El efecto de las células madre y los exosomas de células madre sobre las funciones visuales en pacientes con retinosis pigmentaria

La retinitis pigmentosa (RP) es una de las principales causas de pérdida de visión y ceguera irreversible. Se afirma que 1,4 millones de personas están afectadas en el mundo y su prevalencia es de 1:4000. Las aplicaciones de células madre son métodos que están ganando cada vez más importancia en el campo de la medicina regenerativa y la oftalmología. Además de muchos estudios experimentales en enfermedades de la retina, incluida la retinitis pigmentosa, también hay estudios clínicos que informan resultados exitosos en humanos. El grupo de células madre más utilizado en la práctica clínica actual son las células madre mesenquimales. Las ventajas son que son relativamente fáciles de obtener y no inducen respuestas inmunitarias graves. Los estudios clínicos en terapias con células madre para el ojo sugieren que las células madre benefician el tejido circundante al secretar apoyo, como factores de crecimiento y vesículas extracelulares, principalmente debido a sus efectos tróficos y paracrinos. En las aplicaciones intraoculares, ha habido una tendencia a aplicar células madre mesenquimales alrededor/fuera del ojo, incluida la aplicación subtenoniana y supracoroidea debido a efectos secundarios como el desprendimiento de retina y la membrana epirretiniana.

Otros productos celulares que se han estudiado en estudios con animales e investigaciones clínicas en los últimos años son los exosomas. Los exosomas son un subgrupo de vesículas extracelulares liberadas por las células. Los exosomas son vesículas extracelulares de 30-150 nm de tamaño y portan al menos una de las proteínas exosómicas CD63, CD9, CD81, syntenin-1 y TSG101. Los exosomas son secretados por diferentes células del organismo y también se encuentran en los fluidos corporales. Los exosomas desempeñan un papel en el transporte de biomoléculas como lípidos, carbohidratos, ácidos nucleicos y proteínas de una célula a otra y, de esta manera, funcionan en la transferencia de información genética y la reprogramación de la célula opuesta y la comunicación intercelular. Una de las fuentes de exosomas son las células madre mesenquimales que secretan una gran cantidad de exosomas. Se ha informado que los exosomas derivados de células madre mesenquimales tienen efectos terapéuticos, al igual que las células madre mesenquimales. Se cree que las células madre también ejercen sus efectos clínicos a través de factores paracrinos que secretan en lugar de implantarse en el tejido. Sin embargo, el mecanismo de acción de las células madre mesenquimales no se ha entendido completamente y se cree que los exosomas contribuyen al efecto. El almacenamiento y la durabilidad de los exosomas pueden proporcionar ventajas en aplicaciones terapéuticas en comparación con las células madre mesenquimales y pueden proporcionar más ventajas inmunológicas en aplicaciones alogénicas en comparación con los tratamientos celulares, ya que no contienen células.

Una de las fuentes de las que se pueden obtener células madre mesenquimales es la gelatina de Wharton, que es el tejido mesenquimatoso del cordón umbilical. Las células madre provenientes del gel de Wharton son una buena fuente de células madre debido a su alta capacidad de diferenciación, alta capacidad de regeneración, tiempo de duplicación constante, alta capacidad de proliferación, baja inmunogenicidad, ausencia de problemas éticos debido a métodos no invasivos y fácil disponibilidad.

Este ensayo clínico inscribirá a pacientes diagnosticados con retinosis pigmentaria. El diagnóstico de RP se realiza mediante examen clínico de fondo de ojo, exámenes en nuestra clínica y análisis genético.

Al comienzo del estudio, todos los voluntarios se someterán a un examen oftalmológico completo que incluye la mejor agudeza visual corregida, examen del fondo y del segmento anterior con lámpara de hendidura, OCT (tomografía de coherencia óptica), VF (campo visual), ERG (electrorretinograma), mfERG (ERG multifocal), OCTA (tomografía de coherencia óptica). Se registrará el grosor retiniano y coroideo y el ancho de banda del elipsoide en OCT, el valor MD (desviación media) que muestra la sensibilidad en VF, la amplitud y los tiempos de latencia en ERG y mf-ERG, la densidad vascular y las relaciones de flujo vascular en OCTA.

Los voluntarios serán asignados al azar en tres. El 1er grupo será el grupo placebo (45 voluntarios) y se aplicará solución salina fisiológica de 0,5 cc en el espacio subtenoniano. El segundo grupo de pacientes (45 voluntarios) se someterá a una inyección subtenoniana de suspensión de células madre mesenquimales derivadas del gel de Wharton. Se aplicará una suspensión que contiene exosomas de células madre mesenquimales de la gelatina de Wharton a la distancia subtenoniana al tercer grupo de pacientes (45 voluntarios). Se incluirá un solo ojo de cada voluntario. Se obtendrá el consentimiento informado de los voluntarios.

Las células madre mesenquimales derivadas de tejido de gel de Wharton humano alogénico y sus exosomas se obtendrán de voluntarias sanas, mayores de 18 años, en condiciones estériles después de realizar las pruebas de VHB, VHC, virus del VIH y "Treponema pallidum" (VDRL). El tejido del cordón obtenido desde el nacimiento se transportará en una solución de transferencia estéril y se procesará para obtener células madre en los laboratorios certificados GMP (buenas prácticas de fabricación) de células madre y genoma de la Universidad de Erciyes. Los exosomas se obtendrán por el método de ultracentrifugación en la misma instalación.

Para la inyección en la distancia del subtenon, la conjuntiva y el tenon se abrirán con una pequeña incisión a unos 10 mm del área temporal inferior, luego se avanzará una cánula subtenoniana curva de calibre 20 paralela a la esclerótica y se inyectará en el área subtenoniana posterior. A todos los voluntarios se les recetarán antibióticos y gotas de esteroides después del procedimiento quirúrgico.

El examen oftalmológico completo y los exámenes al comienzo del estudio se realizarán y registrarán nuevamente el 1.er día, 1.er mes, 2.° mes, 3.er mes y 6.° mes del examen del segmento anterior y fondo de ojo, OCT (tomografía de coherencia óptica), FV ( campo visual), ERG (electrorretinograma), mfERG (ERG multifocal), OCTA (tomografía de coherencia óptica) se realizarán exámenes.

Además, en las visitas del 1.°, 3.° y 6.° mes se administrará un cuestionario que evalúa las funciones visuales de forma subjetiva. (Cuestionario de funcionamiento visual del Instituto Nacional del Ojo - 25 / Cuestionario de funcionamiento visual del Instituto Nacional del Ojo (EE. UU.)). Dos investigadores enmascarados realizarán análisis.

Los datos del primer día, el primer mes, el segundo mes, el tercer mes y el sexto mes posteriores al procedimiento se compararán entre los grupos de estudio y dentro de los grupos.