ベリリウム インフリキシマブ研究: 臨床介入試験 (BISCIT)

仮説：

この研究の中心的な仮説は、インフリキシマブが慢性ベリリウム疾患 (CBD) の治療に有効であることが証明され、ベリリウム特異的 T 細胞の増殖とサイトカイン産生を阻害することによって有効になるというものです。

具体的な目的:

特定の目的 1: 慢性ベリリウム症に対す​​るインフリキシマブの臨床的有効性を判断すること。 インフリキシマブの有効性は、プレドニゾンおよび/またはメトトレキサートによる現在の治療にもかかわらず症状が残っており、肺障害のあるCBD患者の運動終了時の動脈ガス交換または動脈肺胞酸素勾配（A-ad02）の改善によって測定されます。 副次評価項目には、気流、肺容量、拡散能力 (DLCO) の変化、胸部 X 線上の小さな陰影の多発、呼吸困難スコア、および生活の質に関するアンケートが含まれます。

特定の目的 2: CBD の生物学的機能の中間マーカーに対するインフリキシマブの効果を決定すること。 インビトロ研究では、ベリリウム (Be) 刺激によるリンパ球増殖の減少によって測定される、培養中の血液および肺細胞に対するインフリキシマブの効果を調べます。 TNF-a、IFN-g、およびIL-2を含む、Be刺激によるサイトカイン産生の減少;マクロファージまたはリンパ球の Be 刺激によるアポトーシスの変化。

研究デザインと方法: CBD 患者におけるインフリキシマブの薬物動態に関する情報は入手できないため、他の同様の炎症状態でのインフリキシマブの使用から得られる薬物動態情報が、このプロトコルの投与計画を選択するための基礎を形成しました。 特に、多施設試験（NJC IRB HS-1771）で現在進行中のサルコイドーシスプロトコルC0168T48で使用される用量選択に基づいて、この研究には5mg / kgの用量が使用されます。

これは、プレドニゾンおよび/またはメトトレキサート治療にもかかわらず肺病変を伴う症候性CBD患者において、5mg/kgで投与されたインフリキシマブの有効性をプラセボと比較して評価するための、研究者主導の40週間の無作為化二重盲検プラセボ対照試験です。 インフリキシマブまたはプラセボは、0、2、6、12、18、および 24 週目に、スパイロメトリー、肺容量、および DLCO を含めて注入されます。 約 20 人の参加者が、3:1 の薬物: プラセボ率で国立ユダヤ人医療研究センターの研究に登録されます。

この研究の主要なエンドポイントは、ベースライン テストから 28 週目の A-adO2 のテストへの変更であり、6 分間のウォーキングの最後のエクササイズになります。 ベースライン評価では、被験者は完全な肺機能検査、ベリリウムリンパ球増殖検査（BeLPT）のための採血、6分間の歩行、胸部X線、生活の質と呼吸困難に関するアンケートを受ける。 フォローアップの完全な肺機能検査、休息と運動終了のA-ad02、6分間の歩行で達成された合計距離（ワークロード）のパルスオキシメトリー、および胸部X線写真は12週目に測定されます。最終結果の測定（ベースライン検査と同じ） 、BALによる気管支鏡検査を含む、28週目に繰り返されます。 フォローアップの予約は、患者の一般的な健康状態を評価するために 40 週に予定されます。また、休息と運動終了の測定 A-ad02 および 6 分間の歩行によるパルスオキシメトリー、肺機能検査、QOL/呼吸困難スコアリング、および胸部 X 線写真インタースティシャルを測定します。肺混濁の豊富なスコア。

Ｂｅ刺激免疫応答に対するインフリキシマブの効果は、インフリキシマブ療法の前後で以下のマーカーを比較することによって評価される：１．血液および洗浄細胞（ＢＡＬ）からのＢｅＬＰＴ；２． 2. TNF-α、IFN-γ、および IL-2 を含む BAL 細胞からの刺激されたサイトカイン産生; 3. 細胞特異的なアポトーシス。 アッセイには、非刺激コントロール、100 mM BeSO4、100 mM Al2(SO4)3 金属塩コントロール、PHA - リンパ球増殖コントロール、インフリキシマブ コントロール、インフリキシマブ + BeSO4、インフリキシマブ + Al2(SO4)3 が含まれます。 Be 暴露後 4、5、および 6 日目に、ウェルを DNA 特異的前駆体である 3H-TdR でパルスし、4 時間インキュベートし、ガラス繊維フィルターで回収し、液体シンチレーション法を使用してカウントします。 結果は刺激指数として報告されます。これは、非刺激群の 1 分あたりのカウント数に対する治療群の 1 分あたりのカウント数の比率です。 サイトカイン産生に対するインフリキシマブの効果を測定するために、CBD BAL および CBD PBMC を Be で 24 時間刺激します。 ELISAを使用して、TNF-α、IFN-γ、およびIL-2の上清レベルを決定します。 ベリリウムに 24 時間暴露した後、上清を回収し、TNF-α、IFN-γ、および IL-2 の ELISA 検査を行います。 インフリキシマブがリンパ球またはマクロファージのアポトーシスの増加を引き起こすかどうかを判断するために、CBD BAL 細胞を Be とともに 24 時間培養します。 細胞は、細胞内で活性化されたカスパーゼ-3、カスパーゼ-8、およびカスパーゼ-9 に対して、CD4+ (Th1) および CD71+ マクロファージについて二重染色されます。 これらの in vitro 研究は、既知の抗原である CBD を用いた疾患モデルを使用して、免疫介在性疾患に対するインフリキシマブの潜在的な生物学的機能を評価するために使用されます。