Doplňkové haplotypy faktoru H a kouření u věkem podmíněné makulární degenerace (CFH&AMD)

NÁVRH A METODY VÝZKUMU A) Návrh studie Tato studie je navržena tak, aby určila, zda kouření zvyšuje aktivaci komplementu a zda existují specifické genotypy AMD, které jsou zvláště citlivé na tuto zvýšenou hladinu složek komplementu v séru.

B) Výběr subjektů a kontrol Případové subjekty a kontrolní subjekty stejného věku (do 5 let) budou přijímány podle protokolu schváleného Johnson and DeBakey VA Medical Centers a Medical University of South Carolina (MUSC) Human Investigation Review Board .

Kritéria pro zařazení

• Případové subjekty s jasnou diagnózou AMD a alespoň 20/40 pohledem na fundus.
• Kontrolní subjekty s <5 malými tvrdými drúzami a alespoň 20/40 pohledem na fundus.
• Všechny subjekty budou mít možnost poskytnout vzorek krve, prokázat nepřítomnost níže uvedených kritérií pro vyloučení, poskytnout svůj vlastní souhlas nebo mít k dispozici právního zástupce, který jim poskytne souhlas, bude schopen dokončit všechny aspekty testování a bude obecně dobrý zdravotní stav podle názoru lékaře studie.

Kritéria vyloučení

• Jedinci, kteří nejsou schopni poskytnout souhlas a kteří nemají zákonného zástupce, jejichž nejlepší korigovaná zraková ostrost pro obě oči je horší než 20/40, kteří užívají léky, o nichž je známo, že způsobují retinopatii, nejsou schopni spolupracovat na dokončení testování a kteří se dostaví s opacitou média, kteří vykazují onemocnění, která se fenotypicky překrývají s AMD, jako jsou drúzy nebo pigmentové poruchy retinálního pigmentového epitelu; nebo poskytnout nedostatečné důkazy pro diagnostiku AMD.
• Jedinci, kteří mají makulární dystrofie, toxoplazmózu, histoplazmózu, degenerativní myopii, centrální serózní chorioretinopatii nebo jakoukoli nemoc nebo léčbu, která by snížila schopnost rozpoznat drúzy, jako je laserová fotokoagulace, předchozí operace odchlípení sítnice, zadní uveitida a trauma.

Odhad velikosti vzorku a výkonu Celkem bude přijato 150 subjektů s případem a 150 kontrolních subjektů. Velikost vzorku byla stanovena statistickou simulací výsledků studie za použití následujících předpokladů: hladina alfa 0,05; 2stranné testování hypotéz; a očekávanou distribuci napříč genotypy CC, CT a TT faktoru H 8,1 %, 52 % a 39,9 %, v tomto pořadí [1 a za předpokladu, že ~35 % subjektů jsou současní kuřáci. Tato velikost vzorku by poskytla 85% sílu pro detekci významného kouření interakcí genotypu, což je hlavní zaměření této studie.

Budou přijaty případy náboru a kontrolní subjekty odpovídajícího věku (do 5 let). Nábor bude probíhat dvěma způsoby: 1) budou zavoláni nebo přijati po stanovení diagnózy v ordinaci lékaře. Po podepsaném souhlasu budou tyto subjekty také požádány, aby poskytly informace o svém kuřáckém stavu, a bude jim odebrán vzorek krve (dvě 3ml zkumavky).

C) Měření výsledku Incidence AMD bude stanovena při předchozí klinické návštěvě na základě fotografií očního pozadí a přijatých definic AMD. Další výsledná měření, která pomohou charakterizovat závažnost onemocnění AMD, mohou zahrnovat test zorného pole, OCT a fluoresceinový angiogram.

