Haplotypes du facteur H du complément et tabagisme dans la dégénérescence maculaire liée à l'âge (CFH&AMD)

CONCEPTION ET MÉTHODES DE RECHERCHE A) Conception de l'étude Cette étude est conçue pour déterminer si le tabagisme augmente l'activation du complément et s'il existe des génotypes spécifiques de la DMLA qui sont particulièrement sensibles à ce niveau élevé de composants du complément sérique.

B) Sélection des sujets et des témoins Les sujets cas et les sujets témoins appariés selon l'âge (dans les 5 ans) seront recrutés selon un protocole approuvé par les centres médicaux Johnson and DeBakey VA et le Comité d'examen des enquêtes humaines de l'Université médicale de Caroline du Sud (MUSC) .

Critère d'intégration

• Sujets de cas avec un diagnostic clair de DMLA et une vue d'au moins 20/40 du fond d'œil.
• Sujets témoins avec <5 petits drusen durs et au moins une vue 20/40 du fond d'œil.
• Tous les sujets auront la capacité de fournir un échantillon de sang, de démontrer l'absence de critères d'exclusion énumérés ci-dessous, de fournir leur propre consentement ou d'avoir un représentant légal disponible pour donner leur consentement, capable de compléter tous les aspects du test et d'être en général bonne santé médicale de l'avis du médecin de l'étude.

Critère d'exclusion

• Les personnes incapables de donner leur consentement et qui n'ont pas de représentant légal, dont la meilleure acuité visuelle corrigée pour les deux yeux est inférieure à 20/40, qui prennent un médicament connu pour causer une rétinopathie, incapables de coopérer pour effectuer les tests et qui se présentent avec une opacité médiale, qui présentent des maladies qui chevauchent phénotypiquement la DMLA telles que les drusen ou les troubles pigmentaires de l'épithélium pigmentaire rétinien ; ou fournir des preuves insuffisantes pour diagnostiquer la DMLA.
• Les personnes qui se présentent avec des dystrophies maculaires, une toxoplasmose, une histoplasmose, une myopie dégénérative, une choriorétinopathie séreuse centrale ou toute maladie ou traitement qui diminuerait la capacité de reconnaître les drusen, comme la photocoagulation au laser, une chirurgie antérieure de décollement de la rétine, une uvéite postérieure et un traumatisme.

Taille de l'échantillon et estimation de la puissance Au total, 150 sujets cas et 150 sujets témoins seront recrutés. La taille de l'échantillon a été déterminée en simulant statistiquement les résultats de l'étude en utilisant les hypothèses suivantes : un niveau alpha de 0,05 ; test d'hypothèse bilatéral ; et une distribution attendue entre les génotypes du facteur H CC, CT et TT de 8,1 %, 52 % et 39,9 %, respectivement, [1 et en supposant qu'environ 35 % des sujets sont des fumeurs actuels. Cette taille d'échantillon fournirait une puissance de 85% pour détecter une interaction significative entre le tabagisme et le génotype, l'objectif principal de cette étude.

Recrutement Des cas et des sujets témoins appariés selon l'âge (dans les 5 ans) seront recrutés. Le recrutement se fera de deux manières : 1) ils seront appelés ou recrutés après le diagnostic au cabinet du médecin. Sur consentement signé, ces sujets seront également invités à fournir des informations sur leur statut tabagique, et un échantillon de sang (deux tubes de 3 ml) sera prélevé.

C) Mesures des résultats L'incidence de la DMLA aura été déterminée lors de la visite clinique précédente sur la base de photographies du fond d'œil et des définitions acceptées de la DMLA. Des mesures de résultats supplémentaires qui aideront à caractériser la gravité de la DMLA pourraient inclure le test du champ visuel, l'OCT et les angiographies à la fluorescéine.

