Undersøgelse af de dynamiske ændringer og mekanismer for immunmikromiljøet i avanceret kolorektal kræft behandlet med IBI363 -kombinationsterapi

Udforskning af de dynamiske ændringer og mekanismer for immunmikromiljøet i avanceret kolorektal kræft behandlet med IBI363 -kombinationsterapiundersøgelsesprotokolversion nr.: 1.0.0 Versionsdato: 2. december 2024 I. Studiebaggrund Kolorektal kræft (CRC) rangerer som den femte mest almindelige ondartede tumor i den kinesiske befolkning. I den aktuelle kliniske praksis er standard første- og andenliniebehandlinger til metastatisk mikrosatellit-stable (MSS)/dygtige mismatch-reparation (PMMR) CRC baseret på multi-drug-kombination kemoterapiregimer kombineret med målrettede terapier. Disse regimer inkluderer fluoropyrimidinbaseret kemoterapi (5-fluorouracil [5-FU], leucovorin eller capecitabin) i kombination med oxaliplatin eller irinotecan, med eller uden målrettede monoklonale antistoffer. Efter sygdomsprogression efter andenliniebehandling inkluderer de godkendte behandlingsmuligheder i Kina regorafenib, fruquintinib og TAS-102; Deres kliniske fordele forbliver imidlertid utilfredsstillende med objektive responsrater (ORR) på 1-4%, progressionsfri overlevelse (PFS) på 2-3 måneder og samlet overlevelse (OS) på 6-9 måneder i henhold til de respektive lægemiddelmærker. Immunoterapi er i øjeblikket kun godkendt til metastatisk CRC med mikrosatellit-ustabilitetshøj (MSI-H) eller mangelfuld misforholdsreparation (DMMR) status. Sammenfattende forbliver behandlingseffektiviteten for avanceret CRC begrænset, hvilket fremhæver det presserende behov for nye lægemidler og terapeutiske strategier for at forbedre patientens resultater.

IBI363 er et rekombinant bispecifikt molekyle bestående af en anti-programmeret dødsreceptor 1 (PD-1) antistof smeltet med interleukin-2 (IL-2), administreret som en injicerbar formulering. Den blokerer PD-1/PD-L1-stien, mens den aktiverer IL-2-signalvejen og vender derved T-celle-udmattelse og fremmer T/NK-celleaktivering. Pr. 31. juli 2023 blev i alt 169 deltagere indskrevet i CIBI363A102 -undersøgelsen, herunder 22 deltagere i del A (accelereret titrering og Boin -fase) og 147 i del B (dosis ekspansionsfase). Med hensyn til effektivitet i dosis-eskaleringsfasen var 21 deltagere evaluerbare for effektivitet, hvor tre deltagere i 100-300 μg/kg QW-dosisgruppen opnåede en bedste tumorrespons af delvis respons (PR). I dosis-ekspansionsfasen kunne 76 deltagere evalueres for effektivitet, hvor seks deltagere i 100-1000 μg/kg QW-dosisgruppen opnåede PR.

Det er veletableret, at immunsystemet kan eliminere tumorceller gennem kræftimmunitetscyklus. Imidlertid opretholdes denne proces ikke, da tumorer gradvist kan forme tumorimmunmikromiljøet (tid) til en immunsuppressiv tilstand for at modvirke værtsimmunitet. Balancen mellem pro-tumor og antitumorinflammatoriske mediatorer kan bestemme tumorprogression (figur 1). Anti-tumorimmunceller inkluderer primært effektor-T-celler (såsom cytotoksiske CD8+ T-celler og effektor CD4+ T-celler), naturlige dræber (NK) celler, dendritiske celler (DC'er) og M1-polariserede makrofager. Pro-tumorimmunceller består hovedsageligt af regulatoriske T-celler (TREG'er), myeloide-afledte suppressorceller (MDSC'er), tumorassocierede makrofager (TAM'er), M2-polariserede makrofager, N2-polariserede neutrofiler og type 2 medfødte lymfoide celler (ILC2S). Tumorer har udviklet forskellige mekanismer til at undgå immunovervågning, såsom defekt antigenpræsentation, opregulering af negative immunregulerende veje og rekruttering af pro-tumor immunceller. Som et resultat undertrykkes funktionen af ​​anti-tumorimmunceller, og antitumorimmunresponsen er vanskelig at opretholde. Målet med immunterapi er at gendanne den cytotoksiske funktion af anti-tumorimmunceller, især cytotoksiske T-lymfocytter (CTL'er), mod tumorer. Derfor vil det at undersøge funktionen og mekanismerne for forskellige immunkomponenter inden for tiden hjælpe med at forbedre immunterapi -responsraterne og lette udviklingen af ​​nye immunoterapeutiske strategier.

