem durante a triagem ou avaliações anteriores (por exemplo, metástases cerebrais ou leptomeningeais).

   • Pacientes com metástases cerebrais assintomáticas podem participar.
   • Pacientes que receberam tratamento para metástases cerebrais e têm sido sintomaticamente estáveis ​​por ≥2 semanas sem evidências de lesões novas ou ampliadas também podem ser elegíveis, desde que atendam a todos os seguintes:
   • Presença de doença extracraniana mensurável.
   • Sem metástases nas meninges, mesencéfalo, ponte, medula ou medula espinhal e nenhuma metástases cerebelares múltiplas.
   • Nenhuma compressão do aqueduto cerebral, terceiro ou quarto ventrículo ou medula espinhal.
   • Descontinuação da terapia com esteróides pelo menos 14 dias antes da primeira dose de medicamento em estudo.
3. Trombose ativa, trombose venosa profunda (TVP) ou embolia pulmonar dentro de 4 semanas antes da primeira administração do medicamento do estudo, a menos que seja tratado e considerado adequadamente estável pelo investigador.

4. Doenças cardiovasculares ou cerebrovasculares clinicamente significativas, incluindo, entre outros,:

   • Arritmias ventriculares ou outras arritmias cardíacas não controladas que requerem intervenção médica (por exemplo, terapia antiarrítmica).
   • Distúrbios graves de condução (por exemplo, bloqueio atrioventricular de terceiro grau).
   • Intervalo QTC (corrigido pela fórmula de Fridericia) ≥480 ms.
   • Hipertensão arterial não controlada, apesar do tratamento padrão (PA sistólica ≥160 mmHg ou PA diastólica ≥100 mmHg).
   • História da miocardite.
   • Insuficiência cardíaca congestiva que requer tratamento contínuo.
   • Fração de ejeção do ventrículo esquerdo (FEVE) <50%.
   • Doença Cardiovascular Classe III ou IV da Associação de Coração do Coração de Nova York (NYHA).
   • Síndrome coronariana aguda (por exemplo, infarto do miocárdio, angina instável), angioplastia coronariana ou posicionamento de stent dentro de 6 meses antes do primeiro estudo da administração de medicamentos.
   • AVC ou ataque isquêmico transitório dentro de 6 meses antes do primeiro estudo da Administração de Medicamentos.
   • Convulsões ativas conhecidas.
5. Doença pulmonar intersticial (DPI), fibrose pulmonar, pneumoconiose, pneumonite induzida por drogas, pneumonite por radiação que requer tratamento com esteróides ou disfunção pulmonar grave/doença pulmonar restritiva.
6. História da diátese alérgica, asma ou dermatite atópica.
7. Efusões pleurais, pericárdicas ou peritoneais recorrentes ou peritoneais que exigem drenagem repetida.
8. Doenças auto -imunes ativas que exigem terapia sistêmica dentro de 2 anos antes da primeira administração de medicamentos do estudo (exceto terapias de reposição como hormônio da tireóide, insulina ou corticosteróides para insuficiência adrenal ou pituitária).
9. História do transplante de órgãos alogênicos ou transplante de células -tronco hematopoiéticas alogênicas.
10. Hipersensibilidade conhecida ou suspeita ao medicamento de estudo ou qualquer excipiente.
11. História de toxicidade significativa relacionada ao inibidor de ponto de verificação imune que requer descontinuação permanente.

12. Toxicidade não resolvida> 1 de tratamentos antitumorais anteriores, exceto::

    • Alopecia persistente de grau 2, neuropatia periférica ou hipomagnesemia.
    • Toxicidades controladas e estáveis ​​(por exemplo, hipotireoidismo gerenciadas com reposição hormonal ou hipertensão controlada para <160/100 mmHg com terapia anti -hipertensiva).
13. Recuperação incompleta da cirurgia ou grande cirurgia dentro de 4 semanas antes da primeira administração de medicamentos de estudo.
14. Distúrbios de sangramento ativos e não controlados ou sangramentos conhecidos.

