Lymphedema esetén szupermikrosebészeti nyirok-vénás anasztomózisokhoz használt nyirokerek szövettani elemzése (s-LVA)

Háttér:

A limfödéma egy krónikus patológiás állapot, amely jelentős funkcionális károsodást okoz a betegnek, és nagy hatással van az életminőségére. Lehet elsődleges vagy másodlagos. A másodlagos nyiroködéma, amely a leggyakoribb, általában a rák, különösen az emlő, a méh és a prosztatarák műtétje és sugárkezelése miatt következik be, de előfordulhat trauma után is. Az elsődleges nyiroködéma lehet veleszületett vagy pubertáskorban kezdődhet, vagy ritkábban 35 éves kor után, ebben az esetben gyakran valamilyen kiváltó eseményt, például traumát vagy fertőzést követően.

Nincs specifikus kezelés erre a súlyosan fogyatékosságot okozó betegségre, és a betegeknek egész életükben meg kell próbálniuk csökkenteni az ödémát és korlátozni annak progresszióját rugalmas kompressziós ruha használatával és kézi nyirokelvezetéssel. Az évek során számos sebészeti megközelítést javasoltak, köztük újabban a szuper mikrosebészeti limfatikus-vénás anasztomózist (sLVA), amely lehetővé teszi a nyirok elvezetését a vénás áramlásban az elzáródástól távolabb. Az sLVA egy minimálisan invazív eljárás, amelyet helyi érzéstelenítésben hajtanak végre, és a műtétet követő napon elbocsátják. A még működőképes nyirokerek pontos megjelenítését igényli. A nyirokereket limfográfiával vizualizáljuk, fluoreszcens festék, indocianin zöld alkalmazásával. Bizonyos esetekben a mágneses rezonancia is hasznos lehet. Az LVA elvégzésére kiválasztott érből kis minták könnyen vehetők a műtét során, formalinban rögzítve és paraffinba ágyazva a szövettani és immunhisztokémiai vizsgálatokhoz anélkül, hogy a páciens további kényelmetlenséget vagy komplikációkat okozna.

A lymphedema kórszövettani vonatkozásaival kapcsolatos ismeretek rendkívül korlátozottak, ezért ezt a vizsgálatot feltáró jellegűnek kell tekinteni, valószínűleg több hipotézis generálása, mint azok megoldása. A nyiroködéma fiziopatológiai mechanizmusainak jobb megismerése hatékonyabb műtéti megközelítést eredményezhet, és bizonyos esetekben akár meg is akadályozhatja a kialakulását, ami jelentős előnyökkel jár a beteg életminősége és az országos egészségügyi költségek csökkentése szempontjából. a folyamatos fizioterápia szükségességéből adódó közvetlen költségek és a rokkantságból, a súlyos, egyidejű, kórházi kezelést igénylő fertőzésekből és a munkanapok kieséséből eredő közvetett költségek).

A vizsgálat elsődleges célja a vénákkal anasztomizált nyirokerek hisztopatológiai jellemzőinek értékelése. Az elsődleges cél két fázisra oszlik: 1. másodlagos nyiroködéma; 2. primer nyiroködémán.

A vizsgálat másodlagos célja a kórszövettani paraméterek összefüggése más klinikai adatokkal: a lymphedema típusa (primer versus másodlagos), a beteg életkora, a betegség kezdetétől számított évek, az anasztomózis anatómiai helye, az ér morfológiai jellemzői, pl. műtét előtt limfográfiával és/vagy mágneses rezonancia képalkotással értékelik.

A megszerzett ismeretek értékesek lesznek a nyiroködéma megelőzésére és kezelésére szolgáló megközelítés testreszabásához. Különösen a következőkben segít:

1. Válassza ki azokat a betegeket, akik jobban profitálhatnak az sLVA-ból, és rajtuk belül helyezze előtérbe a beavatkozást.
2. Válassza ki azokat a nyirokereket, amelyek nagyobb valószínűséggel biztosítanak hatékony vénás anasztomózist.
3. A nyiroködéma által érintett végtag különböző részeinek nyirokereinek morfológiai jellemzőinek összehasonlítása alapján válassza ki azokat az anatómiai helyeket, ahol nagyobb valószínűséggel érhető el hatékony anasztomózis.