Figur 1.Tumor-associerede immunceller i tumormikromiljøet med den hurtige udvikling og iteration af omics-teknologier, såsom multiplex-immunohistokemi (MIHC), enkeltcelletranscriptom-sekventering (SCRNA-seq) og rumlige transkriptomesekvenser (STRNA-seq), kan vi nu undersøge individuelle celler eller specifikke cellulære subpopuleringer ved en højere opløsning.

Denne undersøgelse sigter mod at tilmelde patienter med avanceret MSS/PMMR-kolorektal kræft (CRC) og udføre enkeltcelletranskriptom-sekventering på baseline- og opfølgningsvævsprøver. Målet er at dynamisk kortlægge den rumlige heterogenitet og det evolutionære landskab af tumorimmunmikromiljøet (tid) i hele sygdomsforløbet, fra initial diagnose til sygdomsprogression. Ved at analysere tid på forskellige tidspunkter søger vi at belyse de potentielle virkningsmekanismer for IBI363 i kolorektal kræft. Desuden vil vi udnytte spatiotemporale transkriptomiske analyser for at validere cellesubpopulationsinteraktioner in situ inden for tumormikromiljøet.

Ii. Forskningsmål Denne undersøgelse har til formål at indsamle og integrere kliniske forsøgsdata fra patienter, der gennemgår tumorimmunoterapi og gennemfører dybdegående datamining for dynamisk at kortlægge den rumlige heterogenitet og evolutionære landskab hos tumorimmunmikromiljøet (tid) i hele sygdomsprogressionen hos farvekræft (CRC) patienter.

Fra tidsperspektivet vil vi undersøge de potentielle virkningsmekanismer for IBI363 i kombinationsterapi sammenlignet med kontrolbehandlinger i CRC. Ved at analysere resistens- og immununddragelsesmekanismer søger denne undersøgelse desuden at tilvejebringe et mekanistisk fundament for præcisionsdiagnose, behandlingsoptimering og fremtidig terapeutisk beslutningstagning for CRC-patienter.

III. Forskningsindhold

1. Kortlægning af tumorimmunmikromiljøet (TIME) hos patienter med avanceret MSS/PMMR CRC Denne undersøgelse planlægger at tilmelde 50 patienter med avanceret mikrosatellitstabil/dygtig misforholdsreparation (MSS/PMMR) kolorektal kræft (CRC), der modtager kombinationsterapi med det immunoterapeutiske middel IBI363 og bevacizumab plus kemoterapi. Tumorvæv indsamles på forskellige tidspunkter under behandlingen (baseline og efter hver to behandlingscyklusser til effektivitetsevaluering) gennem vævsbiopsi (inklusive kerne nålbiopsi eller endoskopisk pincet -biopsi).

   En del af de indsamlede vævsprøver vil gennemgå 10 × Genomics 3 'enkeltcelle-RNA-sekventering (SCRNA-seq), mens en anden del vil være paraffinindlejret til efterfølgende multipleximmunohistokemi (MIHC)/immunofluorescens (IF) analyse. Celleklyngeanalyse udføres ved hjælp af cellranger eller seurat-software baseret på genekspressionsprofiler via T-SNE og UMAP-dimensionalitetsreduktionsmetoder. Tumor- og immuncellepopulationer-inklusive T-celler, B-celler, naturlige dræber (NK) -celler, monocytter, makrofager, dendritiske celler (DC'er) og stromale celler, såsom fibroblaster, endotelceller og mesothelceller-vil være identificeret baseret på markørgener, der konstruerer et omfattende tidslandskab.

