EUS-ohjatut CTC:t + Multi-omiikka: Haiman syövän uusiutumisen ja etäpesäkkeiden ennustaminen

Yhteensä 20 osallistujaa on stratifioitu kuvantamistutkimusten perusteella resektoitavan haiman syövän ryhmään (8 tapausta), rajoittuneesti resektoitavan haiman syövän ryhmään (8 tapausta) ja paikallisesti edistyneen haiman syövän ryhmään (4 tapausta). Näillä potilailla on kuvantamistutkimusten osoittamien solidien tilaa vievien muutosten (halkaisija >1 cm) endoskooppisen ultraäänen (EUS) saavutettavissa olevalla alueella haimassa. Jokainen koepotilas saa yksilöllisen tunnusnumeron, joka ei muutu koko tutkimuksen ajan.

Käytä sisällytys- ja poissulkemiskriteereitä potilaiden seurantaan ja suhteellisten tarkastusten tekemiseen, ja varmista, ovatko potilaat kelvollisia tutkimukseen vai eivät. Kirjaa viimeisen testin tulos ennen hoitoa. Vaikka on parempi saada tietoon perustuva suostumus ennen kaikenlaisia havaintoja ja testejä, jos jostain syystä lääketieteellinen kuvantamistutkimus on suoritettu, niin kauan kuin kuvantamistutkimus tehtiin 3 viikkoa ennen neulabiopsiaa, sitä voidaan silti kerätä perustietoina; muut laboratoriotestit, jotka on tehty 2 viikkoa ennen neulabiopsiaa, voidaan silti kerätä perustietoina esitutkimuskäyttöön, mutta nämä testit tulisi tehdä tutkimuskeskuksen sairaalassa, jotta varmistetaan datan jäljitettävyys.

Tutkijat suorittavat näytteenottomenettelyt kaikille tiukassa järjestyksessä: ensin EUS-ohjauksella 10 ml porteena suoniveri kerätään etusijalla käyttäen 22G ECHO 3-22 -neulaa väärinkäsittelyn välttämiseksi. Tämän jälkeen tutkijat tekevät neulaläpäisyt 3 kertaa haiman muutokseen 5 mL märällä imulla kudoksen hankkimiseksi. Lopuksi kerätään 10 ml perifeeristä verta. Näytteet käsitellään käyttäen CTC100-järjestelmää tai IFC-IMP-teknologiaa, jota seuraa scRNA-seq (10xGenomics) ja proteomiikka-analyysi (timstofPro2/orbitrap). Tuloksista ilmoitetaan kliinisille lääkäreille 3 työpäivän kuluessa. Tietämättä näytteen lähdettä (alun perin sokeutettuna erityisille alatyyypeille), sytologi ja patologi arvioivat näytteen laadun ja tekevät diagnoosin.

Seurataan potilaita (poliklinikkaseuranta tai puhelinseuranta) 1 viikon, 12 viikon ja 36 viikon kuluttua punktoinnista ja kerätään potilaiden kliininen data ja varmistetaan heidän lopullinen diagnoosinsa.

Tutkimuksen aikana, jos vakava haittatapahtuma sattuu, tutkimuskeskuksen on ryhdyttävä välittömästi tarvittaviin toimenpiteisiin varmistaakseen tutkittavien potilaiden turvallisuuden. Kun vakava haittatapahtuma sattuu, tutkijoiden tulee ilmoittaa tutkimushakijalle ja tutkimuskeskuksen eettiselle komitealle 24 tunnin kuluessa siitä, kun tutkijat saavat tietää haittatapahtumasta. Ja tutkijoiden tulee myös faksata raportti Kiinan valtion elintarvike- ja lääkevirastolle ja paikalliselle maakunnan elintarvike- ja lääkevirastolle. Raportin vastaanottamisen jälkeen hakijan tulee ilmoittaa muille kliinisille tutkimuskeskuksille 24 tunnin kuluessa. Kaikki vakavat haittatapahtumat tulee arkistoida ryhmänjohtajan lääketieteelliseen keskukseen ja muihin tutkimuskeskuksiin.

