Complementaire factor H-haplotypes en roken bij leeftijdsgebonden maculadegeneratie (CFH&AMD)

ONDERZOEKSOPZET EN METHODEN A) Studieopzet Deze studie is opgezet om te bepalen of roken de complementactivatie verhoogt en of er specifieke AMD-genotypes zijn die bijzonder gevoelig zijn voor dit verhoogde niveau van serumcomplementcomponenten.

B) Selectie van proefpersonen en controles Casusproefpersonen en leeftijdsafhankelijke (binnen 5 jaar) controleproefpersonen zullen worden gerekruteerd volgens een protocol dat is goedgekeurd door de Johnson and DeBakey VA Medical Centers en de Medical University of South Carolina (MUSC) Human Investigation Review Board .

Inclusiecriteria

• Case-subjecten met een duidelijke diagnose van AMD en ten minste een 20/40 zicht op de fundus.
• Controleproefpersonen met <5 kleine harde drusen en minimaal 20/40 zicht op de fundus.
• Alle proefpersonen zullen in staat zijn om een ​​bloedmonster af te staan, de afwezigheid van onderstaande uitsluitingscriteria aan te tonen, hun eigen toestemming te geven of een wettelijke vertegenwoordiger beschikbaar te hebben om toestemming voor hen te geven, in staat om alle aspecten van het testen te voltooien en in het algemeen in orde te zijn goede medische gezondheid naar het oordeel van de onderzoeksarts.

Uitsluitingscriteria

• Personen die geen toestemming kunnen geven en die geen wettelijke vertegenwoordiger hebben, van wie de best gecorrigeerde gezichtsscherpte voor beide ogen slechter is dan 20/40, die een medicijn gebruiken waarvan bekend is dat het retinopathie veroorzaakt, niet in staat zijn om mee te werken aan het voltooien van de test, en die zich melden met media-opaciteit, die ziekten vertonen die fenotypisch overlappen met AMD, zoals drusen of pigmentstoornis van het retinale pigmentepitheel; of onvoldoende bewijs leveren om AMD te diagnosticeren.
• Individuen die zich presenteren met maculaire dystrofieën, toxoplasmose, histoplasmose, degeneratieve bijziendheid, centrale sereuze chorioretinopathie, of een ziekte of behandeling die het vermogen om drusen te herkennen zou verminderen, zoals laserfotocoagulatie, eerdere netvliesloslatingschirurgie, posterieure uveïtis en trauma.

Steekproefomvang en vermogensschatting In totaal zullen 150 proefpersonen en 150 controlepersonen worden geworven. De steekproefomvang werd bepaald door de onderzoeksbevindingen statistisch te simuleren met behulp van de volgende aannames: een alfaniveau van 0,05; 2-zijdige hypothesetesten; en een verwachte verdeling over de CC-, CT- en TT-factor H-genotypes van respectievelijk 8,1%, 52% en 39,9% [1 en ervan uitgaande dat ~35% van de proefpersonen huidige rokers zijn. Deze steekproefomvang zou 85% vermogen opleveren om significant roken te detecteren door genotype-interactie, de belangrijkste focus van deze studie.

Werving Case- en op leeftijd afgestemde (binnen 5 jaar) controlepersonen zullen worden aangeworven. Werving vindt op twee manieren plaats: 1) ze worden gebeld of geworven na de diagnose in de spreekkamer. Na ondertekende toestemming zullen deze proefpersonen ook worden gevraagd informatie te verstrekken over hun rookstatus en zal er een bloedmonster (twee buisjes van 3 ml) worden verzameld.

C) Uitkomstmaten De incidentie van AMD zal tijdens het voorafgaande klinische bezoek zijn bepaald op basis van fundusfoto's en geaccepteerde AMD-definities. Aanvullende uitkomstmetingen die zullen helpen de ernst van de ziekte van AMD te karakteriseren, kunnen de gezichtsveldtest, OCT en fluoresceïne-angiogrammen zijn.