2. Identificering af forudsigelige biomarkører for IBI363-effektivitet ved at sammenligne tidsforskelle i respondenter og ikke-responderende blandt de 50 tilmeldte CRC-patienter, ca. 30 vil modtage IBI363-kombinationsterapi, mens 20 vil gennemgå kontrolbehandling. Baseret på opfølgningsdata vil patienter blive stratificeret til responder (CR+PR) og ikke-responder (SD+PD) -grupper. Ved at sammenligne baseline -klyngeresultater og markørgenekspressionsprofiler mellem de to grupper sigter vi mod at identificere cellesubpopulationer, berigede signalveje eller genekspressionsunderskrifter signifikant forbundet med terapeutisk effektivitet og patientfordel.

   Rumlig transkriptomik vil blive brugt til at kortlægge de rumlige forhold mellem nøglecelle -underpopulationer og genekspressionsmønstre, hvilket muliggør identifikation af de mest relevante forudsigelige biomarkører forbundet med behandlingsrespons.

3. Undersøgelse af virkningen af ​​IBI363 til tiden og dens potentielle virkningsmekanisme ved at udføre enkeltcelle-sekventering på tumorvæv ved baseline og efterbehandling (cyklus 2) på tværs af alle patienter, vil vi udføre pseudotime-baneanalyse for at undersøge differentieringsdynamikken i cellulære populationer. RNA-integritetsbaserede analyser vil blive brugt til at udlede cellulære udviklingsbaner, mens receptor-ligand-interaktionsanalyser vil give indsigt i intercellulære kommunikationsnetværk.

Denne omfattende tilgang giver os mulighed for systematisk at karakterisere ombygningseffekterne af forskellige behandlingsregimer på tumorceller og immunsuppressive cellepopulationer inden for tumormikromiljøet, herunder intratumorale Treg-celler, tumorassocierede makrofager (TAM'er), myeloid-derived-underpressorceller (MDSCS) og M2-makrofager. I sidste ende sigter denne undersøgelse at afdække de potentielle kliniske implikationer af forskellige cellulære undertyper i immunterapi til CRC.

IV.Teknisk rute

V. Inkluderingskriterier og ekskluderingskriterier for undersøgelsesdeltagere

Inkluderingskriterier:

1. Deltageren skal underskrive en skriftlig informeret samtykkeformular (ICF) og være i stand til at overholde den protokolspecificerede besøgsplan og relaterede procedurer.
2. Alder ≥18 år og ≤75 år uden kønsbegrænsninger.
3. Histologisk eller cytologisk bekræftet diagnose af avancerede maligne tumorer, der opfylder følgende kohortspecifikke kriterier:

Kohort 2:

• Patienter med histopatologisk bekræftet avanceret kolorektal kræft (CRC).
• Lokalt bekræftet som Mismatch Repair-Proficient (PMMR)/Microsatellite Instability-Low (MSI-L) eller Microsatellite Stable (MSS) baseret på standardtest.

Kohort 9:

• Patienter med histopatologisk bekræftet avanceret kolorektal kræft (CRC).
• Lokalt bekræftet som Mismatch Repair-Proficient (PMMR)/Microsatellite Instability-Low (MSI-L) eller Microsatellite Stable (MSS) (hvis relevant testresultater er tilgængelige).
• Baselineafbildning skal indikere fraværet af aktive levermetastaser. Bemærk: Patienter med tidligere behandlede levermetastaser (inklusive kirurgisk resektion, mikrobølgeovn eller radiofrekvensablation eller stereotaktisk strålebehandling, men eksklusive transarterial kemoembolisering) er berettigede, hvis de modtog en definitiv behandling mindst 6 måneder før undersøgelsesregistrering og efterfølgende billeddannelse bekræfter fraværet af levermetastaser.

Ekskluderingskriterier

1. Gravide eller ammende kvinder eller kvinder, der planlægger at blive gravide før, under eller inden for 6 måneder efter den sidste administration af undersøgelsesmedicinen.

2. Aktive eller ubehandlede centralnervesystem (CNS) metastaser, bekræftet ved billeddannelse under screening eller tidligere evalueringer (f.eks. Hjerne- eller leptomeningeal metastaser).

