干细胞和干细胞外泌体对色素性视网膜炎患者视功能的影响

视网膜色素变性 (RP) 是视力丧失和不可逆性失明的主要原因之一。 据称全世界有140万人受累，患病率为1：4000。 干细胞应用是在再生医学和眼科领域越来越重要的方法。 除了视网膜色素变性等视网膜疾病的许多实验研究外，还有一些临床研究报告了对人类的成功结果。 当前临床实践中使用最广泛的干细胞群是间充质干细胞。 优点是它们相对容易获得并且不会引起严重的免疫反应。 眼部干细胞疗法的临床研究表明，干细胞通过分泌支持物（例如生长因子和细胞外囊泡）使周围组织受益，这主要是由于它们的营养和旁分泌作用。 在眼内应用中，由于视网膜脱离和视网膜前膜等副作用，存在将间充质干细胞应用于眼周/眼外的趋势，包括眼球腱下和脉络膜上腔应用。

近年来在动物研究和临床研究中研究的其他细胞产物是外泌体。 外泌体是细胞释放的细胞外囊泡的一个亚群。 外泌体是大小为 30-150 nm 的细胞外囊泡，携带至少一种外泌体蛋白 CD63、CD9、CD81、syntenin-1 和 TSG101。 外泌体由生物体的不同细胞分泌，也存在于体液中。 外泌体在脂质、碳水化合物、核酸和蛋白质等生物分子从一个细胞到另一个细胞的运输中发挥作用，以这种方式，它们在遗传信息传递、对立细胞的重新编程和细胞间通讯中发挥作用。 外泌体的来源之一是分泌大量外泌体的间充质干细胞。 据报道，间充质干细胞来源的外泌体与间充质干细胞一样具有治疗作用。 人们认为，干细胞还通过它们分泌的旁分泌因子而不是植入组织中来发挥其临床作用。 然而，间充质干细胞的作用机制尚未完全明了，外泌体被认为促成了这一作用。 与间充质干细胞相比，外泌体的储存和耐久性可以在治疗应用中提供优势，并且与细胞治疗相比，外泌体可以在同种异体应用中提供更多的免疫学优势，因为它们不含细胞。

可获得间充质干细胞的来源之一是华通胶，它是脐带的间充质组织。 源自沃顿凝胶的干细胞具有高分化能力、高再生能力、恒定倍增时间、高增殖能力、低免疫原性、非侵入性方法无伦理问题、易于获得等优点，是良好的干细胞来源。

该临床试验将招募诊断为视网膜色素变性的患者。 RP的诊断是通过临床眼底检查、本院检查和基因分析进行的。

在研究开始时，所有志愿者将接受全面的眼科检查，包括最佳矫正视力、使用裂隙灯进行的眼前节和眼底检查、OCT（光学相干断层扫描）、VF（视野）、ERG（视网膜电图）、 mfERG（多焦点 ERG）、OCTA（光学相干断层扫描）。 将记录 OCT 中的视网膜和脉络膜厚度和椭圆体带宽、显示 VF 灵敏度的 MD（平均偏差）值、ERG 和 mf-ERG 中的振幅和潜伏期、OCTA 中的血管密度和血管流量比。

志愿者将被随机分为三人。 第 1 组将是安慰剂组（45 名志愿者），并将 0.5 cc 盐水生理盐水应用于眼眶下空间。 第二组患者（45 名志愿者）将接受沃顿凝胶衍生的间充质干细胞悬液的球囊下注射。 含有沃顿胶间充质干细胞外泌体的悬浮液将应用于第三组患者（45 名志愿者）的眼球筋膜下距离。 每个志愿者的一只眼睛将被包括在内。 将从志愿者那里获得知情同意。

同种异体人沃顿凝胶组织来源的间充质干细胞及其外泌体将从18岁以上的健康女性志愿者身上获得，在无菌条件下进行HBV、HCV、HIV病毒和“梅毒螺旋体”（VDRL）测试后。 出生时获得的脐带组织将在无菌转移溶液中携带，并在 Erciyes 大学基因组和干细胞 GMP（良好生产规范）认证实验室进行处理以获得干细胞。 外泌体将在同一设施中通过超速离心法获得。

为了注射到眼球筋膜下距离，将在距离下颞区约 10 毫米处用一个小切口打开结膜和眼球筋，然后将 20 号弯曲眼球筋膜下插管平行于巩膜推进并注射到后眼球筋膜下区域。 所有志愿者在外科手术后都会服用抗生素和类固醇滴剂。

第1天、第1个月、第2个月、第3个月和第6个月的眼前节和眼底检查、OCT（光学相干断层扫描）、VF（视野）、ERG（视网膜电图）、mfERG（多焦点 ERG）、OCTA（光学相干断层扫描）检查。

此外，将在第 1、3 和 6 个月的访问时进行主观评估视觉功能的问卷调查。 （国家眼科研究所视觉功能问卷 - 25 / 国家眼科研究所（美国）视觉功能问卷）。 两名蒙面调查员将进行分析。

将在研究组之间和组内比较术后第 1 天、第 1 个月、第 2 个月、第 3 个月和第 6 个月的数据。