EUSガイド下CTC + マルチオミクス: 膵臓癌再発と転移の予測

合計20名の参加者は画像検査に基づいて、切除可能膵癌群（8例）、境界切除可能膵癌群（8例）、局所進行膵癌群（4例）に層別化される。 これらの患者は画像検査で示されるように、膵臓の内視鏡的超音波（EUS）到達可能範囲内に直径>1cmの実質性占拠性病変を有する。 全ての試験患者には固有の識別番号が付与され、試験全体を通じて変更されることはない。<\/p>

組み入れ基準と除外基準を用いて患者を観察し関連検査を行い、患者が試験に適格か否かを確認する。 治療前の前回検査結果を記録する。 各種観察・検査の前にインフォームドコンセントを取得することが望ましいが、何らかの理由で医用画像検査が完了している場合、針生検の3週間以内に行われた画像検査であれば、依然としてベースラインデータとして収集可能である。針生検の2週間前に行われた他の検査項目も、研究前使用のためのベースラインデータとして収集可能であるが、これらの検査はデータの追跡可能性を保証するため、試験センター病院で実施されるべきである。<\/p>

研究者は全症例に対し厳格な順序で採取手順を行う：まずEUSガイド下で、22G ECHO 3-22針を用いて門脈血10mLを優先的に採取し（汚染回避のため）。その後、研究者は膵病変に対し5mLの湿式吸引による組織採取を3回針通過で行う。最後に末梢血10mLを採取する。サンプルはCTC100システムまたはIFC-IMP技術で処理後、scRNA-seq（10xGenomics）とプロテオミクス分析（timstofPro2/orbitrap）を行う。結果は3営業日以内に臨床医にフィードバックされる。サンプル源を知らない状態（当初は特定サブタイプにブラインド）で、細胞学者と病理学者が標本品質を評価し診断を行う。<\/p>

穿刺後1週、12週、36週に患者をフォローアップ（外来フォローアップまたは電話フォローアップ）し、患者の臨床データを収集し最終診断を確認する。<\/p>

試験中に重篤な有害事象が発生した場合、試験センターは試験患者の安全を保証するために必要な即時対応を取らなければならない。重篤な有害事象が発生した場合、研究者は有害事象を知った後24時間以内に試験申請者と試験センターの倫理委員会に通知する。また研究者は中国国家食品薬品監督管理局および地方省食品薬品監督管理局に報告書をファックス送信する。報告書を受領後、申請者は24時間以内に他の臨床試験センターに通知する。全ての重篤な有害事象はグループリーダー医療センターおよび他の試験センターにファイルされる。<\/p>

症例報告書（CRF）は研究者により記入され、関与する全患者についてCRFが記入されなければならない。これは臨床モニターにより監査され、データ管理者に引き渡されてデータ入力・管理が行われる。第1写しは申請者が保管し、第2写しは試験センターに渡され、第3写しは試験研究者が保管する。データ入力・管理は専任担当者が担当する。データ正確性を保証するため、データ入力は2名の独立したデータ管理者により二重に行われ、コンピュータ及び手動による検証後、データは統計専門家に引き渡されチェックと統計分析が行われる。<\/p>

症例報告書内の疑問点については、データ管理者がデータ解決照会（DRQ）を作成し、臨床モニターを通じて研究者に照会する。研究者は可能な限り速やかに回答・フィードバックする。研究者の回答に基づき、データ管理者はデータ修正・確認・入力を行い、必要に応じて再度DRQを発行する。<\/p>

これは専門の統計分析担当者が事前に定められた統計分析計画に従って行う。統計分析は、intention principleで確認されたフル解析セットとper-protocolセット原則に従って実施される。統計分析完了後、統計解析者は統計分析報告書を作成し、主要研究者に送付して研究報告書作成に供する。<\/p>

統計分析計画：⑴ 一般原則：① 全ての統計検定は両側検定法を用い、P<0.05を統計的有意差とみなす。② 量的指標の記述には平均値と標準偏差を計算する。分類指標の記述には各タイプの症例数と割合を記述する。⑵ 統計分析方法：① 計量データについて、門脈CTCと末梢血CTCの差を比較し、群内差との比較には対応のあるt検定または符号順位和検定を用いる。② 計数データ（CTCサブタイプ）について、群比較にはx2検定またはFisherの正確確率検定法を用いる。⑶ 脱落解析：群間の総脱落率および有害事象による脱落率の比較にはx2検定またはFisherの正確確率検定法を用いる。⑷ ベースライン値の均衡性分析：群t検定またはx2検定を用いて、人口統計学情報・バイタルサイン・病歴・基本治療およびその他のベースライン値指標を比較し、群間の均衡性を測定する。⑸ 有効性分析：有効性分析の主要指標はPV-CTC量/サブタイプとBRPCの再発/転移との相関であり、二次的有効性指標には術前補助療法ガイダンスの適用性を含む。⑹ 安全性分析：x2検定またはFisherの正確確率検定を用いて有害事象/有害反応（膵炎・出血などの穿刺合併症を含む）発生率を比較する。また表を用いて本試験プロジェクト中の有害事象を記述する。試験前後の検査結果、正常/異常変化状況、および異常変化発生時の本試験研究との関連性についても記述する。<\/p>