   • Patienter med asymptomatiske hjernemetastaser kan deltage.
   • Patienter, der har modtaget behandling af hjernemetastaser og har været symptomatisk stabile i ≥2 uger uden bevis for nye eller forstørrede læsioner, kan også være berettigede, forudsat at de opfylder alle følgende:
   • Tilstedeværelse af målbar ekstrakraniel sygdom.
   • Ingen metastaser i meningerne, mellemhjernen, pons, medulla eller rygmarv og ingen flere cerebellare metastaser.
   • Ingen komprimering af cerebral akvedukt, tredje eller fjerde ventrikel eller rygmarv.
   • Afbrydelse af steroidbehandling mindst 14 dage før den første dosis af undersøgelsesmedicin.
3. Aktiv trombose, dyb venetrombose (DVT) eller lungeemboli inden for 4 uger før den første administration af undersøgelsesmedicinen, medmindre det er tilstrækkeligt behandlet og betragtes som stabil af efterforskeren.

4. Klinisk signifikante hjerte -kar -eller cerebrovaskulære sygdomme, herunder men ikke begrænset til:

   • Ventrikulære arytmier eller andre ukontrollerede hjertearytmier, der kræver medicinsk indgriben (f.eks. Antiarytmisk terapi).
   • Alvorlige ledningsforstyrrelser (f.eks. Tredje-graders atrioventrikulær blok).
   • QTC -interval (korrigeret af Fridericias formel) ≥480 ms.
   • Ukontrolleret arteriel hypertension trods standardbehandling (systolisk BP ≥160 mmHg eller diastolisk BP ≥100 mmHg).
   • Historie om myocarditis.
   • Kongestiv hjertesvigt, der kræver løbende behandling.
   • Venstre ventrikulær ejektionsfraktion (LVEF) <50%.
   • New York Heart Association (NYHA) Klasse III eller IV Kardiovaskulær sygdom.
   • Akut koronarsyndrom (f.eks. Myokardieinfarkt, ustabil angina), koronar angioplastik eller stentplacering inden for 6 måneder før den første undersøgelsesmedicinske administration.
   • Slag eller kortvarigt iskæmisk angreb inden for 6 måneder før den første undersøgelsesmedicinske administration.
   • Kendte aktive anfald.
5. Interstitial lungesygdom (ILD), lungefibrose, pneumokoniose, medikamentinduceret pneumonitis, stråling pneumonitis, der kræver steroidbehandling eller svær lungedysfunktion/restriktiv lungesygdom.
6. Historie om allergisk diatese, astma eller atopisk dermatitis.
7. Tilbagevendende eller symptomatisk pleural, perikardial eller peritoneale effusioner, der kræver gentagen dræning.
8. Aktive autoimmune sygdomme, der kræver systemisk terapi inden for 2 år før den første undersøgelseslægemiddeladministration (bortset fra erstatningsterapier, såsom skjoldbruskkirtelhormon, insulin eller kortikosteroider til binyre eller hypofyseinsufficiens).
9. Historie om allogen organtransplantation eller allogen hæmatopoietisk stamcelletransplantation.
10. Kendt eller mistænkt overfølsomhed over for undersøgelsesmedicin eller eventuelle excipienser.
11. Historie om signifikant immuncheckpointinhibitorrelateret toksicitet, der kræver permanent seponering.

12. Uopløst grad> 1 toksicitet fra tidligere antitumorbehandlinger, bortset fra:

    • Vedvarende grad 2 alopecia, perifer neuropati eller hypomagnesæmi.
    • Stabile, kontrollerede toksiciteter (f.eks. Hypothyreoidisme styret med hormonerstatning eller hypertension kontrolleret til <160/100 mmHg med antihypertensiv terapi).
13. Ufuldstændig bedring fra kirurgi eller større kirurgi inden for 4 uger før den første undersøgelsesmedicinsk administration.
14. Aktiv, ukontrolleret blødning eller kendte blødningsforstyrrelser.

15. Væsentlige gastrointestinale sygdomme inden for 6 måneder før den første undersøgelsesmedicinske administration, herunder men ikke begrænset til:

    • Historie om inflammatorisk tarmsygdom (IBD).
    • ≥klade 2 diarré inden for 2 uger før den første undersøgelsesmedicinske administration.
    • Stråling Enteritis.
16. Ukontrolleret tumorrelateret smerte eller symptomatisk hypercalcæmi.