15. Doenças gastrointestinais significativas dentro de 6 meses antes da primeira administração de medicamentos de estudo, incluindo, entre outros,:

    • História da doença inflamatória intestinal (DII).
    • ≥ grau 2 diarréia dentro de 2 semanas antes da primeira administração de medicamentos de estudo.
    • Enterite por radiação.
16. Dor não relacionada ao tumor não controlada ou hipercalcemia sintomática.

17. Infecção conhecida do HIV, hepatite B ativa (HBV), hepatite C (HCV) ou tuberculose ativa:

    • Os pacientes positivos para HBV devem passar por testes de DNA do HBV. Os pacientes são elegíveis se o DNA do HBV for ≤2,5 × 10³ cópias/ml ou ≤500 UI/ml.
    • Os pacientes positivos para HBSAG devem receber terapia antiviral durante o estudo para evitar a reativação.
    • Pacientes com HBCAB (+), HBSAG (-), HBS (-) e HBV DNA (-) não requerem profilaxia antiviral, mas devem ser monitorados de perto para a reativação.
    • Pacientes seropositivos para HCV com RNA de HCV negativo ou indetectável são elegíveis.
    • Os pacientes que concluíram o tratamento com HCV e alcançaram uma carga viral indetectável são elegíveis.
18. Infecções graves/não controladas que exigem antibióticos IV dentro de 2 semanas antes da primeira administração de medicamentos de estudo ou febre inexplicável (> 38 ° C).
19. Diagnóstico de outra malignidade nos últimos 5 anos, exceto para carcinoma de células basais/escamosas de tratado curativamente tratado, carcinoma in situ, câncer de próstata localizado ou carcinoma papilar da tireóide.

20. Medicamentos e terapias proibidos, incluindo, entre outros,:

    • Citocinas IL-2/IL-15 (exceto seu uso na terapia celular adotiva ou modulação imunológica em pacientes imunocomprometidos).
    • Quimioterapia ou terapia direcionada por moléculas pequenas dentro de 2 semanas (ou 5 meias-vidas) antes da primeira administração de medicamentos para estudar, a menos que nenhuma toxicidade atrasada seja esperada. Exceções:
    • Nitrosoureas e mitomicina C requerem um período de lavagem de 6 semanas.
    • Terapias à base de anticorpos dentro de 4 semanas antes da primeira administração de medicamentos de estudo.
    • Participação em outro estudo intervencionista dentro de duas semanas antes do primeiro estudo da Administração de Medicamentos.
    • Radioterapia paliativa dentro de 2 semanas antes da primeira administração de medicamentos do estudo.
    • Vacinas vivas dentro de 4 semanas antes do primeiro estudo da Administração de Medicamentos.
    • Terapia imunossupressora ou corticosteróides sistêmicos (> 10 mg/dia de prednisona equivalente) dentro de 2 semanas antes da primeira administração de medicamentos do estudo.
    • Medicina tradicional chinesa com efeitos antitumorais conhecidos dentro de 1 semana antes do primeiro estudo da Administração de Medicamentos.

21. Contra -indicações para terapias combinadas, incluindo, entre outros,:

    • UGT1A1*6/*6, UGT1A1*28/*28 ou UGT1A1*6/*28 genótipos, o que pode afetar o metabolismo irinotecano.
    • A radioterapia abdominal/pélvica anterior, avaliada pelo investigador, que pode afetar a medula óssea ou a função gastrointestinal.
22. Qualquer condição, tratamento ou anormalidade laboratorial que, no julgamento do investigador, possa comprometer a segurança do paciente, interferir no consentimento informado, afetar a conformidade ou impactar a avaliação de medicamentos do estudo.
23. Distúrbios psiquiátricos graves, comprometimento cognitivo ou abuso de substâncias que podem interferir no processo de consentimento ou na conformidade do estudo.
24. Quaisquer outros fatores conhecidos ou previstos que, na opinião do investigador, tornariam o paciente inadequado para o estudo.

Critérios de exclusão para coortes específicas

Coorte 2:

1. Sintomas ou risco de sangramento, perfuração ou obstrução no local principal do tumor colorretal.
2. História de toxicidade significativa que exige descontinuação permanente do bevacizumabe, oxaliplatina, capecitabina ou 5-FU.
3. Alergia conhecida para estudar drogas ou excipientes.

