Haplótipos do Fator H do Complemento e Tabagismo na Degeneração Macular Relacionada à Idade (CFH&AMD)

DESENHO E MÉTODOS DE PESQUISA A) Desenho do estudo Este estudo foi desenhado para determinar se fumar aumenta a ativação do complemento e se existem genótipos específicos de DMRI que são particularmente sensíveis a esse nível elevado de componentes séricos do complemento.

B) Seleção de indivíduos e controles Indivíduos de caso e indivíduos de controle da mesma idade (dentro de 5 anos) serão recrutados de acordo com um protocolo aprovado pelos Johnson and DeBakey VA Medical Centers e pelo Conselho de Revisão de Investigação Humana da Universidade Médica da Carolina do Sul (MUSC). .

Critério de inclusão

• Sujeitos do caso com um diagnóstico claro de DMRI e pelo menos uma visão 20/40 do fundo de olho.
• Indivíduos de controle com <5 pequenas drusas duras e pelo menos uma visão 20/40 do fundo.
• Todos os indivíduos terão a capacidade de fornecer uma amostra de sangue, demonstrar a ausência dos critérios de exclusão listados abaixo, fornecer seu próprio consentimento ou ter um representante legal disponível para fornecer consentimento para eles, capaz de concluir todos os aspectos do teste e estar em geral boa saúde médica na opinião do médico do estudo.

Critério de exclusão

• Indivíduos impossibilitados de dar consentimento e sem representante legal, cuja melhor acuidade visual corrigida para ambos os olhos seja inferior a 20/40, que estejam em uso de medicamento sabidamente causador de retinopatia, incapazes de cooperar para a realização dos exames e que se apresentem com opacidade da mídia, que exibem doenças que se sobrepõem fenotipicamente à DMRI, como drusas ou distúrbios pigmentares do epitélio pigmentar da retina; ou fornecer evidências insuficientes para diagnosticar AMD.
• Indivíduos que se apresentam com distrofias maculares, toxoplasmose, histoplasmose, miopia degenerativa, coriorretinopatia serosa central ou qualquer doença ou tratamento que diminua a capacidade de reconhecer drusas, como fotocoagulação a laser, cirurgia prévia de descolamento de retina, uveíte posterior e trauma.

Tamanho da amostra e estimativa de poder Um total de 150 indivíduos de caso e 150 indivíduos de controle serão recrutados. O tamanho da amostra foi determinado simulando estatisticamente os achados do estudo usando as seguintes suposições: um nível alfa de 0,05; teste de hipóteses de 2 lados; e uma distribuição esperada entre os genótipos do fator H CC, CT e TT de 8,1%, 52% e 39,9%, respectivamente, [1 e assumindo que aproximadamente 35% dos indivíduos são fumantes atuais. Esse tamanho de amostra forneceria 85% de poder para detectar um tabagismo significativo por interação genotípica, o foco principal deste estudo.

Recrutamento Serão recrutados sujeitos de controle de caso e de mesma idade (dentro de 5 anos). O recrutamento se dará de duas formas: 1) serão convocados ou recrutados após o diagnóstico no consultório médico. Mediante consentimento assinado, esses indivíduos também serão solicitados a fornecer informações sobre seu status de fumante e uma amostra de sangue (dois tubos de 3 mL) será coletada.

C) Medidas de resultado A incidência de AMD terá sido determinada na visita clínica anterior com base em fotografias de fundo de olho e definições de AMD aceitas. Medições de resultado adicionais que ajudarão a caracterizar a gravidade da doença AMD podem incluir o teste de campo visual, OCT e angiogramas de fluoresceína.