17. Kendt HIV -infektion, aktiv hepatitis B (HBV), hepatitis C (HCV) eller aktiv tuberkulose:

    • HBV-positive patienter skal gennemgå HBV-DNA-test. Patienter er berettigede, hvis HBV -DNA er ≤2,5 × 10³ kopier/ml eller ≤500 IE/ml.
    • HBsAg-positive patienter skal modtage antiviral terapi under undersøgelsen for at forhindre reaktivering.
    • Patienter med HBCAB (+), HBsAg (-), HBS (-) og HBV DNA (-) kræver ikke antiviral profylakse, men skal overvåges nøje for reaktivering.
    • HCV-seropositive patienter med negativ eller ikke-detekterbar HCV RNA er berettigede.
    • Patienter, der har afsluttet HCV -behandling og opnået en uopdagelig viral belastning, er berettigede.
18. Alvorlige/ukontrollerede infektioner, der kræver IV -antibiotika inden for 2 uger før den første undersøgelseslægemiddeladministration eller uforklarlig feber (> 38 ° C).
19. Diagnose af en anden malignitet inden for de sidste 5 år bortset fra kurativt behandlet basal/pladecellecarcinom, karcinom in situ, lokaliseret prostatacancer eller papillær skjoldbruskkirtelkarcinom.

20. Forbudte medicin og terapier, herunder men ikke begrænset til:

    • IL-2/IL-15 cytokiner (undtagen deres anvendelse i adoptivcelleterapi eller immunmodulation hos immunkompromitterede patienter).
    • Kemoterapi eller målrettet terapi med små molekyle inden for 2 uger (eller 5 halveringstider) før den første undersøgelseslægemiddeladministration, medmindre der ikke forventes nogen forsinket toksicitet. Undtagelser:
    • Nitrosoureas og mitomycin C kræver en 6-ugers udvaskningsperiode.
    • Antistofbaserede terapier inden for 4 uger før den første undersøgelseslægemiddeladministration.
    • Deltagelse i et andet interventionsforsøg inden for 2 uger før den første undersøgelseslægemiddeladministration.
    • Palliativ strålebehandling inden for 2 uger før den første undersøgelseslægemiddeladministration.
    • Levende vacciner inden for 4 uger før den første undersøgelseslægemiddeladministration.
    • Immunsuppressiv terapi eller systemiske kortikosteroider (> 10 mg/dag prednisonækvivalent) inden for 2 uger før den første undersøgelsesmedicinske administration.
    • Traditionel kinesisk medicin med kendte antitumoreffekter inden for 1 uge før den første undersøgelsesmedicinske administration.

21. Kontraindikationer for kombinationsterapier, herunder men ikke begrænset til:

    • UGT1A1*6/*6, UGT1A1*28/*28 eller UGT1A1*6/*28 genotyper, hvilket kan påvirke irinotecan -metabolisme.
    • Tidligere omfattende abdominal/bækkenstrålebehandling, som vurderet af efterforskeren, kan påvirke knoglemarv eller gastrointestinal funktion.
22. Enhver betingelse, behandling eller laboratorie abnormalitet, der i efterforskerens dom kan kompromittere patientsikkerhed, forstyrre informeret samtykke, påvirke overholdelse eller konsekvensen af ​​undersøgelseslægemiddelevaluering.
23. Alvorlige psykiatriske lidelser, kognitiv svækkelse eller stofmisbrug, der kan forstyrre samtykkeprocessen eller studere overholdelse.
24. Eventuelle andre kendte eller forventede faktorer, der efter efterforskerens mening ville gøre patienten uegnet til undersøgelsen.

Ekskluderingskriterier for specifikke kohorter

Kohort 2:

1. Symptomer eller risiko for blødning, perforering eller hindring på det primære kolorektale tumorsted.
2. Historie om betydelig toksicitet, der kræver permanent seponering af bevacizumab, oxaliplatin, capecitabin eller 5-FU.
3. Kendt allergi til at studere lægemidler eller excipienser.

Kohort 9:

1. Historie om betydelig toksicitet, der kræver permanent seponering af bevacizumab, fruquintinib eller trifluridin/tipiracil, eller kontraindikationer for at studere lægemidler som vurderet af efterforskeren.
2. Kendt allergi til at studere lægemidler eller excipienser.

