Beryllium-Infliximab-Studie: Klinische Interventionsstudie (BISCIT)

Hypothese:

Die zentrale Hypothese dieser Studie ist, dass sich Infliximab bei der Behandlung der chronischen Berylliumkrankheit (CBD) als wirksam erweisen wird, und zwar durch Hemmung der Beryllium-spezifischen T-Zell-Proliferation und Zytokinproduktion.

Spezifische Ziele:

Spezifisches Ziel 1: Bestimmung der klinischen Wirksamkeit von Infliximab bei chronischer Berylliumerkrankung. Die Wirksamkeit von Infliximab wird anhand der Verbesserung des arteriellen Gasaustauschs oder des arteriellen alveolären Sauerstoffgradienten (A-ad02) am Ende der Belastung bei Patienten mit CBD gemessen, die trotz aktueller Behandlung mit Prednison und/oder Methotrexat symptomatisch und mit Lungenfunktionsstörung bleiben. Zu den sekundären Ergebnismessungen gehören die Änderung des Luftstroms, des Lungenvolumens, der Diffusionskapazität (DLCO), die Fülle kleiner Trübungen auf dem Röntgen-Thorax, der Dyspnoe-Score und Fragebögen zur Lebensqualität.

Spezifisches Ziel 2: Bestimmung der Wirkung von Infliximab auf Zwischenmarker der biologischen Funktion in CBD. In-vitro-Studien werden die Wirkung von Infliximab auf Blut- und Lungenzellen in Kultur untersuchen, gemessen anhand einer Abnahme der durch Beryllium (Be) stimulierten Lymphozytenproliferation; eine Abnahme der Be-stimulierten Zytokinproduktion, einschließlich TNF-a, IFN-g und IL-2; veränderte Be-stimulierte Apoptose von Makrophagen oder Lymphozyten.

Forschungsdesign und -methoden: Da keine Informationen zur Pharmakokinetik von Infliximab bei Patienten mit CBD verfügbar sind, bildeten die verfügbaren pharmakokinetischen Informationen aus der Anwendung von Infliximab bei anderen ähnlichen entzündlichen Erkrankungen die Grundlage für die Auswahl des Dosierungsschemas für dieses Protokoll. Insbesondere wird für diese Studie eine Dosis von 5 mg/kg verwendet, basierend auf der Dosisauswahl, die im Sarkoidose-Protokoll C0168T48 verwendet wird, das derzeit in einer multizentrischen Studie (NJC IRB HS-1771) durchgeführt wird.

Dies ist eine vom Prüfarzt initiierte, 40-wöchige, randomisierte, doppelblinde, placebokontrollierte Studie zur Bewertung der Wirksamkeit von Infliximab in einer Dosis von 5 mg/kg im Vergleich zu Placebo bei Personen mit symptomatischem CBD mit Lungenbeteiligung trotz Prednison- und/oder Methotrexat-Behandlung. Infliximab oder Placebo werden in den Wochen 0, 2, 6, 12, 18 und 24 infundiert, einschließlich Spirometrie, Lungenvolumen und DLCO. Ungefähr 20 Teilnehmer werden in die Studie am National Jewish Medical and Research Center mit einem 3:1-Medikament: Placebo-Verhältnis aufgenommen.

Der primäre Endpunkt dieser Studie wird ein Wechsel vom Ausgangstest zum Test in Woche 28 bei der A-adO2-Endübung bei einem 6-minütigen Spaziergang sein. Bei der Ausgangsbewertung werden die Probanden einem vollständigen Lungenfunktionstest, einer Blutentnahme für den Beryllium-Lymphozyten-Proliferationstest (BeLPT), einem 6-minütigen Spaziergang, einer Röntgenaufnahme des Brustkorbs und Fragebögen zur Lebensqualität und Atemnot unterzogen. Follow-up-Vollständiger Lungenfunktionstest, Ruhe und Ende der Übung A-ad02, Pulsoximetrie mit Gesamtstrecke (Arbeitsbelastung), die bei einem 6-minütigen Spaziergang erreicht wurde, und Thorax-Röntgenbild werden in Woche 12 gemessen. Endgültige Ergebnismessungen (wie Baseline-Tests) , einschließlich Bronchoskopie mit BAL, wird in Woche 28 wiederholt. In Woche 40 wird ein Nachsorgetermin angesetzt, um den allgemeinen Gesundheitszustand der Patienten zu beurteilen sowie die Ruhe und das Ende der Übung A-ad02 und die Pulsoximetrie mit 6-minütigem Gehen, Lungenfunktionstest, QOL/Dyspnoe-Scoring und interstitielle Röntgenaufnahme des Brustkorbs zu messen Lungenopazitäts-Profusions-Score.

Die Auswirkungen von Infliximab auf die Be-stimulierte Immunantwort werden durch Vergleich der folgenden Marker vor und nach der Infliximab-Therapie bewertet: 1. BeLPT aus Blut- und Lavagezellen (BAL); 2. Be-stimulierte Zytokinproduktion von BAL-Zellen, einschließlich TNF-α, IFN-γ und IL-2; 3. Zellspezifische Apoptose. Der Assay umfasst eine unstimulierte Kontrolle, 100 mM BeSO4, 100 mM Al2(SO4)3-Metallsalzkontrolle, PHA-Lymphozytenproliferationskontrolle, Infliximab-Kontrolle, Infliximab + BeSO4, Infliximab + Al2(SO4)3. An den Tagen 4, 5 und 6 nach Be-Exposition werden die Wells mit dem DNA-spezifischen Vorläufer 3H-TdR gepulst, vier Stunden lang inkubiert, auf Glasfaserfiltern geerntet und Flüssigszintillationsverfahren zum Zählen verwendet. Die Ergebnisse werden als Stimulationsindex angegeben, der ein Verhältnis der Zählungen pro Minute der Behandlungsgruppe zu den Zählungen pro Minute der nicht stimulierten Gruppe ist. Um die Wirkung von Infliximab auf die Zytokinproduktion zu bestimmen, werden CBD BAL und CBD PBMC 24 Stunden lang mit Be stimuliert. ELISA wird verwendet, um die TNF-α-, IFN-γ- und IL-2-Überstandsspiegel zu bestimmen. Nach 24 Stunden Beryllium-Exposition werden wir Überstände ernten und ELISA-Tests auf TNF-α, IFN-γ und IL-2 durchführen. Um festzustellen, ob Infliximab eine Zunahme der Apoptose von Lymphozyten oder Makrophagen verursacht, werden CBD-BAL-Zellen für 24 Stunden mit Be kultiviert. Die Zellen werden doppelt gefärbt für CD4+ (Th1) und CD71+ Makrophagen im Vergleich zu intrazellulär aktivierter Caspase-3, Caspase-8 und Caspase-9. Diese In-vitro-Studien werden verwendet, um die potenzielle biologische Funktion von Infliximab bei immunvermittelten Erkrankungen unter Verwendung eines Krankheitsmodells mit bekanntem Antigen, CBD, zu bewerten.