Coorte 9:

1. História de toxicidade significativa que exige descontinuação permanente do bevacizumabe, frutinibe ou trifluridina/tipiracil, ou contra -indicações para estudar medicamentos avaliados pelo investigador.
2. Alergia conhecida para estudar drogas ou excipientes.

Vi. Plano de gerenciamento para eventos adversos comuns

I. As reações adversas mais comuns neste estudo são as associadas à biópsia tecidual. Os principais princípios e métodos da gestão são os seguintes:

1. Causa do sangramento: A biópsia induziu danos aos vasos sanguíneos (especialmente em tumores com coagulação anormal ou suprimento vascular rico).

   Sintomas: sangramento ou hematoma no local da punção; Vomitar sangue, fezes pretas (sangramento gastrointestinal) após biópsia endoscópica; O sangramento significativo pode levar à hipotensão, taquicardia e sinais de choque.

   Medidas de gerenciamento:

   • Pressão local: aplique pressão por 10 a 15 minutos para sangramento superficial; O sangramento endoscópico pode ser controlado pela pulverização de agentes hemostáticos (por exemplo, solução de epinefrina) ou eletrocautério.
   • Hemostasia farmacológica: administração intravenosa de medicamentos hemostáticos (por exemplo, ácido tranexâmico, vitamina K).
   • Intervencionista/cirúrgico: o sangramento grave pode exigir embolização vascular ou hemostasia cirúrgica.
   • Monitoramento: monitore sinais vitais, níveis de hemoglobina e sangue transfundido, se necessário.

   Prevenção:

   • Avaliação de coagulação pré -operatória (INR, plaquetas) e correção de anormalidades.
   • Evite biópsia em áreas com um alto suprimento vascular (com base na imagem).
   • Controle a pressão arterial em pacientes hipertensos antes do processo.

2. Causa da infecção: contaminação durante o procedimento ou status imunológico comprometido do paciente.

   Sintomas: vermelhidão, inchaço e formação de pus no local da punção; febre, calafrios, aumento da contagem de glóbulos brancos; infecções profundas (por exemplo, abscesso de fígado, pneumonia).

   Medidas de gerenciamento:

   • Antibióticos: antibióticos de amplo espectro (por exemplo, cefalosporinas de terceira geração) adaptadas ao local da infecção e patógenos, administração intravenosa para infecções graves.
   • Drenagem: drenagem por punção ou cirurgia se for um abscesso formar.
   • Tratamento de suporte: substituição de fluidos, antipiréticos, etc.

   Prevenção:

   • Técnica asséptica estrita, desinfecção adequada de instrumentos endoscópicos.
   • Antibióticos profiláticos para pacientes de alto risco (por exemplo, diabetes, imunossuprimidos).
   • Cuidado pós -operatório para manter o local da punção limpo e seco.

3. Dor causa: dano tecidual ou estimulação do nervo. Sintomas: dor localizada persistente, possivelmente irradiando para as áreas circundantes; dor referida após biópsia visceral (por exemplo, dor no ombro direito após biópsia do fígado) .-

   Medidas de gerenciamento:

   • Dor leve: compressa fria local, repouso, AINEs orais (por exemplo, ibuprofeno).
   • Dor grave: Após excluir sangramento ou lesão nos órgãos, os opióides fracos (por exemplo, tramadol) podem ser usados ​​a curto prazo.
   • Bloqueio nervoso: a dor persistente pode exigir tratamento intervencionista.

   Prevenção:

   • Técnica suave para evitar perfurações repetidas.
   • Anestesia local adequada (por exemplo, infiltração de lidocaína).

4. Lesão por órgãos

   Sites de alto risco:

   • Biópsia pulmonar → pneumotórax, hemopneumotórax.
   • Biópsia hepática → vazamento biliar, hemorragia biliar.
   • Biópsia intestinal endoscópica → perfuração.

   Sintomas:

   • Pneumotórax: dor torácica repentina, dispnéia, diminuição dos sons de respiração no lado afetado.
   • Perforação: dor abdominal grave, irritação peritoneal, ar livre sob o diafragma (na imagem).

