Caractérisation des cellules NK sous thérapie avancée de première ligne Soit comme thérapie curative pour le mélanome métastatique, soit comme thérapie adjuvante pour le risque élevé de récidive (NAKIMEL)

Les lymphocytes Natural Killer (NK) sont des effecteurs cytotoxiques de la réponse immunitaire innée qui interviennent dans différentes phases de l'immunosurveillance tumorale. Ces lymphocytes sont activés au contact des cellules tumorales et exercent une activité cytotoxique directe sans immunisation préalable. Les lymphocytes NK activés produisent des cytokines, dont l'IFN-γ et le TNF-α, qui induisent et maintiennent une activation de la réponse immunitaire adaptative par les lymphocytes CD8+. De nombreuses études dans divers modèles tumoraux expérimentaux mettent en évidence le rôle des cellules NK dans le contrôle des métastases.

Nos travaux antérieurs ont montré que les cellules NK infiltrent les mélanomes primitifs, que les patients métastatiques ont des NK sanguins altérés et que la chimiothérapie module leur statut fonctionnel. Les chercheurs ont également observé une distribution particulière des polymorphismes des gènes codant pour les récepteurs activateurs NK des patients atteints de mélanome de stade IV par rapport aux donneurs sains. Enfin, l'investigateur a décrit une nouvelle population de lymphocytes NK dans les ganglions lymphatiques métastatiques drainant le mélanome. L'activation des cellules NK est régulée par un équilibre entre les récepteurs activateurs (NKG2D, NCR) et les récepteurs inhibiteurs qui se lient aux molécules modulatrices HLA-I classiques et non classiques ( HLA-E et G). Plus récemment, il a été montré que les Lc NK expriment également des récepteurs de point de contrôle, notamment CD96/TIGIT, NKG2A, TIM3 et PD-1 (ces 2 derniers sont présents sur les LcT) qui modulent négativement l'activation des NK. La possibilité d'activer la fonction lytique et sécrétoire des Lc NK en interférant avec ces récepteurs peut représenter une alternative encore à explorer dans les traitements d'immunothérapie.

Plus récemment, l'investigateur a développé un programme pour comprendre les interactions entre le profil mutationnel tumoral, le traitement avec des thérapies ciblées et l'immunogénicité des NK. l'investigateur dispose d'un panel de lignées de mélanome avec et sans la mutation BRAF V600E et des variants résistants au vémurafénib ont été obtenus à partir de certaines lignées mutées. l'investigateur a évalué l'impact du traitement et de la résistance à l'inhibition de BRAF sur la reconnaissance et la lyse des Lc NK. L'investigateur a montré qu'un inhibiteur de BRAF, le vémurafénib, diminuait l'expression membranaire et soluble de MICA/B et ULBP2, ligands de NKG2D, un récepteur activateur présent sur les NK Lc et certaines populations de lymphocytes T Lc, dans toutes les lignées mutées BRAF traitées. Pour 6 des 7 lignées mutées, les modulations de l'expression des ligands NK par le vémurafénib sont corrélées à une légère diminution des fonctions cytotoxiques des NK.

Des variants résistants au vémurafénib (R) ont été générés et leurs caractéristiques ont été comparées à celles des lignées sensibles (S). L'acquisition d'une résistance au vemurafenib induit une augmentation significative des fonctions NK (sécrétion d'IFNg et lyse de la cible). Les mécanismes responsables impliquent à la fois l'expression des ligands des récepteurs NK et la modulation des récepteurs du domaine de la mort (Fas, TRAILRII). Les analyses du transcriptome révèlent différentes cibles d'intérêt dans les trois paires de lignées de mélanome S/R portant la mutation BRAF V600E et des mutations supplémentaires distinctes (manuscrit soumis).

Sur la base de nos résultats récents, nous émettons l'hypothèse que les Lc NK sont des acteurs importants dans l'immunosurveillance des tumeurs lors des traitements actuels des patients atteints de mélanome. Des approches d'immunothérapie ciblant ces effecteurs peuvent présenter un intérêt en combinaison avec des thérapies ciblées ou des immunothérapies. Il a été démontré que la fréquence des Lc NK intratumorales est corrélée à la présence de cellules dendritiques stimulatrices et cet environnement est nécessaire pour une réponse à l'immunothérapie anti-PD1. Des anticorps innovants sont développés pour activer les fonctions antitumorales des cellules NK