Vi. Ledelsesplan for fælles bivirkninger

I. De mest almindelige bivirkninger i denne undersøgelse er dem, der er forbundet med vævsbiopsi. De vigtigste styringsprincipper og metoder er som følger:

1. Blødning Årsag: Biopsi inducerede skade på blodkar (især i tumorer med unormal koagulation eller rig vaskulær forsyning).

   Symptomer: blødning eller hæmatom på punkteringsstedet; Opkast blod, sort afføring (gastrointestinal blødning) efter endoskopisk biopsi; Betydelig blødning kan føre til hypotension, takykardi og tegn på chok.

   Ledelsesforanstaltninger:

   • Lokalt tryk: Anvend tryk i 10-15 minutter for overfladisk blødning; Endoskopisk blødning kan kontrolleres ved at sprøjte hæmostatiske midler (f.eks. Epinephrinopløsning) eller elektrokauteri.
   • Farmakologisk hæmostase: intravenøs indgivelse af hæmostatiske lægemidler (f.eks. Tranexaminsyre, vitamin K).
   • Interventionel/kirurgisk: Alvorlig blødning kan kræve vaskulær embolisering eller kirurgisk hæmostase.
   • Overvågning: Overvåg vitale tegn, hæmoglobinniveauer og om nødvendigt transfuse blod.

   Forebyggelse:

   • Preoperativ koagulationsvurdering (INR, blodplader) og korrektion af abnormiteter.
   • Undgå biopsi i områder med en høj vaskulær forsyning (baseret på billeddannelse).
   • Kontroller blodtrykket hos hypertensive patienter, inden de fortsætter.

2. Infektionsårsag: Forurening under proceduren eller kompromitteret immunstatus for patienten.

   Symptomer: rødme, hævelse og pus -dannelse på punkteringsstedet; feber, kulderystelser, øget antal hvide blodlegemer; Dybe infektioner (f.eks. Leverabscess, lungebetændelse).

   Ledelsesforanstaltninger:

   • Antibiotika: bredspektret antibiotika (f.eks. Tredje generation af cephalosporiner), der er skræddersyet til infektionsstedet og patogener, intravenøs administration til alvorlige infektioner.
   • Dræning: Dræning ved punktering eller kirurgi, hvis der dannes en abscess.
   • Støttende behandling: Fluidudskiftning, antipyretika osv.

   Forebyggelse:

   • Streng aseptisk teknik, korrekt desinfektion af endoskopiske instrumenter.
   • Profylaktiske antibiotika til patienter med høj risiko (f.eks. Diabetes, immunsupprimeret).
   • Postoperativ pleje for at holde punkteringsstedet rent og tørt.

3. Smerter Årsag: Vævsskade eller nervestimulering. Symptomer: vedvarende lokaliseret smerte, muligvis udstrålende til de omkringliggende områder; Henviste smerter efter visceral biopsi (f.eks. Højre skuldersmerter efter leverbiopsi) .-.

   Ledelsesforanstaltninger:

   • Mild smerte: lokal kold komprimering, hvile, orale NSAID'er (f.eks. Ibuprofen).
   • Alvorlig smerte: Efter at have udelukket blødning eller organskade kan svage opioider (f.eks. Tramadol) anvendes på kort sigt.
   • Nerveblok: Vedvarende smerte kan kræve interventionsbehandling.

   Forebyggelse:

   • Blid teknik til at undgå gentagne punkteringer.
   • Tilstrækkelig lokalbedøvelse (f.eks. Lidocaine -infiltration).

4. Orgelskade

   Steder med høj risiko:

   • Lungebiopsi → pneumothorax, hæmopneumothorax.
   • Leverbiopsi → galdelækage, galdeblødning.
   • Endoskopisk tarmbiopsi → perforering.

   Symptomer:

   • Pneumothorax: Pludselig brystsmerter, dyspnø, nedsatte åndedrætslyde på den berørte side.
   • Perforering: Alvorlig mavesmerter, peritoneal irritation, fri luft under membranen (ved billeddannelse).