Tapaustutkimuslomake (CRF) täytetään tutkijoiden toimesta, jokaisella mukana olevalla potilaalla on oltava täytetty CRF. Tätä tarkastaa kliininen valvoja ja luovutetaan datahallinnoijalle syöttämistä ja hallintaa varten, ensimmäinen kopio säilytetään hakijalla, toinen kopio menee tutkimuskeskukseen ja kolmas kopio säilytetään tutkimustutkijoiden toimesta. Datasyöttö ja hallinta hoidetaan erityisesti määrätyn henkilön toimesta. Datan tarkkuuden varmistamiseksi datasyöttö tehdään kahdesti kahden riippumattoman datahallinnoijan toimesta, tietokoneellisella ja manuaalisella vahvistuksella, luovutetaan data tilastoasiantuntijoille tarkistusta ja tilastoanalyysiä varten.

Kysymyksiin ja epäselvyyksiin tapaustutkimuslomakkeessa datahallinnoija tekee Data Resolution Queryn (DRQ) ja kliinisen valvojan kautta kysyy tutkijoilta. Tutkijat vastaavat ja palauttavat tiedot mahdollisimman pian. Tutkijoiden vastauksen perusteella datahallinnoija tekee datan muokkaamista, vahvistamista tai syöttämistä, ja tarvittaessa lähettää DRQ:n uudelleen.

Tämän suorittavat erikoistuneet tilastoanalyysihenkilöt ennalta määrätyn tilastoanalyysisuunnitelman mukaisesti. Tilastoanalyysi suoritetaan aikomusperiaatteen vahvistaman täyden analyysijoukon ja protokollajoukkoperiaatteen mukaisesti. Tilastoanalyysin valmistuttua tilastoanalyytikko antaa tilastoanalyysiraportin ja lähettää tämän päätutkijoille tutkimusraportin kirjoittamista varten.

Tilastoanalyysisuunnitelma: ⑴ Yleinen periaate: ① kaikki tilastotestit käyttävät kaksisuuntaista testimenetelmää, P<0,05 katsotaan testatun eron olevan tilastollisesti merkitsevä. ② Kvantitatiivisen indikaattorin kuvaus laskee keskiarvon ja keskihajonnan. Luokitusindikaattorin kuvaus kuvaa tapausten lukumäärän ja prosenttiosuuden kaikista tapauksista. ⑵ Tilastoanalyysimenetelmä: ① Mittausdatalle, vertaa eroa Portti-suonen CTC:n ja Perifeerisen veren CTC:n välillä, käytä paritettua t-testiä tai symbolijärjestyssummatestiä vertaamaan eroa ryhmän sisällä. ② Laskentadatalle (CTC-alatyypit), käytä x2-testiä tai Fisherin tarkkaa testimenetelmää ryhmien vertaamiseen. ⑶ Shedding-analyysi: Ryhmien kokonaisshedding-prosenteiden ja haittatapahtumien aiheuttamien shedding-prosenteiden vertailu käyttää x2-testiä tai Fisherin tarkkaa testimenetelmää. ⑷ Perusarvon tasapainoanalyysi: Käytä ryhmän t-testiä tai x2-testiä vertailemaan demografiatietoja ja elintoimintoja, sairaushistoriaa ja perushoitoa sekä muita perusarvon indikaattoreita ryhmien tasapainon mittaamiseksi. ⑸ Tehokkuusanalyysi: Tehokkuusanalyysin pääindikaattori on PV-CTC-määrän/alatyypin ja BRPC:n uusiutumisen/metastaasin välinen korrelaatio, ja toissijaisten tehokkuusindikaattorit sisältävät neoadjuvanttiterapian ohjauksen soveltuvuuden. ⑹ Turvallisuusanalyysi: Käytä x2-testiä tai Fisherin tarkkaa testimenetelmää vertailemaan haittatapahtuma/haittareaktio (sisältäen punktointikomplikaatiot kuten haimantulehdus, verenvuoto) prosentteja. Ja käytä taulukkoa kuvaamaan tämän tutkimushankkeen aikana tapahtuneita haittatapahtumia; laboratoriotestitulokset ennen ja jälkeen tutkimuksen, normaali/poikkeava muutostila ja suhde tähän tutkimushankkeeseen, kun poikkeavia muutoksia tapahtui.