加齢黄斑変性症における補体因子Hハプロタイプと喫煙 (CFH&AMD)

研究デザインと方法 A) 研究デザイン この研究は、喫煙が補体活性化を増加させるかどうか、またこの血清補体成分のレベルの上昇に特に感受性のある特定の AMD 遺伝子型が存在するかどうかを決定するように設計されています。

B) 被験者と対照の選択 症例被験者と年齢が一致した（5 年以内）対照被験者は、ジョンソンおよびデベイキー VA メディカル センター、およびサウスカロライナ医科大学 (MUSC) の人体調査審査委員会によって承認されたプロトコールに基づいて募集されます。 。

包含基準

• AMDの明確な診断があり、眼底の少なくとも20/40のビューを有する症例。
• 5 未満の小さな硬ドルーゼンと眼底の少なくとも 20/40 ビューを備えた対照被験者。
• すべての被験者は、血液サンプルを提供する能力、以下にリストされている除外基準がないことを証明する能力、自身の同意を与える能力、または同意を与えるための法定代理人を用意する能力を有し、検査のあらゆる側面を完了することができ、一般的には研究医師の意見では医学的健康状態は良好。

除外基準

• 同意を得ることができず、法定代理人がいない人、両目の最高矯正視力が20/40より悪い人、網膜症を引き起こすことが知られている薬を服用している人、検査を完了するのに協力できない人、そして自ら出頭した人中膜混濁を伴い、ドルーゼンや網膜色素上皮の色素障害など、表現型が AMD と重なる疾患を示します。またはAMDを診断するには不十分な証拠を提供します。
• 黄斑ジストロフィー、トキソプラズマ症、ヒストプラズマ症、変性近視、中心性漿液性脈絡網膜症、あるいはドルーゼンを認識する能力を低下させる疾患や治療（レーザー光凝固、以前の網膜剥離手術、後部ブドウ膜炎、外傷など）を患っている人。

サンプルサイズと検出力推定 合計 150 人の症例被験者と 150 人の対照被験者が募集されます。 サンプル サイズは、次の仮定を使用して研究結果を統計的にシミュレートすることによって決定されました。アルファ レベル 0.05。両面仮説検定。 CC、CT、TT H 因子遺伝子型全体の予想分布はそれぞれ 8.1%、52%、39.9% [1、対象者の約 35% が現在の喫煙者であると仮定します。 このサンプルサイズは、この研究の主な焦点である、遺伝子型相互作用による重大な喫煙を検出するための 85% の検出力を提供します。

募集症例と年齢が一致した（5 歳以内）対照被験者が募集されます。 募集は 2 つの方法で行われます。1) 診察室での診断後に電話または募集されます。 署名された同意に基づいて、これらの被験者は喫煙状況に関する情報の提供も求められ、血液サンプル (3 mL チューブ 2 本) が収集されます。

C) 結果の測定 AMD の発生率は、眼底写真および受け入れられている AMD の定義に基づいて、事前の臨床訪問で決定されます。 AMD疾患の重症度を特徴付けるのに役立つ追加の結果測定には、視野検査、OCT、およびフルオレセイン血管造影が含まれる場合があります。

D) データ分析

• 補体因子Ba、C3d、fDの正規化血清レベルおよびfH活性レベルとして収集されたデータは、データの品質がさらなる分析に適切であることを保証するために、最初に単変量統計で評価されます。 各測定パラメータ（すなわち補体因子の血清レベル）、AMD診断、遺伝子型および喫煙の間の関連性は、必要に応じてスチューデントt検定またはウィルコクソン順位和検定を使用して層別二変量法で評価され、標準測定評価が使用されます。正常性、歪みなどをチェックします。
• 多変量解析は一般的な線形混合モデル [5] を使用して実行されます。 モデルには、被験者の反復測定間の依存性を説明するために、ランダムな被験者効果が含まれます。 このタイプのモデルは、実験室での測定が 3 回行われる場合など、被験者に対して複数の測定がある場合に最適です。 対象となる従属変数は補体レベルの測定値（必要に応じて対数変換）となり、独立変数にはAMD状態（症例/対照）、H因子遺伝子型（CC、CT、TT）、喫煙（現在、以前、一度もなし）が含まれます。 )、および因子 H の遺伝子型と喫煙状況に関係する交互作用項。 相互作用項は、血清補体レベルに対する H 因子の遺伝子型と喫煙の影響が線形 (相加的) であるか、非線形 (例: 乗算的) であるかを判断するのに役立ちます。 このモデルには、年齢、性別、人種の調整も含まれており、これらはすべて補体因子に影響を与える可能性があります。 したがって、ハプロタイプ間の差異は、年齢、性別、または人種に起因すると考えられる影響に対して調整 (補正) されます。 ランダム被験者効果についてさまざまな相関構造が検査され、研究者は赤池情報量基準を使用して最も適切なモデルを選択します。 二次分析では、喫煙歴のない人を除外し、パック/年の履歴間の関連性 (存在する場合) の性質を評価します。 H因子の遺伝子型。およびその補体レベル。 喫煙がAMDのリスクに関して被験者のH因子遺伝子型と相互作用するかどうかを決定するために、追加の分析（条件付きロジスティック回帰を使用）が行われます。 繰り返しますが、このモデルは年齢、性別、人種に合わせて調整され、結果は AMD のリスクに関連するオッズ比として表されます。

E) 潜在的なリスク

• 被験者は、この研究には含まれていない包括的な眼科検査を受けています。 潜在的なリスクは説明できません。
• 全血の静脈穿刺。 静脈穿刺のリスクは、静脈穿刺部位の痛みやあざです。失神またはめまい。または針刺し部位の感染。 これらはいずれも永久的または重大な損失ではありません。 臨床スタッフはこれらの合併症に対処するための訓練を受けています。
• 個人情報。 個人情報 (血液検体、個人履歴、遺伝情報など) の共有にはリスクがないわけではありません。 病気や形質の原因となる遺伝子を特定する研究は、ヒトの病気における遺伝子の役割を理解する上でますます重要な方法となっています。 参加者に同意書が渡されたのは、ジョンソン・アンド・デベーキーVA医療センターの研究者が参加者の血液サンプルを研究プロジェクトに含めたいと考えているため、または将来の研究のためにそのような生物学的標本を保存したいためです。

血液の研究や保存を許可する前に、参加者が知っておくべきことがいくつかあります。

• 血液サンプルは英数字の識別子で保存され、最終的には参加者に関連付けられる可能性があります。
• 名前に加えて、参加者に関する他の情報が血液サンプルに関連付けられている可能性があります。
• 参加者の遺伝情報は多くの場合、家族に当てはまります。
• 参加者は、自分の血液を研究したり、将来の研究のために保存したりすることを拒否する権利を有します。
• サウスカロライナ州法では、あらゆる検査や研究から得られた遺伝情報を機密保持することが義務付けられています。
• 遺伝子研究では、参加者や他の被験者に結果や将来の結果を知らせることについて難しい問題が生じます。
• 参加者が潜在的な遺伝性疾患を懸念している場合、参加者と担当医師は、その疾患に特化した検査を選択する可能性があります。 これには追加の血液または組織サンプルが必要ですが、この研究プロジェクトには含まれません。
• 疾患の遺伝マーカーの存在は、必ずしも参加者がその疾患を発症することを意味するものではありません。

未知のリスク。 研究者は、この研究への参加について考えを変える可能性のあることを参加者が知った場合、参加者に知らせます。