   Ledelsesforanstaltninger:

   • Pneumothorax: Lille (lungekomprimering <20%) → Observation, iltbehandling; Moderat til stor → lukket brystdrenering.
   • Perforering: NPO, gastrointestinal dekomprimering, intravenøs antibiotika; Endoskopisk klipning eller akutkirurgi.
   • Gallækage: Interventionel dræning eller kirurgisk styring.

   Forebyggelse:

   • Billeddannelsesstyret tilgang til at undgå kritiske strukturer.
   • Kontroller punkteringsdybde (f.eks. For lungebiopsi skal du indsætte i slutningen af ​​udånding).

5. Allergiske reaktioner udløser: Lokale anæstetika, desinfektionsmidler (f.eks. Jodtinktur), latex (f.eks. Handsker).

   Symptomer: hud erythema, kløe; Laryngeal ødem, bronchospasme, anafylaktisk chok.

   Ledelsesforanstaltninger:

   - Stop det fornærmende agent, sørg for luftvejspatency.

   • Antiallergisk behandling:
   • Epinephrin (svær reaktion): 0,3-0,5 mg Im.
   • Kortikosteroider (f.eks. Dexamethason 10 mg IV).
   • Antihistaminer (f.eks. Diphenhydramin 20 mg IM).
   • Stødstyring: Fluidoplivning, vasopressorer, CPR om nødvendigt.

   Forebyggelse:

   • Detaljeret allergihistorie præoperativt.
   • Tilgængelighed af nødmedicin (f.eks. Epinephrin, ilt).

6. Vagal nervefleks almindelig i: endoskopisk biopsi eller punktering med at stimulere vagusnerven. Symptomer: blekhed, sved, bradykardi, hypotension.

   Ledelse:

   • Stop proceduren, placer patienten i liggende position.
   • Atropin 0,5 mg IV (for hjerterytme <50 bpm).
   • Hurtig væskeoplivning, vasopressorer om nødvendigt.

   Forebyggelse:

   - Blid teknik, undgå overdreven trækkraft.

7. Tumorfrø (sjælden) risiko: Tumorcelleformidling langs biopsi -nålesporet eller endoskopisk biopsi.

Ledelse:

• Lokal strålebehandling eller kirurgisk resektion.
• Monitor for metastatiske tegn (f.eks. Via billeddannelsesopfølgning).

Forebyggelse:

• Vælg den korteste biopsi.
• Udfør deaktivering efter proceduren af ​​biopsi-sporet (f.eks. Radiofrekvensablation).

Ii. Håndteringsprocessen for bivirkning af reaktion

1. Umiddelbar vurdering: Overvåg vitale tegn og identificer typen af ​​bivirkning.

2. Stabilisere tilstanden:

   • Blødning → Anvend tryk, flydende genoplivning.
   • Allergisk reaktion → Epinephrin, antihistaminer.
   • Pneumothorax → Oxygenbehandling, brystafløb.
3. Multidisciplinært samarbejde: Kontaktoperation, interventionsradiologi, ICU for hjælp.
4. Optag og rapporter: Dokumenter hændelsen grundigt, og rapporter alvorlige bivirkninger i henhold til hospitalets protokoller.

III. Særlige overvejelser til forskellige biopsyper

Biopsy type højrisikokomplikationer forebyggende foranstaltninger Endoskopisk bid Biopsi blødning, perforering undgår dybe vævsbid, brug elektrokauteri til vaskulære områder.

Lungebiopsi pneumothorax, hæmoptysis ende-exhalation nålindsættelse, øjeblikkelig røntgenbillede efter brystet.

Leverbiopsiblødning, galdelækage-ultralydstyret for at undgå store blodkar og galdekanaler, påfør pressetressing efter op.

Prostatabiopsi hæmaturi, infektionsbeoperativ tarmpræparat, profylaktisk antibiotika.

Vii. Dataanalyse (a) Prøvestørrelse Prøvestørrelsen af ​​denne undersøgelse er ikke baseret på statistisk hypotesetest. Cirka 50 forsøgspersoner er planlagt til at blive tilmeldt.

