Studio berillio Infliximab: sperimentazione clinica interventistica (BISCIT)

Ipotesi:

L'ipotesi centrale di questo studio è che infliximab si rivelerà efficace nel trattamento della malattia cronica da berillio (CBD) e che lo farà inibendo la proliferazione delle cellule T specifiche del berillio e la produzione di citochine.

Obiettivi specifici:

Obiettivo specifico 1: Determinare l'efficacia clinica di infliximab sulla malattia cronica da berillio. L'efficacia di infliximab sarà misurata dal miglioramento dello scambio gassoso arterioso o del gradiente di ossigeno alveolare arterioso (A-ad02) alla fine dell'esercizio in soggetti con CBD che rimangono sintomatici e con compromissione polmonare nonostante l'attuale trattamento con prednisone e/o metotrexato. Le misure di esito secondario includeranno il cambiamento del flusso d'aria, il volume polmonare, la capacità di diffusione (DLCO), la profusione di piccole opacità alla radiografia del torace, il punteggio della dispnea e i questionari sulla qualità della vita.

Obiettivo specifico 2: Determinare l'effetto di infliximab sui marcatori intermedi della funzione biologica nel CBD. Gli studi in vitro esamineranno l'effetto di infliximab sulle cellule ematiche e polmonari in coltura, come misurato da una diminuzione della proliferazione linfocitaria stimolata dal berillio (Be); una diminuzione della produzione di citochine stimolate da Be, inclusi TNF-a, IFN-g e IL-2; alterata apoptosi stimolata da Be di macrofagi o linfociti.

Disegno e metodi della ricerca: poiché non sono disponibili informazioni sulla farmacocinetica di infliximab nei pazienti con CBD, le informazioni farmacocinetiche disponibili dall'uso di infliximab in altre condizioni infiammatorie simili hanno costituito la base per selezionare il regime posologico per questo protocollo. In particolare, per questo studio verrà utilizzata una dose di 5 mg/kg, basata sulla selezione della dose utilizzata nel protocollo per la sarcoidosi C0168T48 attualmente in corso in uno studio multicentrico (NJC IRB HS-1771).

Si tratta di uno studio avviato da un ricercatore, della durata di 40 settimane, randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo per valutare l'efficacia di infliximab dosato a 5 mg/kg, rispetto al placebo, in soggetti con CBD sintomatico con coinvolgimento polmonare nonostante il trattamento con prednisone e/o metotrexato. Infliximab o placebo verranno infusi alle settimane 0, 2, 6, 12, 18 e 24, inclusi spirometria, volumi polmonari e DLCO. Circa 20 partecipanti saranno arruolati nello studio presso il National Jewish Medical and Research Center con un farmaco 3: 1: tasso di placebo.

L'endpoint primario di questo studio sarà un passaggio dal test di base al test della settimana 28 nell'A-adO2 alla fine dell'esercizio su una camminata di 6 minuti. Alla valutazione basale, i soggetti saranno sottoposti a test di funzionalità polmonare completo, un prelievo di sangue per il test di proliferazione dei linfociti al berillio (BeLPT), 6 minuti di cammino, radiografia del torace e questionari sulla qualità della vita e sulla dispnea. Alla settimana 12 verranno misurati il ​​test di funzionalità polmonare completo di follow-up, il riposo e la fine dell'esercizio A-ad02, la pulsossimetria con la distanza totale (carico di lavoro) raggiunta su una camminata di 6 minuti e la radiografia del torace. , inclusa la broncoscopia con BAL, sarà ripetuta alla settimana 28. Un appuntamento di follow-up sarà programmato alla settimana 40 per valutare la salute generale dei pazienti, nonché misurare il riposo e la fine dell'esercizio A-ad02 e la pulsossimetria con 6 minuti di cammino, test di funzionalità polmonare, punteggio QOL/dispnea e radiografia del torace interstiziale punteggio di profusione di opacità polmonare.

Gli effetti di infliximab sulla risposta immunitaria stimolata da Be saranno valutati confrontando i seguenti marcatori prima e dopo la terapia con infliximab: 1. BeLPT da sangue e cellule di lavaggio (BAL); 2. Produzione di citochine stimolate dalle cellule BAL, inclusi TNF-a, IFN-γ e IL-2; 3. Apoptosi cellula-specifica. Il test includerà un controllo non stimolato, 100 mM BeSO4, 100 mM Al2(SO4)3 controllo del sale metallico, PHA - controllo della proliferazione linfocitaria, controllo infliximab, infliximab + BeSO4, infliximab + Al2(SO4)3. Ai giorni 4, 5 e 6 dopo l'esposizione a Be, i pozzetti vengono pulsati con il precursore specifico del DNA, 3H-TdR, incubati per quattro ore, raccolti su filtri in fibra di vetro e per il conteggio vengono utilizzati metodi di scintillazione liquida. I risultati sono riportati come indice di stimolazione, che è un rapporto tra i conteggi al minuto del gruppo di trattamento e i conteggi al minuto del gruppo non stimolato. Per determinare l'effetto di infliximab sulla produzione di citochine, CBD BAL e CBD PBMC saranno stimolati con Be per 24 ore. L'ELISA verrà utilizzato per determinare i livelli di surnatante di TNF-α, IFN-γ e IL-2. Dopo 24 ore di esposizione al berillio, raccoglieremo i supernatanti ed eseguiremo il test ELISA per TNF-α, IFN-γ e IL-2. Per determinare se l'infliximab causa un aumento dell'apoptosi dei linfociti o dei macrofagi, le cellule CBD BAL saranno coltivate per 24 ore con Be. Le cellule saranno colorate in doppio per i macrofagi CD4+ (Th1) e CD71+ rispetto a caspasi-3, caspasi-8 e caspasi-9 attivate intracellulari. Questi studi in vitro saranno utilizzati per valutare la potenziale funzione biologica di infliximab sulle malattie immuno-mediate utilizzando un modello di malattia con antigene noto, il CBD.