줄기세포와 줄기세포 엑소좀이 색소성 망막염 환자의 시각기능에 미치는 영향

색소성 망막염(RP)은 시력 상실과 돌이킬 수 없는 실명의 주요 원인 중 하나입니다. 전 세계적으로 140만 명이 영향을 받고 유병률은 1:4000이라고 합니다. 줄기 세포 응용은 재생 의학 및 안과 분야에서 점점 더 중요해지고 있는 방법입니다. 망막색소변성증을 비롯한 망막질환에 대한 많은 실험적 연구 외에도 사람을 대상으로 한 성공적인 결과를 보고한 임상연구도 있다. 현재 임상 실습에서 가장 널리 사용되는 줄기 세포 그룹은 중간엽 줄기 세포입니다. 장점은 상대적으로 구하기 쉽고 심각한 면역 반응을 유발하지 않는다는 것입니다. 눈을 위한 줄기 세포 치료에 대한 임상 연구에 따르면 줄기 세포는 대부분 영양 및 측분비 효과로 인해 성장 인자 및 세포외 소포와 같은 지원을 분비하여 주변 조직에 도움이 됩니다. 안구내 적용에서는 망막박리, 망막전막 등의 부작용으로 인해 테논낭하 및 맥락막위 적용을 포함하여 눈 주위/외측에 간엽줄기세포를 적용하는 경향이 있어 왔다.

최근 몇 년간 동물 연구 및 임상 연구에서 연구된 다른 세포 제품은 엑소좀입니다. 엑소좀은 세포에서 방출되는 세포외 소포의 하위 그룹입니다. 엑소좀은 크기가 30-150 nm인 세포외 소포이며 엑소좀 단백질 CD63, CD9, CD81, syntenin-1 및 TSG101 중 적어도 하나를 운반합니다. 엑소좀은 유기체의 여러 세포에서 분비되며 체액에서도 발견됩니다. 엑소좀은 한 세포에서 다른 세포로 지질, 탄수화물, 핵산, 단백질과 같은 생체 분자를 운반하는 역할을 하며, 이러한 방식으로 유전 정보 전달, 반대 세포의 재프로그래밍 및 세포 간 통신 기능을 수행합니다. 엑소좀의 공급원 중 하나는 다량의 엑소좀을 분비하는 중간엽 줄기세포입니다. 중간엽 줄기세포 유래 엑소좀은 중간엽 줄기세포와 마찬가지로 치료 효과가 있는 것으로 보고되었습니다. 줄기세포도 조직에 이식되기보다는 분비하는 측분비 인자를 통해 임상적 효과를 발휘하는 것으로 생각된다. 그러나 중간엽 줄기세포의 작용 기전은 완전히 이해되지 않았으며, 엑소좀이 그 작용에 기여하는 것으로 생각됩니다. 엑소좀의 저장 및 내구성은 중간엽 줄기 세포와 비교하여 치료 적용에서 이점을 제공할 수 있으며 세포를 포함하지 않기 때문에 세포 치료와 비교하여 동종이계 적용에서 더 많은 면역학적 이점을 제공할 수 있습니다.

중간엽 줄기세포를 얻을 수 있는 소스 중 하나는 탯줄의 중간엽 조직인 Wharton jelly입니다. Wharton 젤에서 유래한 줄기세포는 높은 분화능, 높은 재생능, 일정한 배가 시간, 높은 증식력, 낮은 면역원성, 비침습적 방법으로 윤리적 문제가 없고 쉽게 입수할 수 있어 줄기세포의 좋은 공급원입니다.

이 임상 시험은 색소성 망막염 진단을 받은 환자를 등록할 것입니다. RP의 진단은 임상 안저 검사, 우리 클리닉 검사 및 유전자 분석을 통해 이루어집니다.

연구 시작 시 모든 지원자는 슬릿 램프, OCT(광간섭 단층촬영), VF(시야), ERG(망막전위도), mfERG(다초점 ERG), OCTA(광간섭 단층 촬영). OCT에서의 망막 및 맥락막 두께 및 타원체 대역폭, VF에서의 민감도를 나타내는 MD(평균 편차) 값, ERG 및 mf-ERG에서의 진폭 및 잠복 시간, OCTA에서의 혈관 밀도 및 혈관 흐름 비율이 기록될 것이다.

자원봉사자는 3명으로 무작위 배정됩니다. 1군은 위약군(지원자 45명)으로 0.5cc 생리식염수를 테논낭하 공간에 도포한다. 2차 환자군(지원자 45명)은 Wharton 겔 유래 중간엽 줄기세포 현탁액을 테논낭하 주사를 받습니다. Wharton jelly의 중간엽 줄기세포 엑소좀을 포함하는 현탁액을 3번째 환자 그룹(지원자 45명)의 테논낭하 거리에 적용합니다. 각 지원자의 한쪽 눈이 포함됩니다. 자원봉사자들로부터 정보에 입각한 동의를 얻을 것입니다.

HBV, HCV, HIV 바이러스 및 "Treponema Pallidum"(VDRL) 테스트를 수행한 후 무균 상태에서 18세 이상의 건강한 여성 지원자로부터 동종 인간 ​​Wharton 겔 조직 유래 중간엽 줄기 세포 및 그 엑소좀을 얻을 것입니다. 출생 시 얻은 탯줄 조직은 멸균 이송 용액으로 운반되며 Erciyes University Genome 및 Stem Cell GMP(Good Manufacturing Practices) 인증 실험실에서 줄기 세포를 얻기 위해 처리됩니다. 같은 시설에서 초원심분리법으로 엑소좀을 채취합니다.

테논낭하 거리에 주입하기 위해 결막과 테논을 아래쪽 측두엽에서 약 10mm 떨어진 곳에 작은 절개로 열고 20게이지 곡선형 테논낭하 캐뉼라를 공막과 평행하게 전진시켜 테논낭하 부위에 주입합니다. 모든 지원자는 수술 후 항생제와 스테로이드 점안제를 처방받게 됩니다.

전체 안과 검사 및 연구 시작 시 검사를 수행하고 전치부의 1일, 1개월, 2개월, 3개월 및 6개월에 다시 기록하고 안저 검사, OCT(광간섭 단층 촬영), VF( 시야) ), ERG(망막전기도), mfERG(다초점 ERG), OCTA(광간섭단층촬영) 검사를 시행하게 됩니다.

또한 1개월, 3개월, 6개월 내원 시 시각 기능을 주관적으로 평가하는 설문지를 시행한다. (National Eye Institute Visual Functioning Questionnaire - 25 / National Eye Institute (USA) Visual Function Questionnaire ). 복면을 쓴 두 명의 수사관이 분석을 수행합니다.

시술 후 1일, 1개월, 2개월, 3개월 및 6개월 데이터는 연구 그룹 간 및 그룹 내에서 비교됩니다.