D) Análise de dados

• Os dados reunidos como níveis séricos normalizados dos fatores do complemento Ba, C3d e fD e os níveis de atividade do fH serão inicialmente avaliados com estatística univariada para garantir que a qualidade dos dados seja adequada para análises posteriores. A associação entre cada parâmetro medido (ou seja, níveis séricos de fatores de complemento), diagnóstico de DMRI, genótipo e tabagismo será avaliada de forma bivariada estratificada usando testes t de Student ou testes de soma de classificação de Wilcoxon, conforme apropriado, e avaliações de medida padrão serão usadas para verificar a normalidade, inclinação, etc.
• Análises multivariadas serão conduzidas através do uso de modelos lineares mistos gerais [5]. Os modelos incluirão efeitos de sujeitos aleatórios para explicar a dependência entre medições repetidas de sujeitos. Esse tipo de modelo é ideal quando há várias medições em sujeitos, como quando as medições de laboratório são realizadas em triplicata. As variáveis ​​dependentes de interesse serão as medições do nível de complemento (log transformado, se necessário), enquanto as variáveis ​​independentes incluirão o status de DMRI (caso/controle), genótipo do fator H (CC, CT, TT), tabagismo (atual, anterior, nunca ) e um termo de interação envolvendo o genótipo do fator H e o tabagismo. O termo de interação nos ajudará a determinar se o impacto do genótipo do fator H e do tabagismo nos níveis de complemento sérico é linear (aditivo) ou não linear (por exemplo, multiplicativo). O modelo também incluirá ajustes para idade, sexo e raça, que podem afetar os fatores de complemento. Assim, quaisquer diferenças entre os haplótipos serão ajustadas (corrigidas) para efeitos que possam ser atribuídos à idade, sexo ou raça. Diferentes estruturas de correlação serão examinadas para os efeitos aleatórios dos sujeitos, e os investigadores usarão o Critério de Informação de Akaike para selecionar o modelo mais apropriado. As análises secundárias envolverão a exclusão de fumantes que nunca fumaram, para avaliar a natureza da associação (se houver) entre os históricos maço/ano. genótipos do fator H. e seus níveis de complemento. Uma análise adicional (usando regressão logística condicional) será realizada para determinar se o tabagismo interage com o genótipo do fator H de um sujeito em relação ao risco de DMRI. Novamente, este modelo será ajustado para idade, sexo e raça, e os resultados serão expressos como razões de chances associadas ao risco de DMRI.

E) Riscos potenciais

• Os indivíduos terão recebido um exame oftalmológico abrangente que não fez parte deste estudo. Os riscos potenciais não podem ser descritos.
• Punção venosa para sangue total. Os riscos da punção venosa são dor ou hematoma no local da punção venosa; desmaios ou tonturas; ou infecção no local da picada da agulha. Nenhuma dessas perdas são permanentes ou substanciais. A equipe clínica é treinada para lidar com essas complicações.
• Informações pessoais. O compartilhamento de informações pessoais (amostras de sangue, histórico pessoal, informações genéticas, etc.) não é isento de riscos. A pesquisa para identificar os genes que causam ou contribuem para uma doença ou característica é uma forma cada vez mais importante de tentar entender o papel dos genes nas doenças humanas. Os participantes receberam um formulário de consentimento porque os investigadores do Johnson and DeBakey VA Medical Centers desejam incluir a amostra de sangue dos participantes em um projeto de pesquisa ou porque desejam guardar tais amostras biológicas para pesquisas futuras.

Há várias coisas que os participantes devem saber antes de permitir que o sangue seja estudado ou guardado.

• As amostras de sangue serão armazenadas sob um identificador alfanumérico que poderá eventualmente ser vinculado aos participantes.
• Além do nome, outras informações sobre os participantes podem estar relacionadas às amostras de sangue.
• As informações genéticas sobre os participantes geralmente se aplicam aos membros da família.
• Os participantes têm o direito de recusar que seu sangue seja estudado ou guardado para pesquisas futuras.
• A lei da Carolina do Sul determina que as informações genéticas, obtidas de qualquer teste ou desta pesquisa, sejam mantidas em sigilo.
• A pesquisa genética levanta questões difíceis sobre como informar os participantes e outros sujeitos sobre quaisquer resultados ou resultados futuros.
• Se os participantes estiverem preocupados com um possível distúrbio genético, o participante e seu médico podem optar por fazer um teste específico para isso. Isso exigiria amostras adicionais de sangue ou tecido e não faria parte deste projeto de pesquisa.
• A presença de um marcador genético para uma doença não significa necessariamente que os participantes irão desenvolver essa doença.

Riscos desconhecidos. Os pesquisadores informarão aos participantes se souberem de algo que possa fazer uma mudança de opinião sobre a participação neste estudo.