D) Gegevensanalyses

• Gegevens verzameld als genormaliseerde serumniveaus van complementfactoren Ba, C3d en fD- en fH-activiteitsniveaus zullen in eerste instantie worden geëvalueerd met univariate statistieken om te verzekeren dat de kwaliteit van de gegevens voldoende is voor verdere analyses. De associatie tussen elke gemeten parameter (d.w.z. serumniveaus van complementfactoren), AMD-diagnose, genotype en roken zal worden beoordeeld op een gestratificeerde bivariate manier met behulp van Student t-tests of Wilcoxon rank sum-tests, naargelang het geval, en er zullen standaardmetingen worden gebruikt om te controleren op normaliteit, scheeftrekken, enz.
• Multivariate analyses zullen worden uitgevoerd met behulp van algemene lineaire gemengde modellen [5]. De modellen bevatten willekeurige subjecteffecten om rekening te houden met de afhankelijkheid tussen herhaalde metingen van subjecten. Dit type model is ideaal wanneer er meerdere metingen aan proefpersonen worden uitgevoerd, bijvoorbeeld wanneer laboratoriummetingen in drievoud worden uitgevoerd. De van belang zijnde afhankelijke variabelen zijn de metingen van het complementniveau (log-getransformeerd, indien nodig), terwijl de onafhankelijke variabelen AMD-status (geval/controle), factor H-genotype (CC, CT, TT), roken (huidig, vroeger, nooit ), en een interactieterm met factor H-genotype en rookstatus. De interactieterm zal ons helpen te bepalen of de impact van factor H-genotype en roken op serumcomplementniveaus lineair (additief) of niet-lineair (bijv. Multiplicatief) is. Het model zal ook aanpassingen bevatten voor leeftijd, geslacht en ras, die allemaal van invloed kunnen zijn op complementfactoren. Alle verschillen tussen haplotypes worden dus aangepast (gecorrigeerd) voor effecten die kunnen worden toegeschreven aan leeftijd, geslacht of ras. Verschillende correlatiestructuren zullen worden onderzocht op de willekeurige subjecteffecten en de onderzoekers zullen Akaike's informatiecriterium gebruiken om het meest geschikte model te selecteren. Secundaire analyses omvatten het uitsluiten van nooit-rokers, om de aard van de associatie (indien aanwezig) tussen roedel-/jaargeschiedenissen te beoordelen. factor H genotypen. en hun complementniveaus. Een aanvullende analyse (met behulp van voorwaardelijke logistische regressie) zal worden uitgevoerd om te bepalen of roken interageert met het factor H-genotype van een proefpersoon met betrekking tot het risico op AMD. Nogmaals, dit model zal worden aangepast voor leeftijd, geslacht en ras, en de resultaten zullen worden uitgedrukt als odds ratio's die verband houden met het risico op AMD.

E) Potentiële risico's

• Onderwerpen zullen een uitgebreid oogonderzoek hebben ondergaan dat geen deel uitmaakte van dit onderzoek. De mogelijke risico's zijn niet te beschrijven.
• Venapunctie voor volbloed. De risico's van venapunctie zijn pijn of blauwe plekken op de plaats van venapunctie; flauwvallen of duizeligheid; of infectie op de plaats van de naaldprik. Geen van deze zijn blijvende of substantiële verliezen. Klinisch personeel is opgeleid om met deze complicaties om te gaan.
• Persoonlijke informatie. Het delen van persoonlijke informatie (bloedmonsters, persoonlijke geschiedenis, genetische informatie, etc.) is niet zonder risico. Onderzoek om genen te identificeren die een ziekte of eigenschap veroorzaken of eraan bijdragen, is een steeds belangrijkere manier om de rol van genen bij ziekten bij de mens te begrijpen. De deelnemers kregen een toestemmingsformulier omdat de onderzoekers van Johnson en DeBakey VA Medical Centers het bloedmonster van de deelnemers willen opnemen in een onderzoeksproject, of omdat ze dergelijke biologische monsters willen bewaren voor toekomstig onderzoek.

Er zijn verschillende dingen die deelnemers moeten weten voordat ze het bloed laten onderzoeken of bewaren.

• Bloedmonsters worden opgeslagen onder een alfanumerieke identificatie die eventueel aan de deelnemers kan worden gekoppeld.
• Naast de naam kan andere informatie over deelnemers worden gekoppeld aan bloedmonsters.
• Genetische informatie over de deelnemers zal vaak van toepassing zijn op familieleden.
• De deelnemers hebben het recht om te weigeren dat hun bloed wordt onderzocht of bewaard voor toekomstig onderzoek.
• De wet van South Carolina schrijft voor dat genetische informatie, verkregen uit tests of uit dit onderzoek, vertrouwelijk moet worden gehouden.
• Genetisch onderzoek roept lastige vragen op over het informeren van deelnemers en andere proefpersonen over (toekomstige) resultaten.
• Als de deelnemers zich zorgen maken over een mogelijke genetische aandoening, kunnen de deelnemer en hun arts ervoor kiezen om er specifiek op te testen. Hiervoor zijn extra bloed- of weefselmonsters nodig en dit maakt geen deel uit van dit onderzoeksproject.
• De aanwezigheid van een genetische marker voor een ziekte betekent niet noodzakelijkerwijs dat de deelnemers die ziekte zullen ontwikkelen.

Onbekende risico's. De onderzoekers zullen de deelnemers laten weten of ze iets vernemen dat van gedachten zou kunnen veranderen over deelname aan dit onderzoek.