Effekten av stamceller och stamcellsexosomer på synfunktioner hos patienter med retinitis Pigmentosa

Retinitis pigmentosa (RP) är en av de främsta orsakerna till synförlust och irreversibel blindhet. Det anges att 1,4 miljoner människor är drabbade i världen och dess förekomst är 1:4000. Stamcellstillämpningar är metoder som får allt större betydelse inom området regenerativ medicin och oftalmologi. Förutom många experimentella studier på näthinnesjukdomar inklusive retinitis pigmentosa, finns det även kliniska studier som rapporterar framgångsrika resultat på människor. Den mest använda stamcellsgruppen i nuvarande klinisk praxis är mesenkymala stamceller. Fördelarna är att de är relativt lätta att erhålla och inte inducerar allvarliga immunsvar. Kliniska studier inom stamcellsterapier för ögat tyder på att stamceller gynnar den omgivande vävnaden genom att utsöndra stöd såsom tillväxtfaktorer och extracellulära vesiklar, mestadels på grund av deras trofiska och parakrina effekter. I intraokulära applikationer har det funnits en tendens att applicera mesenkymala stamceller runt/utanför ögat, inklusive subtenon och suprakoroidal applikation på grund av biverkningar som näthinneavlossning och epiretinal membran.

Andra cellulära produkter som har studerats i djurstudier och klinisk forskning de senaste åren är exosomer. Exosomer är en undergrupp av extracellulära vesiklar som frigörs från celler. Exosomer är extracellulära vesiklar 30-150 nm stora och bär minst ett av de exosomala proteinerna CD63, CD9, CD81, syntenin-1 och TSG101. Exosomer utsöndras från olika celler i organismen och finns även i kroppsvätskor. Exosomer spelar en roll i transporten av biomolekyler som lipider, kolhydrater, nukleinsyror och proteiner från en cell till en annan och på detta sätt fungerar de i genetisk informationsöverföring och omprogrammering av den motsatta cellen och intercellulär kommunikation. En av källorna till exosomer är mesenkymala stamceller som utsöndrar stora mängder exosomer. Mesenkymala stamcellshärledda exosomer har rapporterats ha terapeutiska effekter, precis som mesenkymala stamceller. Man tror att stamceller också utövar sina kliniska effekter genom parakrina faktorer som de utsöndrar snarare än att implanteras i vävnaden. Verkningsmekanismen för mesenkymala stamceller har dock inte förståtts fullt ut, och exosomer tros bidra till effekten. Lagringen och hållbarheten av exosomer kan ge fördelar i terapeutiska tillämpningar jämfört med mesenkymala stamceller och kan ge fler immunologiska fördelar i allogena tillämpningar jämfört med cellulära behandlingar eftersom de inte innehåller celler.

En av källorna från vilka mesenkymala stamceller kan erhållas är Wharton-gelé, som är navelsträngens mesenkymala vävnad. Stamceller som härrör från Wharton gel är en bra källa till stamceller på grund av deras höga differentieringskapacitet, höga regenereringskapacitet, konstanta fördubblingstid, höga spridningskapacitet, låg immunogenicitet och inga etiska problem på grund av icke-invasiva metoder och lättillgänglighet.

Denna kliniska prövning kommer att registrera patienter som diagnostiserats med retinitis pigmentosa. Diagnosen RP ställs genom klinisk ögonbottenundersökning, undersökningar på vår klinik och genetisk analys.

I början av studien kommer alla frivilliga att genomgå en fullständig oftalmologisk undersökning inklusive bäst korrigerad synskärpa, främre segment och ögonbottenundersökning med spaltlampa, OCT (optisk koherenstomografi), VF (synfält), ERG (elektroretinogram), mfERG (multifokal ERG), OCTA (optisk koherenstomografi). Retinal och koroidal tjocklek och ellipsoidbandbredd i OCT, MD (medelavvikelse) värde som visar känslighet i VF, amplitud och latenstider i ERG och mf-ERG, vaskulär densitet och vaskulära flödesförhållanden i OCTA kommer att registreras.

Volontärerna kommer att randomiseras till tre. Den första gruppen kommer att vara placebogruppen (45 frivilliga) och 0,5 cc fysiologisk koksaltlösning kommer att appliceras på subtenonutrymmet. Den andra gruppen av patienter (45 frivilliga) kommer att genomgå en subtenoninjektion av Wharton gel-härledd mesenkymal stamcellsuspension. En suspension som innehåller mesenkymala stamcellsexosomer från Wharton-gelé kommer att appliceras på subtenonavståndet till den tredje patientgruppen (45 frivilliga). Ett enda öga av varje volontär kommer att inkluderas. Informerat samtycke kommer att erhållas från volontärerna.

Allogena mänskliga Wharton-gelvävnadshärledda mesenkymala stamceller och deras exosomer kommer att erhållas från friska kvinnliga frivilliga, som är över 18 år, under sterila förhållanden efter att HBV, HCV, HIV-virus och "Treponema Pallidum" (VDRL) tester utförts. Sladdvävnad som erhållits från födseln kommer att bäras i en steril överföringslösning och kommer att bearbetas för att erhålla stamceller i Erciyes University Genome and Stem Cell GMP (good manufacturing practice) certifierade laboratorier. Exosomer kommer att erhållas genom ultracentrifugeringsmetoden i samma anläggning.

För injektion i subtenonavståndet kommer bindhinnan och tappen att öppnas med ett litet snitt cirka 10 mm från det nedre temporala området, sedan kommer en 20 gauge böjd subtenonkanyl att föras fram parallellt med skleran och injiceras i det bakre subtenonområdet. Alla frivilliga kommer att ordineras antibiotika och steroiddroppar efter det kirurgiska ingreppet.

Fullständig oftalmologisk undersökning och undersökningar i början av studien kommer att utföras och registreras igen den 1:a dagen, 1:a månaden, 2:a månaden, 3:e månaden och 6:e månaderna av det främre segmentet och ögonbottenundersökningen, OCT (optisk koherenstomografi), VF ( synfält) ), ERG (elektroretinogram), mfERG (multifokal ERG), OCTA (optisk koherenstomografi) undersökningar kommer att utföras.

Dessutom kommer ett frågeformulär som utvärderar de visuella funktionerna subjektivt att administreras vid 1:a, 3:e och 6:e månadsbesöken. (National Eye Institute Visual Functioning Questionnaire - 25 / National Eye Institute (USA) Visual Function Questionnaire ). Två maskerade utredare ska utföra analyser.

Data från första dagen, 1:a månaden, 2:a månaden, 3:e månaden och 6:e månaden efter proceduren kommer att jämföras mellan studiegrupper och inom grupper.