   Medidas de gerenciamento:

   • Pneumotórax: pequena (compressão pulmonar <20%) → observação, oxigenoterapia; Moderada a grande → Drenagem torácica fechada.
   • Perforação: NPO, descompressão gastrointestinal, antibióticos intravenosos; Recorte endoscópico ou cirurgia de emergência.
   • Vazamento biliar: drenagem intervencionista ou gerenciamento cirúrgico.

   Prevenção:

   • Abordagem guiada por imagem para evitar estruturas críticas.
   • A profundidade da punção de controle (por exemplo, para biópsia pulmonar, inserir no final da expiração).

5. Reações alérgicas desencadeia: anestésicos locais, desinfetantes (por exemplo, tintura de iodo), látex (por exemplo, luvas).

   Sintomas: eritema da pele, coceira; edema laríngeo, broncoespasmo, choque anafilático.

   Medidas de gerenciamento:

   - Interrompa o agente ofensivo, garanta permeabilidade das vias aéreas.

   • Tratamento antiallergico:
   • Epinefrina (reação grave): 0,3-0,5mg EU SOU.
   • Corticosteróides (por exemplo, dexametasona 10mg iv).
   • Anti -histamínicos (por exemplo, difenidramina 20mg IM).
   • Gerenciamento de choque: ressuscitação de fluidos, vasopressores, RCP, se necessário.

   Prevenção:

   • História detalhada da alergia no pré -operatório.
   • Disponibilidade de medicamentos de emergência (por exemplo, epinefrina, oxigênio).

6. Reflexo do nervo vagal comum em: biópsia endoscópica ou punção estimulando o nervo vago. Sintomas: palidez, sudorese, bradicardia, hipotensão.

   Gerenciamento:

   • Pare o procedimento, coloque o paciente na posição supina.
   • Atropina 0,5mg IV (para freqüência cardíaca <50 bpm).
   • RESUSUSCITAÇÃO RÁPIDA DE FLUIDO, Vasopressores, se necessário.

   Prevenção:

   - Técnica suave, evite tração excessiva.

7. Risco de semente de tumor (raro): disseminação de células tumorais ao longo da trilha da agulha da biópsia ou caminho endoscópico de biópsia.

Gerenciamento:

• Radioterapia local ou ressecção cirúrgica.
• Monitore os sinais metastáticos (por exemplo, via acompanhamento de imagens).

Prevenção:

• Escolha o caminho mais curto da biópsia.
• Realize a desativação pós-procedimento da faixa de biópsia (por exemplo, ablação por radiofrequência).

Ii. Processo de manuseio de reação adversa

1. Avaliação imediata: monitore sinais vitais e identifique o tipo de reação adversa.

2. Estabilizar a condição:

   • Sangramento → Aplique pressão, ressuscitação de fluidos.
   • Reação alérgica → epinefrina, anti -histamínicos.
   • Pneumotórax → Oxigenoterapia, drenagem torácica.
3. Colaboração multidisciplinar: cirurgia de contato, radiologia intervencionista, UTI para assistência.
4. Record e relatório: documente o incidente minuciosamente e relate eventos adversos graves de acordo com os protocolos hospitalares.

Iii. Considerações especiais para diferentes tipos de biópsia

Tipo de biópsia Complicações de alto risco medidas preventivas Biópsia endoscópica Biópsia O sangramento, perfuração Evite picadas de tecido profundo, use eletrocautério para áreas vasculares.

Pneumotórax de biópsia pulmonar, inserção da agulha de exiniclagem final da hemoptise, radiografia de peito pós-operatório imediato.

Biópsia do fígado Sangramento, ultra-som de vazamentos biliares guiados para evitar grandes vasos sanguíneos e ductos biliares, aplique o curativo de pressão após a operação.

Hematúria da biópsia da próstata, preparação do intestino pré -operatório de infecção, antibióticos profiláticos.

Vii. Análise de dados (a) Tamanho da amostra O tamanho da amostra deste estudo não se baseia em testes estatísticos de hipóteses. Aproximadamente 50 indivíduos estão planejados para serem inscritos.