D) Analyses de données

• Les données rassemblées sous forme de taux sériques normalisés des facteurs de complément Ba, C3d et les niveaux d'activité fD et fH seront initialement évaluées avec des statistiques univariées pour s'assurer que la qualité des données est adéquate pour des analyses ultérieures. L'association entre chaque paramètre mesuré (c'est-à-dire les taux sériques de facteurs du complément), le diagnostic de DMLA, le génotype et le tabagisme sera évaluée de manière stratifiée à deux variables à l'aide de tests t de Student ou de tests de somme de rang de Wilcoxon, selon le cas, et des évaluations de mesure standard seront utilisées. pour vérifier la normalité, le biais, etc.
• Des analyses multivariées seront menées à l'aide de modèles mixtes linéaires généraux [5]. Les modèles incluront des effets de sujet aléatoires pour tenir compte de la dépendance entre les mesures répétées des sujets. Ce type de modèle est idéal lorsqu'il y a plusieurs mesures sur des sujets, comme lorsque les mesures de laboratoire sont effectuées en triple exemplaire. Les variables dépendantes d'intérêt seront les mesures du niveau de complément (transformé en log, si nécessaire), tandis que les variables indépendantes comprendront le statut de la DMLA (cas/témoin), le génotype du facteur H (CC, CT, TT), le tabagisme (actuel, ancien, jamais ), et un terme d'interaction impliquant le génotype du facteur H et le statut tabagique. Le terme d'interaction nous aidera à déterminer si l'impact du génotype du facteur H et du tabagisme sur les niveaux de complément sérique est linéaire (additif) ou non linéaire (par exemple, multiplicatif). Le modèle comprendra également des ajustements pour l'âge, le sexe et la race, qui peuvent tous affecter les facteurs de complément. Ainsi, toute différence entre les haplotypes sera ajustée (corrigée) pour les effets pouvant être attribués à l'âge, au sexe ou à la race. Différentes structures de corrélation seront examinées pour les effets aléatoires du sujet, et les enquêteurs utiliseront le critère d'information d'Akaike pour sélectionner le modèle le plus approprié. Les analyses secondaires consisteront à exclure les personnes n'ayant jamais fumé, afin d'évaluer la nature de l'association (le cas échéant) entre les historiques pack/année. génotypes du facteur H. et leurs niveaux de complément. Une analyse supplémentaire (utilisant la régression logistique conditionnelle) sera effectuée pour déterminer si le tabagisme interagit avec le génotype du facteur H d'un sujet en ce qui concerne le risque de DMLA. Encore une fois, ce modèle sera ajusté en fonction de l'âge, du sexe et de la race, et les résultats seront exprimés sous forme de rapports de cotes associés au risque de DMLA.

E) Risques potentiels

• Les sujets auront reçu un examen oculaire complet qui ne faisait pas partie de cette étude. Les risques potentiels ne peuvent pas être décrits.
• Ponction veineuse pour le sang total. Les risques de ponction veineuse sont des douleurs ou des ecchymoses au site de ponction veineuse ; évanouissement ou étourdissements; ou une infection au site de la piqûre d'aiguille. Aucune de ces pertes n'est permanente ou substantielle. Le personnel clinique est formé pour faire face à ces complications.
• Informations personnelles. Le partage d'informations personnelles (échantillons sanguins, antécédents personnels, informations génétiques, etc.) n'est pas sans risque. La recherche pour identifier les gènes qui causent ou contribuent à une maladie ou à un trait est un moyen de plus en plus important d'essayer de comprendre le rôle des gènes dans la maladie humaine. Les participants ont reçu un formulaire de consentement parce que les enquêteurs des Johnson and DeBakey VA Medical Centers veulent inclure l'échantillon de sang des participants dans un projet de recherche, ou parce qu'ils veulent conserver ces échantillons biologiques pour de futures recherches.

Il y a plusieurs choses que les participants doivent savoir avant de permettre que le sang soit étudié ou conservé.

• Les échantillons de sang seront stockés sous un identifiant alphanumérique qui pourrait éventuellement être lié aux participants.
• En plus du nom, d'autres informations sur les participants peuvent être liées à des échantillons de sang.
• Les informations génétiques sur les participants s'appliqueront souvent aux membres de la famille.
• Les participants ont le droit de refuser que leur sang soit étudié ou conservé pour de futures études de recherche.
• La loi de la Caroline du Sud exige que les informations génétiques, obtenues à partir de tout test ou de cette recherche, restent confidentielles.
• La recherche génétique soulève des questions difficiles quant à l'information des participants et des autres sujets sur les résultats ou sur les résultats futurs.
• Si les participants s'inquiètent d'un trouble génétique potentiel, le participant et son médecin peuvent choisir de le tester spécifiquement. Cela nécessiterait des échantillons de sang ou de tissus supplémentaires et ne ferait pas partie de ce projet de recherche.
• La présence d'un marqueur génétique d'une maladie ne signifie pas nécessairement que les participants développeront cette maladie.

Risques inconnus. Les chercheurs informeront les participants s'ils apprennent quoi que ce soit qui pourrait faire changer d'avis leur participation à cette étude.