(B) Statistiske metoder

1. Grundlæggende metoder, medmindre andet er angivet, vil data i denne undersøgelse blive opsummeret ved hjælp af beskrivende statistikker. Kategoriske data vil blive præsenteret som frekvenstællinger (N) og procenter (%) med 95% konfidensintervaller (CI), hvor det er nødvendigt. Kontinuerlige variabler opsummeres ved hjælp af middelværdi, standardafvigelse (SD), median, minimum og maksimum. Data til tid til begivenhed analyseres ved hjælp af Kaplan-Meier-estimater med overlevelseskurver og 95% CI'er. Farmakokinetiske (PK) -data opsummeres ved hjælp af middelværdi, geometrisk middelværdi, SD, variationskoefficient (CV), geometrisk CV, median, maksimum og minimum som relevant.
2. Effektivitetsanalyse

1. Primær analyse af effektivitet:

   Det primære effektendepunkt er den objektive responsrate (ORR). Beskrivende statistikker opsummerer den bedste samlede respons (BOR) på tværs af kohorter og behandlingsarme. Antallet og andelen af ​​respondenterne (CR+PR) vil blive angivet, og 95% CI for ORR vil blive estimeret ved hjælp af Clopper-Pearson-metoden. ORR -forskellen mellem grupper A og B inden for hver kohort vil blive sammenfattet ved hjælp af beskrivende statistikker, og 95% CI beregnes ved hjælp af den normale tilnærmelsesmetode.

2. Sekundær effektivitetsanalyse:

Sygdomskontrolhastighed (DCR) analyseres på lignende måde som ORR. For effektivitetsdepunkter, såsom varighed af respons (DOR), progressionsfri overlevelse (PFS) og samlet overlevelse (OS), vil Kaplan-Meier-metoden blive brugt til at estimere mediantider og plotte overlevelseskurver. 95% CI for medianestimater beregnes ved hjælp af Brookmeyer-Crowley-metoden. Den 12-måneders OS-sats og dens 95% CI vil blive estimeret ved hjælp af log (-log) transformation og back-transformation baseret på den normale tilnærmelse.

3. tumorimmunmikromiljø (tid) Kortlægning af tidskortet er et visualiseringsværktøj, der bruges til at beskrive den cellulære sammensætning og interaktioner inden for tumormikromiljøet. Det giver indsigt i den rumlige fordeling af forskellige celletyper, såsom tumorceller, immunceller og stromalceller.

1. Cellranger og Seurat Software:

   - Cellranger: Et analyseværktøj til enkeltcelle-RNA-sekventeringsdata, der genererer genekspressionsmatrixer og udfører indledende databehandling.

   - Seurat: En R-pakke til enkeltcelle-RNA-sekventeringsdataanalyse, der tilbyder funktionaliteter såsom datapræbehandling, klynger og visualisering.

2. T-SNE og UMAP:

   • T-SNE (T-distribueret stokastisk nabo-indlejring) og UMAP (ensartet manifold tilnærmelse og projektion) er dimensionalitetsreduktionsteknikker, der projicerer højdimensionelle data (f.eks. Genekspressionsdata) i to- eller tredimensionelle rum til visualisering.
   • Disse metoder bevarer den lokale datastruktur og hjælper med at identificere forskellige cellepopulationer.

3. Celleklyngeranalyse:

   - Efter dimensionalitetsreduktion er celler samlet baseret på genekspressionsmønstre. Lignende celler grupperes sammen, mens forskellige celler er adskilt.

4. Markørgener:

   • Markørgener er karakteristiske for specifikke celletyper. Ved at analysere deres ekspression kan forskere identificere forskellige celletyper i tumorvæv.

   I tumorimmunmikromiljøet (tid) er følgende celletyper af primær interesse:

   Tumorceller: Kræftceller i tumorvævet.

   Immunceller:

   - T -celler: Ansvarlig for cellulær immunrespons.

   • B-celler: antistofproducerende celler.
   • NK -celler: naturlige dræberceller involveret i antitumorimmunitet.
   • Monocytter og makrofager: Deltag i immunresponser og fjernelse af cellulært affald.
   • Dendritiske celler: antigenpræsenterende immunceller.

   Stromale celler:

   • Fibroblaster: involveret i vævsreparation og ekstracellulær matrixdannelse.
   • Endotelceller: udgør blodkar.
   • Mesothelceller: Dæk kropshulrum.