Kísérleti tervezés Ez egy egyközpontú, nem kereskedelmi jellegű laboratóriumi vizsgálat, amelyet emberi biológiai anyagokon kell elvégezni. A betegeket egy egymást követő mintavétellel veszik fel mindazok közül, akik megfelelnek a jogosultsági feltételeknek, és hajlandóak tájékozott beleegyezést adni. A vénákkal anasztomizálandó nyirokerekből az sLVA alkalmával mintát vesznek, ez a páciens számára minden kellemetlenség nélkül megtehető, mert a nyirokerek gyakran túl hosszúak, és az anasztomózis elvégzéséhez egy szegmentumot el kell távolítani. A műtét során általában 1-3 nyirokeret/beteget távolítanak el technikai okokból. Ezeket a mintákat megsemmisítés helyett Prof. Elisabetta Weber laboratóriumába szállítják, ahol formalinnal rögzítik és paraffinba ágyazzák. Szövettani és immunhisztokémiai vizsgálatokat végeznek a kapott metszeteken, amelyeket megfelelő markerekkel és/vagy festéssel festenek a nyirok endotéliumra (D2-40 és VEGFR-3), valamint a simaizomsejtekre. Megfelelő foltokat használnak a simaizomsejtek és a kollagénrostok relatív arányának meghatározására a nyirokfalban. Az adatok morfometriai elemzését végzik el, és az adatokat össze kell kapcsolni a kapott klinikai eredményekkel.

Minden adatot statisztikailag értékelünk. Mivel nem állnak rendelkezésre olyan korábbi tapasztalatok, amelyek lehetővé tennék a vizsgálatban szereplő paraméterek változékonyságának becslését, nem lehet kockáztatni a vizsgálat statisztikai erejének formális elemzését. Mindazonáltal egy 25 betegből álló mintának elegendőnek kell lennie a paraméterek variabilitásának első becsléséhez, és tájékoztatni kell a jövőbeni hatékonysági vizsgálatokat a hipotézisvizsgálati modellteszteken (Tukey, 1977). Mivel a minta két különböző típusú nyiroködémát tartalmaz, az elsődleges és a másodlagos nyiroködémát, legalább 25 beteg szükséges ahhoz, hogy e két csoport mindegyikéhez elegendő számú beteg legyen. Nem lesz nehéz megtalálni a másodlagos nyiroködéma eseteit, mivel nagyon gyakori (főleg az iparosodott országokban, a rákkezelés műtéti és sugárkezelésének következményeként), míg az elsődleges nyiroködéma eseteit nehezebb lesz megtalálni, mivel ez a típus A lymphedema ritka, és gyakran nem diagnosztizálják vagy rosszul diagnosztizálják. Jelentős egyéni variabilitás esetén a betegszám növelése szükséges. Végül meg kell jegyezni, hogy a minták kis mérete miatt (maximum 0,4 mm átmérőjű, 2-5 mm hosszúságú) nem minden szövettani készítmény lesz sikeres. Ezért a vizsgálók úgy vélik, hogy a minták maximális számát 200-ban célszerű meghatározni.

A statisztikai elemzés a leíró módszerek mellett a paraméteres (Student t, lineáris korreláció) és nem-parametrikus (logisztikai elemzés, khi-négyzet, Spearman-féle rangkorreláció) összehasonlítási és korrelációs módszereit is felhasználja. a megtalált adatelosztás jellemzői. A lymphedema kezdetétől eltelt idő és az elsődleges és másodlagos kimenetelek közötti összefüggést Cox-féle arányos kockázati modellel vizsgáljuk. Különbségek az eredménymérések között a közelmúltban (

A tanulmány célja:

A cél a lymphedema patogenetikai vonatkozásainak és patofiziológiájának jobb megértése (amelyről nagyon keveset tudunk), valamint a nyirokerek szerkezetének értékelése a lymphedema stádiumához viszonyítva, a működő anasztomózisok elérésére jobban alkalmas nyirokerek kiválasztásának optimalizálása érdekében. . A kapott adatokat korrelálják a klinikai eredménnyel, amelyet a következő objektív paraméterekkel értékelnek: a végtag kerületének csökkenése több ponton mérve (kéz, csukló, -5 cm a könyöktől, könyök és +5 cm a könyöktől; lábnál) : lábfej, boka, térdtől -10 cm, térd, térdtől +10 cm-ig); lymphangitis epizódjainak csökkenése/hiánya; a rugalmas kompressziós ruhadarabok csökkenő kompressziós osztálya. A szubjektív paramétereket a páciens életminőségének mutatóiként is értékeljük: a kényelmetlenség csökkenése, a súlyérzet csökkenése, a könnyebb ruházati képesség, a társadalmi élet javulása.

A tanulmányt a Helsinki Nyilatkozat legutóbbi változatában foglalt etikai elvekkel összhangban végzik el. A vizsgálatban való részvétel feltétele a szabad és tájékozott hozzájárulás megszerzése.