D) Analýza dat

• Data sestavená jako normalizované sérové ​​hladiny faktorů komplementu Ba, C3d a hladiny aktivity fD a fH budou zpočátku vyhodnoceny pomocí jednorozměrných statistik, aby se zajistilo, že kvalita dat je adekvátní pro další analýzy. Souvislost mezi každým měřeným parametrem (tj. sérovými hladinami faktorů komplementu), diagnózou AMD, genotypem a kouřením bude hodnocena stratifikovaným bivariačním způsobem pomocí Studentových t testů nebo Wilcoxonových rank sum testů, podle potřeby, a budou použita standardní měření. zkontrolovat normalitu, zkreslení atd.
• Vícerozměrné analýzy budou prováděny pomocí obecných lineárních smíšených modelů [5]. Modely budou zahrnovat náhodné efekty subjektu pro zohlednění závislosti mezi opakovanými měřeními subjektů. Tento typ modelu je ideální, když se na subjektech provádí více měření, například když se laboratorní měření provádějí trojmo. Zájmové závislé proměnné budou měření hladiny komplementu (v případě potřeby transformovaný logaritmus), zatímco nezávislé proměnné budou zahrnovat stav AMD (případ/kontrola), genotyp faktoru H (CC, CT, TT), kouření (aktuální, dřívější, nikdy ) a interakční termín zahrnující genotyp faktoru H a kuřácký status. Interakční termín nám pomůže určit, zda je vliv genotypu faktoru H a kouření na hladiny komplementu v séru lineární (aditivní) nebo nelineární (např. multiplikativní). Model bude také zahrnovat úpravy pro věk, pohlaví a rasu, které mohou ovlivnit faktory komplementu. Jakékoli rozdíly mezi haplotypy budou tedy upraveny (opraveny) na účinky, které lze přičíst věku, pohlaví nebo rase. Různé korelační struktury budou zkoumány na náhodné subjektivní efekty a vyšetřovatelé použijí Akaikeovo informační kritérium k výběru nejvhodnějšího modelu. Sekundární analýzy budou zahrnovat vyloučení nekuřáků, aby se posoudila povaha vztahu (pokud existuje) mezi historií balení/roku. genotypy faktoru H. a úrovně jejich komplementu. Bude provedena další analýza (s použitím podmíněné logistické regrese), aby se určilo, zda kouření interaguje s genotypem faktoru H subjektu s ohledem na riziko AMD. Tento model bude opět upraven podle věku, pohlaví a rasy a výsledky budou vyjádřeny jako poměry šancí spojené s rizikem AMD.

E) Možná rizika

• Subjekty podstoupí komplexní oční vyšetření, které nebylo součástí této studie. Potenciální rizika nelze popsat.
• Venipunkce pro plnou krev. Rizika venepunkce jsou bolest nebo modřiny v místě venepunkce; mdloby nebo závratě; nebo infekce v místě vpichu jehly. Žádná z nich nejsou trvalé nebo podstatné ztráty. Klinický personál je vyškolen k řešení těchto komplikací.
• Osobní informace. Sdílení osobních údajů (odběry krve, osobní historie, genetické informace atd.) není bez rizika. Výzkum zaměřený na identifikaci genů, které způsobují nebo přispívají k onemocnění nebo rysu, je stále důležitějším způsobem, jak se pokusit porozumět roli genů v lidských onemocněních. Účastníci dostali formulář souhlasu, protože vyšetřovatelé Johnson and DeBakey VA Medical Centers chtějí zahrnout vzorek krve účastníků do výzkumného projektu, nebo protože chtějí takové biologické vzorky uložit pro budoucí výzkum.

Existuje několik věcí, které by účastníci měli vědět, než dovolí krev studovat nebo zachránit.

• Vzorky krve budou uloženy pod alfanumerickým identifikátorem, který by mohl být případně spojen s účastníky.
• Kromě jména mohou být se vzorky krve spojeny i další informace o účastnících.
• Genetické informace o vůli účastníků se často týkají rodinných příslušníků.
• Účastníci mají právo odmítnout, aby byla jejich krev studována nebo uchovávána pro budoucí výzkumné studie.
• Zákon Jižní Karolíny nařizuje, aby genetické informace získané z jakýchkoli testů nebo z tohoto výzkumu byly důvěrné.
• Genetický výzkum vyvolává obtížné otázky ohledně informování účastníků a dalších subjektů o jakýchkoli výsledcích nebo o budoucích výsledcích.
• Pokud se účastníci obávají možné genetické poruchy, účastník a jejich lékař se mohou rozhodnout testovat konkrétně na ni. To by vyžadovalo další vzorky krve nebo tkáně a nebylo by to součástí tohoto výzkumného projektu.
• Přítomnost genetického markeru pro nemoc nutně neznamená, že se u účastníků tato nemoc vyvine.

Neznámá rizika. Vědci dají účastníkům vědět, pokud se dozvědí o něčem, co by mohlo změnit názor na účast v této studii.