Effekten af ​​stamceller og stamcelleeksosomer på visuelle funktioner hos patienter med retinitis Pigmentosa

Retinitis pigmentosa (RP) er en af ​​de førende årsager til synstab og irreversibel blindhed. Det oplyses, at 1,4 millioner mennesker er berørt i verden, og dens udbredelse er 1:4000. Stamcelleapplikationer er metoder, der i stigende grad får betydning inden for regenerativ medicin og oftalmologi. Ud over mange eksperimentelle undersøgelser af nethindesygdomme, herunder retinitis pigmentosa, er der også kliniske undersøgelser, der rapporterer succesfulde resultater på mennesker. Den mest udbredte stamcellegruppe i den nuværende kliniske praksis er mesenkymale stamceller. Fordelene er, at de er relativt nemme at opnå og ikke fremkalder alvorlige immunresponser. Kliniske undersøgelser i stamcelleterapier for øjet tyder på, at stamceller gavner det omgivende væv ved at udskille støtte såsom vækstfaktorer og ekstracellulære vesikler, mest på grund af deres trofiske og parakrine virkninger. Ved intraokulære applikationer har der været en tendens til at påføre mesenkymale stamceller omkring/uden for øjet, herunder subtenon og suprakoroidal applikation på grund af bivirkninger såsom nethindeløsning og epiretinal membran.

Andre cellulære produkter, der er blevet undersøgt i dyreforsøg og klinisk forskning i de senere år, er exosomer. Exosomer er en undergruppe af ekstracellulære vesikler frigivet fra celler. Exosomer er ekstracellulære vesikler med en størrelse på 30-150 nm og bærer mindst et af de exosomale proteiner CD63, CD9, CD81, syntenin-1 og TSG101. Exosomer udskilles fra forskellige celler i organismen og findes også i kropsvæsker. Exosomer spiller en rolle i transporten af ​​biomolekyler såsom lipider, kulhydrater, nukleinsyrer og proteiner fra en celle til en anden og på denne måde fungerer de i genetisk informationsoverførsel og omprogrammering af den modsatte celle og intercellulær kommunikation. En af kilderne til exosomer er mesenkymale stamceller, der udskiller store mængder af exosomer. Mesenkymale stamcelle-afledte exosomer er blevet rapporteret at have terapeutiske virkninger, ligesom mesenchymale stamceller. Det menes, at stamceller også udøver deres kliniske virkning gennem parakrine faktorer, de udskiller i stedet for at blive implanteret i vævet. Virkningsmekanismen for mesenkymale stamceller er dog ikke fuldt ud forstået, og exosomer menes at bidrage til effekten. Opbevaringen og holdbarheden af ​​exosomer kan give fordele ved terapeutiske anvendelser sammenlignet med mesenkymale stamceller og kan give flere immunologiske fordele ved allogene anvendelser sammenlignet med cellulære behandlinger, da de ikke indeholder celler.

En af de kilder, hvorfra mesenkymale stamceller kan fås, er Wharton-gelé, som er det mesenkymale væv i navlestrengen. Stamceller, der stammer fra Wharton gel er en god kilde til stamceller på grund af deres høje differentieringskapacitet, høje regenereringskapacitet, konstante fordoblingstid, høje spredningskapacitet, lav immunogenicitet og ingen etiske problemer på grund af ikke-invasive metoder og lette tilgængelighed.

Dette kliniske forsøg vil inkludere patienter diagnosticeret med retinitis pigmentosa. Diagnosen RP stilles ved klinisk fundusundersøgelse, undersøgelser i vores klinik og genetiske analyser.

I begyndelsen af ​​undersøgelsen vil alle frivillige gennemgå en fuld oftalmologisk undersøgelse, herunder bedst korrigeret synsstyrke, forreste segment og fundusundersøgelse med spaltelampe, OCT (optisk kohærenstomografi), VF (synsfelt), ERG (elektroretinogram), mfERG (multifokal ERG), OCTA (optisk kohærenstomografi). Retinal og choroidal tykkelse og ellipsoidbåndbredde i OCT, MD (middelafvigelse) værdi, der viser følsomhed i VF, amplitude og latenstider i ERG og mf-ERG, vaskulær tæthed og vaskulære flowforhold i OCTA vil blive registreret.

De frivillige vil blive randomiseret i tre. Den 1. gruppe vil være placebogruppen (45 frivillige), og 0,5 cc saltvandsfysiologisk saltvand vil blive påført subtenonrummet. 2. gruppe patienter (45 frivillige) vil gennemgå en subtenon-injektion af Wharton gel-afledt mesenkymal stamcellesuspension. En suspension indeholdende mesenkymale stamcelle-eksosomer fra Wharton-gelé vil blive påført på subtenonafstanden til den 3. gruppe af patienter (45 frivillige). Et enkelt øje af hver frivillig vil blive inkluderet. Der vil blive indhentet informeret samtykke fra de frivillige.

Allogene humane Wharton-gelvævs-afledte mesenkymale stamceller og deres exosomer vil blive opnået fra raske kvindelige frivillige, som er over 18 år, under sterile forhold efter HBV-, HCV-, HIV-virus- og "Treponema Pallidum" (VDRL) test blev udført. Ledningsvæv opnået fra fødslen vil blive båret i en steril overførselsopløsning og vil blive behandlet for at opnå stamceller i Erciyes University Genome and Stem Cell GMP (good manufacturing practice) certificerede laboratorier. Exosomer vil blive opnået ved ultracentrifugeringsmetoden i samme facilitet.

Til injektion i subtenonafstanden åbnes bindehinden og tenonen med et lille snit ca. 10 mm væk fra det nedre temporale område, derefter vil en 20 gauge buet subtenonkanyle blive fremført parallelt med sclera og injiceret i det posteriore subtenonområde. Alle frivillige vil få ordineret antibiotika og steroiddråber efter det kirurgiske indgreb.

Fuld oftalmologisk undersøgelse og undersøgelser i begyndelsen af ​​undersøgelsen vil blive udført og registreret igen på 1. dag, 1. måned, 2. måned, 3. måned og 6. måneder af det forreste segment og fundusundersøgelse, OCT (optisk kohærenstomografi), VF ( synsfelt) ), ERG (elektroretinogram), mfERG (multifokal ERG), OCTA (optisk kohærenstomografi) undersøgelser vil blive udført.

Derudover vil et spørgeskema, der vurderer de visuelle funktioner subjektivt blive administreret ved 1., 3. og 6. måneds besøg. (National Eye Institute Visual Functioning Questionnaire - 25 / National Eye Institute (USA) Visual Functioning Questionnaire ). To maskerede efterforskere vil udføre analyser.

Post-procedure 1. dag, 1. måned, 2. måned, 3. måned og 6. måned data vil blive sammenlignet mellem undersøgelsesgrupper og inden for grupper.