(B) Métodos estatísticos

1. Métodos básicos, a menos que especificado de outra forma, os dados deste estudo serão resumidos usando estatísticas descritivas. Os dados categóricos serão apresentados como contagem de frequência (n) e porcentagens (%), com intervalos de confiança de 95% (IC), quando necessário. As variáveis ​​contínuas serão resumidas usando a média, desvio padrão (DP), mediana, mínima e máxima. Os dados de tempo até o evento serão analisados ​​usando estimativas de Kaplan-Meier com curvas de sobrevivência e 95% de ICs. Os dados farmacocinéticos (PK) serão resumidos usando média, média geométrica, DP, coeficiente de variação (CV), CV geométrico, mediana, máxima e mínima conforme aplicável.
2. Análise de eficácia

1. Análise de eficácia primária:

   O terminal de eficácia primário é a taxa de resposta objetiva (ORR). A estatística descritiva resumirá a melhor resposta geral (BOR) entre coortes e braços de tratamento. O número e a proporção de respondedores (CR+PR) serão fornecidos e o IC de 95% para ORR será estimado usando o método Clopper-Pearson. A diferença de ORR entre os grupos A e B dentro de cada coorte será resumida usando estatísticas descritivas e o IC de 95% será calculado usando o método de aproximação normal.

2. Análise de eficácia secundária:

A taxa de controle de doenças (DCR) será analisada de maneira semelhante à ORR. Para pontos de extremidade de eficácia, como duração da resposta (DOR), sobrevida livre de progressão (PFS) e sobrevivência geral (OS), o método Kaplan-Meier será usado para estimar os tempos medianos e as curvas de sobrevivência da plotagem. O IC de 95% para estimativas medianas será calculado usando o método Brookmeyer-Crowley. A taxa de OS de 12 meses e seu IC de 95% serão estimados usando a transformação e a transformação do log (-log) com base na aproximação normal.

3. O microambiente imunológico do tumor (tempo) mapeando o mapa de tempo é uma ferramenta de visualização usada para descrever a composição celular e as interações dentro do microambiente tumoral. Ele fornece informações sobre a distribuição espacial de vários tipos de células, como células tumorais, células imunes e células estromais.

1. Cellranger e Seurat Software:

   - Cellranger: Uma ferramenta de análise para dados de sequenciamento de RNA de célula única que gera matrizes de expressão gênica e executa o processamento inicial de dados.

   - Seurat: um pacote R para análise de dados de sequenciamento de RNA de célula única, oferecendo funcionalidades como pré-processamento, agrupamento e visualização de dados.

2. t-sne e umap:

   • T-SNE (incorporação estocástica de distribuído T) e UMAP (aproximação e projeção uniforme do coletor) são técnicas de redução de dimensionalidade que projetam dados de alta dimensão (por exemplo, dados de expressão gênica) em espaço bidimensional ou tridimensional para visualização.
   • Esses métodos preservam a estrutura de dados locais e ajudam a identificar diferentes populações de células.

3. Análise de agrupamento de células:

   - Após a redução da dimensionalidade, as células são agrupadas com base nos padrões de expressão gênica. Células semelhantes são agrupadas, enquanto as células diferentes são separadas.

4. Genes marcadores:

   • Os genes marcadores são característicos de tipos de células específicos. Ao analisar sua expressão, os pesquisadores podem identificar vários tipos de células no tecido tumoral.

   No microambiente imunológico do tumor (tempo), os seguintes tipos de células são de interesse primário:

   Células tumorais: células cancerígenas dentro do tecido tumoral.

   Células imunológicas:

   - Células T: responsável pela resposta imune celular.

   • Células B: células produtoras de anticorpos.
   • Células NK: células assassinas naturais envolvidas na imunidade antitumoral.
   • Monócitos e macrófagos: participam de respostas imunes e remoção de detritos celulares.
   • Células dendríticas: células imunológicas presentes de antígeno.

   Células estromais:

   • Fibroblastos: envolvidos no reparo de tecidos e na formação da matriz extracelular.
   • Células endoteliais: constituem vasos sanguíneos.
   • Células mesoteliais: cobrem cavidades corporais.