L'effet des cellules souches et des exosomes de cellules souches sur les fonctions visuelles chez les patients atteints de rétinite pigmentaire

La rétinite pigmentaire (RP) est l'une des principales causes de perte de vision et de cécité irréversible. Il est indiqué que 1,4 million de personnes sont touchées dans le monde et sa prévalence est de 1:4000. Les applications des cellules souches sont des méthodes qui gagnent de plus en plus en importance dans le domaine de la médecine régénérative et de l'ophtalmologie. En plus de nombreuses études expérimentales sur les maladies de la rétine, y compris la rétinite pigmentaire, il existe également des études cliniques rapportant des résultats positifs chez l'homme. Le groupe de cellules souches le plus largement utilisé dans la pratique clinique actuelle est celui des cellules souches mésenchymateuses. Les avantages sont qu'ils sont relativement faciles à obtenir et qu'ils n'induisent pas de réponses immunitaires sévères. Des études cliniques sur les thérapies par cellules souches pour l'œil suggèrent que les cellules souches profitent aux tissus environnants en sécrétant des supports tels que des facteurs de croissance et des vésicules extracellulaires, principalement en raison de leurs effets trophiques et paracrines. Dans les applications intraoculaires, il y a eu une tendance à appliquer des cellules souches mésenchymateuses autour/à l'extérieur de l'œil, y compris l'application sous-ténonienne et suprachoroïdienne en raison d'effets secondaires tels que le décollement de la rétine et la membrane épirétinienne.

D'autres produits cellulaires qui ont été étudiés dans les études animales et la recherche clinique ces dernières années sont les exosomes. Les exosomes sont un sous-groupe de vésicules extracellulaires libérées par les cellules. Les exosomes sont des vésicules extracellulaires de 30 à 150 nm et portent au moins une des protéines exosomales CD63, CD9, CD81, synténine-1 et TSG101. Les exosomes sont sécrétés par différentes cellules de l'organisme et se retrouvent également dans les fluides corporels. Les exosomes jouent un rôle dans le transport de biomolécules telles que les lipides, les glucides, les acides nucléiques et les protéines d'une cellule à l'autre et fonctionnent ainsi dans le transfert d'informations génétiques et la reprogrammation de la cellule opposée et la communication intercellulaire. L'une des sources d'exosomes est les cellules souches mésenchymateuses qui sécrètent une grande quantité d'exosomes. Les exosomes dérivés de cellules souches mésenchymateuses auraient des effets thérapeutiques, tout comme les cellules souches mésenchymateuses. On pense que les cellules souches exercent également leurs effets cliniques par le biais de facteurs paracrines qu'elles sécrètent plutôt que d'être implantées dans les tissus. Cependant, le mécanisme d'action des cellules souches mésenchymateuses n'a pas été entièrement compris et on pense que les exosomes contribuent à cet effet. Le stockage et la durabilité des exosomes peuvent offrir des avantages dans les applications thérapeutiques par rapport aux cellules souches mésenchymateuses et peuvent offrir plus d'avantages immunologiques dans les applications allogéniques par rapport aux traitements cellulaires car ils ne contiennent pas de cellules.

L'une des sources à partir desquelles les cellules souches mésenchymateuses peuvent être obtenues est la gelée de Wharton, qui est le tissu mésenchymateux du cordon ombilical. Les cellules souches provenant du gel Wharton sont une bonne source de cellules souches en raison de leur capacité de différenciation élevée, de leur capacité de régénération élevée, de leur temps de doublement constant, de leur capacité de prolifération élevée, de leur faible immunogénicité et de l'absence de problèmes éthiques dus à des méthodes non invasives et à une disponibilité facile.

Cet essai clinique recrutera des patients diagnostiqués avec une rétinite pigmentaire. Le diagnostic de RP est posé par un examen clinique du fond d'œil, des examens dans notre clinique et une analyse génétique.

Au début de l'étude, tous les volontaires subiront un examen ophtalmologique complet comprenant la meilleure acuité visuelle corrigée, un examen du segment antérieur et du fond d'œil avec une lampe à fente, OCT (tomographie par cohérence optique), VF (champ visuel), ERG (électrorétinogramme), mfERG (ERG multifocal), OCTA (tomographie par cohérence optique). L'épaisseur rétinienne et choroïdienne et la bande passante ellipsoïdale en OCT, MD (écart moyen) montrant la sensibilité en FV, l'amplitude et les temps de latence en ERG et mf-ERG, la densité vasculaire et les rapports de débit vasculaire en OCTA seront enregistrés.

Les volontaires seront randomisés en trois. Le 1er groupe sera le groupe placebo (45 volontaires) et 0,5 cc de sérum physiologique salin seront appliqués dans l'espace sous-tenon. Le 2e groupe de patients (45 volontaires) subira une injection sous-ténonienne de suspension de cellules souches mésenchymateuses dérivées du gel Wharton. Une suspension contenant des exosomes de cellules souches mésenchymateuses de la gelée de Wharton sera appliquée à la distance sous-ténonienne au 3ème groupe de patients (45 volontaires). Un seul œil de chaque volontaire sera inclus. Un consentement éclairé sera obtenu des volontaires.

Des cellules souches mésenchymateuses allogéniques humaines dérivées de tissus de gel de Wharton et leurs exosomes seront obtenus à partir de femmes volontaires en bonne santé, âgées de plus de 18 ans, dans des conditions stériles après la réalisation de tests HBV, HCV, HIV virus et "Treponema Pallidum" (VDRL). Le tissu de cordon obtenu dès la naissance sera transporté dans une solution de transfert stérile et sera traité pour obtenir des cellules souches dans les laboratoires certifiés GMP (bonnes pratiques de fabrication) de l'Université d'Erciyes pour le génome et les cellules souches. Les exosomes seront obtenus par la méthode d'ultracentrifugation dans la même installation.

Pour l'injection dans la distance sous-tenon, la conjonctive et le tenon seront ouverts avec une petite incision à environ 10 mm de la zone temporale inférieure, puis une canule sous-ténon courbée de calibre 20 sera avancée parallèlement à la sclérotique et injectée dans la zone sous-tenon postérieure. Tous les volontaires se verront prescrire des antibiotiques et des gouttes de stéroïdes après l'intervention chirurgicale.

Un examen ophtalmologique complet et des examens au début de l'étude seront effectués et enregistrés à nouveau le 1er jour, 1er mois, 2ème mois, 3ème mois et 6ème mois du segment antérieur et examen du fond d'œil, OCT (tomographie par cohérence optique), VF ( champ visuel) ), ERG (électrorétinogramme), mfERG (ERG multifocal), OCTA (tomographie par cohérence optique) seront effectués.

De plus, un questionnaire évaluant subjectivement les fonctions visuelles sera administré lors des visites du 1er, 3e et 6e mois. (Questionnaire sur le fonctionnement visuel du National Eye Institute - 25 / Questionnaire sur le fonctionnement visuel du National Eye Institute (États-Unis)). Deux enquêteurs masqués effectueront des analyses.

Les données post-intervention du 1er jour, du 1er mois, du 2e mois, du 3e mois et du 6e mois seront comparées entre les groupes d'étude et au sein des groupes.