Effekten av stamceller og stamcelleeksosomer på visuelle funksjoner hos pasienter med retinitis Pigmentosa

Retinitis pigmentosa (RP) er en av de viktigste årsakene til synstap og irreversibel blindhet. Det er oppgitt at 1,4 millioner mennesker er berørt i verden og dens utbredelse er 1:4000. Stamcelleapplikasjoner er metoder som får stadig større betydning innen regenerativ medisin og oftalmologi. I tillegg til mange eksperimentelle studier på netthinnesykdommer inkludert retinitis pigmentosa, er det også kliniske studier som rapporterer vellykkede resultater på mennesker. Den mest brukte stamcellegruppen i dagens kliniske praksis er mesenkymale stamceller. Fordelene er at de er relativt enkle å få tak i og ikke induserer alvorlige immunresponser. Kliniske studier innen stamcelleterapi for øyet tyder på at stamceller fordeler det omkringliggende vevet ved å skille ut støtte som vekstfaktorer og ekstracellulære vesikler, hovedsakelig på grunn av deres trofiske og parakrine effekter. Ved intraokulære applikasjoner har det vært en tendens til å påføre mesenkymale stamceller rundt/utenfor øyet, inkludert subtenon og suprakoroidal applikasjon på grunn av bivirkninger som netthinneløsning og epiretinal membran.

Andre cellulære produkter som har blitt studert i dyrestudier og klinisk forskning de siste årene er eksosomer. Eksosomer er en undergruppe av ekstracellulære vesikler frigjort fra celler. Eksosomer er ekstracellulære vesikler med en størrelse på 30-150 nm og bærer minst ett av de eksosomale proteinene CD63, CD9, CD81, syntenin-1 og TSG101. Eksosomer skilles ut fra forskjellige celler i organismen og finnes også i kroppsvæsker. Eksosomer spiller en rolle i transporten av biomolekyler som lipider, karbohydrater, nukleinsyrer og proteiner fra en celle til en annen, og på denne måten fungerer de i genetisk informasjonsoverføring, og omprogrammering av den motsatte cellen og intercellulær kommunikasjon. En av kildene til eksosomer er mesenkymale stamceller som skiller ut store mengder eksosomer. Mesenkymale stamcelleavledede eksosomer har blitt rapportert å ha terapeutiske effekter, akkurat som mesenkymale stamceller. Det antas at stamceller også utøver sin kliniske effekt gjennom parakrine faktorer de skiller ut i stedet for å bli implantert i vevet. Virkningsmekanismen til mesenkymale stamceller er imidlertid ikke fullt ut forstått, og eksosomer antas å bidra til effekten. Lagring og holdbarhet av eksosomer kan gi fordeler i terapeutiske applikasjoner sammenlignet med mesenkymale stamceller og kan gi flere immunologiske fordeler i allogene applikasjoner sammenlignet med cellulære behandlinger siden de ikke inneholder celler.

En av kildene som mesenkymale stamceller kan fås fra er Wharton gelé, som er det mesenkymale vevet i navlestrengen. Stamceller som stammer fra Wharton gel er en god kilde til stamceller på grunn av deres høye differensieringskapasitet, høye regenereringskapasitet, konstante doblingstid, høy spredningskapasitet, lav immunogenisitet og ingen etiske problemer på grunn av ikke-invasive metoder, og lett tilgjengelighet.

Denne kliniske studien vil inkludere pasienter diagnostisert med retinitis pigmentosa. Diagnosen RP stilles ved klinisk fundusundersøkelse, undersøkelser i vår klinikk og genetisk analyse.

Ved begynnelsen av studien vil alle frivillige gjennomgå en full oftalmologisk undersøkelse inkludert best korrigert synsskarphet, fremre segment og fundusundersøkelse med spaltelampe, OCT (optisk koherenstomografi), VF (synsfelt), ERG (elektroretinogram), mfERG (multifokal ERG), OCTA (optisk koherenstomografi). Retinal og koroidal tykkelse og ellipsoidbåndbredde i OCT, MD (gjennomsnittlig avvik) verdi som viser sensitivitet i VF, amplitude og latenstider i ERG og mf-ERG, vaskulær tetthet og vaskulære strømningsforhold i OCTA vil bli registrert.

De frivillige vil bli randomisert i tre. Den første gruppen vil være placebogruppen (45 frivillige) og 0,5 cc saltvann fysiologisk saltvann vil bli brukt på subtenonrommet. 2. gruppe pasienter (45 frivillige) vil gjennomgå en subtenoninjeksjon av Wharton gel-avledet mesenkymal stamcellesuspensjon. En suspensjon som inneholder mesenkymale stamcelle-eksosomer fra Wharton-gelé vil bli påført på subtenonavstanden til den tredje pasientgruppen (45 frivillige). Et enkelt øye av hver frivillig vil bli inkludert. Informert samtykke vil bli innhentet fra de frivillige.

Allogene humane Wharton-gelvevsavledede mesenkymale stamceller og deres eksosomer vil bli hentet fra friske kvinnelige frivillige, som er over 18 år, under sterile forhold etter at HBV, HCV, HIV-virus og "Treponema Pallidum" (VDRL) tester ble utført. Ledningsvev hentet fra fødselen vil bli båret i en steril overføringsløsning og vil bli behandlet for å få stamceller i Erciyes University Genome and Stem Cell GMP (good manufacturing practice)-sertifiserte laboratorier. Eksosomer vil bli oppnådd ved ultrasentrifugeringsmetoden i samme anlegg.

For injeksjon i subtenon-avstanden, vil konjunktiva og tenon åpnes med et lite snitt ca. 10 mm fra det nedre temporale området, deretter vil 20 gauge buet subtenon-kanyle føres frem parallelt med sclera og injiseres i det bakre subtenon-området. Alle frivillige vil bli foreskrevet antibiotika og steroiddråper etter det kirurgiske inngrepet.

Full oftalmologisk undersøkelse og undersøkelser i begynnelsen av studien vil bli utført og registrert på nytt på 1. dag, 1. måned, 2. måned, 3. måned og 6. måned av fremre segment og fundusundersøkelse, OCT (optisk koherenstomografi), VF ( synsfelt) ), ERG (elektroretinogram), mfERG (multifokal ERG), OCTA (optisk koherenstomografi) undersøkelser vil bli utført.

I tillegg vil et spørreskjema som vurderer de visuelle funksjonene subjektivt bli administrert ved 1., 3. og 6. måneds besøk. (National Eye Institute Visual Functioning Questionnaire - 25 / National Eye Institute (USA) Visual Function Questionnaire ). To maskerte etterforskere skal utføre analyser.

Post-prosedyre 1. dag, 1. måned, 2. måned, 3. måned og 6. måned data vil bli sammenlignet mellom studiegrupper og innen grupper.