エンドトキシン誘発性炎症および行動反応と個人差の予測因子

研究デザイン

25人の被験者が本研究に含まれ、前向き、プラセボ対照およびクロスオーバーデザインに従います。 参加者は、参加者と研究室を担当する研究員だけでなく、盲目になります。

被験者は、LPS 刺激の間に約 4 週間のウォッシュ アウトを設けて、2 回の試行を行うクロス オーバー デザインでランダムに割り当てられます。

1. 試行 1: エンドトキシン。 被験者は、2 ng/kg 体重のエンドトキシンの静脈内注射を受けます。
2. トライアル 2: プラセボ。 被験者はエンドトキシン注射のプラセボとして塩化ナトリウムの静脈内注射を受ける。

他の 10 人の健康なボランティアが、使用される行動タスクをテストするために、主要な研究の開始前にパイロット研究で募集されます。 これらの科目は、大学の職員または大学生の間で募集されます。 彼らは 4 つの特定の行動タスクを実行し、行動タスクからの結果を心理的および主観的な行動評価に関連付けるために、心理的および行動変数を評価するアンケートに記入します。 パイロット研究で募集された被験者から生物学的サンプル（血液、尿、またはTシャツのサンプル）は採取されません。

処理

LPS は、LGC Promochem AB (Albanoliden 5, 4tr, 506 30 Borås, Sweden) から提供されています。 USP (米国薬局方条約) エンドトキシン (Cat. No. 1235503) は凍結乾燥 (凍結乾燥) 粉末として提供され、各バイアルには 10,000 USP エンドトキシン ユニットが含まれています。 各バイアルには約 1 マイクログラムのエンドトキシンが含まれており、5 ミリリットル (mL) の滅菌水と混合されています。

研究手順

この研究は、ダンデリード病院の臨床科学部門で実施されます。

包含および無作為化の前に、心電図および血液検査分析を含む健康診断を受けるために、被験者は病院に来ます。 この機会に、社会人口統計学的データと病歴、および身体変数 (体重、身長、体組成) およびスウェーデン版 IPAQ (International Physical Activity Questionnaire) を使用した身体活動が評価されます。 大うつ病の病歴は、大うつ病のMini-International Neuropsychiatric Interview（M.I.N.I.）を使用して評価されます。 LPSに対する行動（または免疫）反応に影響を与える可能性があり、スクリーニング日と試験日の間で変化するとは考えられていない心理的変数も、その時点で、いくつかのWebベースの自己評価アンケートを使用して評価されます。 これらの尺度には、被験者の身体および健康リスクの認識 (内受容的認識、病気に対する脆弱性の認識、健康不安および嫌悪反応、体性感覚の増幅、不安関連の感覚に対する恐怖など) および心理的幸福 (例えば、認識されたストレス、楽観主義、社会的支援、認知的幸福）。 診察時間は全体で30～45分です。 アンケートの所要時間は約 45 分ですが、自宅で行うことができます。 参加者には、Tシャツ（綿パッドが縫い付けられています）と無香料石鹸のキットも提供されます. 参加者は、各トライアル日の朝 (脇の下を洗った後) に T シャツを着用し、到着後に脱ぐように求められます。 これにより、体臭の前処理 (ベースライン) サンプルを収集できます。

参加者はその後、エンドトキシン対プラセボの少なくとも 6 週間のウォッシュアウトで、無作為化された順序で実行される 2 つの試験を受けます。

参加者は、試験日の 48 時間前から激しい運動と飲酒を控え、試験日の 24 時間前から刺激の強いスパイスを避け、試験日の朝に軽い朝食をとるよう求められます。 参加者は朝（午前7時30分）に到着します。 朝の T シャツ (上記参照) を返却し、新しい T シャツ (脇の下に綿パッドが縫い付けられている) に着替えて、終日着用します。 T シャツは、行動評価と体臭化合物の分析に使用されます。 到着後すぐに、2 つの静脈内カテーテルが配置されます。1 つは採血用に片方の腕に、もう 1 つはエンドトキシンまたは注射後に除去される塩化ナトリウムの注入用に片手に配置されます。 静脈穿刺の痛みを最小限に抑えるために、腕に塗る麻酔クリームが提供されます。 その後、被験者は少なくとも 30 分間休息します。

休憩が終わる頃（午前8時30分頃）にエンドトキシンまたは塩化ナトリウムの注射を行います。 血液サンプル (EDTA (エチレンジアミン四酢酸) チューブに 10 mL、クエン酸ナトリウム チューブに 10 mL) は、エンドトキシンまたは塩化ナトリウム注射の直前と、注射の 1、1.5、2、3、4、5、6、および 7.5 時間後に採取されます。注入。 さらに、PAXGene™ チューブに 2.5 mL を注射前と 2、4、および 7.5 時間後に採取します。 EDTA チューブ (8 mL の血液) 内の 2 つの追加のサンプルは、注射前と注射の 3 時間後および 7.5 時間後に採取されます。 採血量は約200mLで、献血時の3分の1に相当します。 血液サンプルを使用して、炎症誘発性サイトカインおよび抗炎症性サイトカインおよびその他の炎症性マーカー (C 反応性タンパク質 - CRP など) の濃度を、酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) を使用して測定し、フローサイトメトリーを使用して免疫細胞の亜集団および微粒子の濃度を測定します。 、キャップ分析遺伝子発現（CAGE）分析および白血球数と差異を使用した遺伝子マーカー。

尿サンプルは、エンドトキシンまたは塩化ナトリウム注射の前（すなわち、カテーテルを配置する前）および注射後できるだけ遅く（古典的には注射後約4時間）に採取されます。

参加者は、連続心電図で監視されます。 酸素飽和度 (SO2)、血圧、体温は 30 分ごとに監視されます。 二酸化窒素 (NO2) を継続的に監視し、各血液サンプルと同時にメトヘモグロビンをチェックします。

行動的および心理的変数を評価する自己評価アンケートは、エンドトキシンまたは塩化ナトリウム注射の直前（休息期間中）、注射の3時間後および7.5時間後に参加者によって完了されます。 病気の行動を評価する短いアンケート (SicknessQ) は、エンドトキシンまたは塩化ナトリウム注射の直前から 7.5 時間後まで、参加者によって繰り返し記入されます。 被験者は、社会的相互作用の標準化された状況に対する参加者の行動反応を分析するために、ベッドにいるときに撮影され、社会測定バッジを着用します。

顔のさらなる評価（例えば、健康、魅力、疲労）のために、注射の前（すなわち、カテーテルが配置される前）、2時間後、および7.5時間後に写真を撮る。 並行して、顔の健康評価の潜在的な媒介効果を評価するために、皮膚の色が血液サンプル (T1.5 を除く) と同時に測定されます。 被験者の歩行と運動の分析は、注射の2時間半後に行われます。 これらのテストの後、注射の 3 時間前に、コンピュータ化された短い認知テストが行​​われます。 被験者は、注射の 3 時間後にアンケートに回答した後、モチベーション タスクを実行します。 さらに、正/負および健康/病気の刺激に対する反応を評価する 2 つのテスト (接近回避行動テストおよび感情テストの調整) は、注射の 3 時間半後に実行されます。

参加者は、昼食時 (12:30) 頃に軽食 (スナックとジュース ドリンク) を摂取することが許可され、注射後 5 時間半前に T シャツを提出します。

最後の血液サンプルは、注射の7.5時間後に採取され、参加者は退院します。

実験の監視は、麻酔と集中治療の専門家が監督する医師によって行われます。